背景與目的:強(qiáng)直性肌營(yíng)養(yǎng)不良Ⅰ型(myotonic dystrophy type 1,DM1)是一種常見(jiàn)的遺傳性肌病,常發(fā)病于成年人,伴有多系統(tǒng)疾病與逐步惡化的癥狀。肌萎縮是臨床上常見(jiàn)的肌肉系統(tǒng)受累主要癥狀之一,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(Skeletal muscle satellite cell,SSC)在肌肉再生中起著重要作用。SSC的增殖能力的下降以及數(shù)量的減少都會(huì)導(dǎo)致肌肉再生的障礙,可出現(xiàn)肌萎縮。DM1病人的肌肉活檢中顯示SSC存在增殖能力的下降,但具體機(jī)制不詳。肌盲管樣蛋白1(Muscleblind-like Protein 1,MBNL1)在 DM1 的發(fā)病中有著重要的作用,MBNL1負(fù)責(zé)調(diào)控RNA剪接工作。然而,MBNL1的作用不僅體現(xiàn)在RNA分子剪切上,MBNL1可以調(diào)控神經(jīng)干細(xì)胞的增殖,可以促進(jìn)神經(jīng)突的生長(zhǎng)。小鼠MBNL1缺失會(huì)出現(xiàn)出肌肉萎縮的癥狀。我們前期利用TALEN基因編輯技術(shù)消除了 DM1病人來(lái)源的神經(jīng)干細(xì)胞和心肌細(xì)胞的毒性RNA,成功逆轉(zhuǎn)了 MBNL1的表型。雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)...

【文章頁(yè)數(shù)】：130 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1三系iPSC形態(tài)（Scalebar=100μm）及DM1骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的建立（Scalebar=50μm）

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文41圖1三系iPSC形態(tài)（Scalebar=100μm）及DM1骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的建立（Scalebar=50μm）Figure1Morphologyofthree-lineiPSC（Scalebar=100μm）andestablishmentofD....

圖2三系SSC的MBNL1在細(xì)胞核和細(xì)胞漿的分布

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文43圖2三系SSC的MBNL1在細(xì)胞核和細(xì)胞漿的分布Figure2ThedistributionofMBNL1inthenucleusandcytoplasm.圖A和B表明DM1-03SSC中的核MBNL1蛋白表達(dá)高于DM1-04SSC中的核表達(dá)（P....

圖3CCK8檢測(cè)DM1-04SSC，DM1-03SSC和DM1-13-3SSC的增殖能力Figure3CCK8detectsproliferationofDM1-04SSC,DM1-03SSCandDM1-13-3SSC

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文442.3CCK8增殖檢測(cè)DM1-04SSC，DM1-03SSC和DM1-13-3SSC增殖能力CCK8檢測(cè)三系骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖能力，DM1-03SSC增殖能力顯著低于DM1-04SSC（P<0.05，如表3，圖3所示）；基因修飾組即DM1-13....

圖4DM1-04SSC，DM1-03SSC和DM1-13-3SSC的Ki67免疫熒光染色（Scalebar=50μm）

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文46圖4DM1-04SSC，DM1-03SSC和DM1-13-3SSC的Ki67免疫熒光染色（Scalebar=50μm）Figure4Ki67immunofluorescencestainingofDM1-04SSC,DM1-03SSCandDM1....

本文編號(hào)：3957231