膠質瘤來源的Exosome沖擊樹突狀細胞體外誘導特異性CTL的初步研究
發(fā)布時間:2024-03-24 01:09
目的:旨在證實膠質瘤原代細胞可以分離出外來體,從外周血誘導分離能夠培養(yǎng)出樹突狀細胞,將膠質瘤細胞培養(yǎng)液分離出的外來體致敏樹突狀細胞,觀察其體外所引起的細胞毒性T淋巴細胞(CTL)殺傷活性。 方法:選取臨床上高度惡性膠質瘤標本,制作成單個膠質瘤細胞懸浮液,將懸浮液分成兩份,取其中一份進行原代細胞培養(yǎng),收集培養(yǎng)兩周的細胞培養(yǎng)液,采用差速離心法分離出膠質瘤細胞所分泌的外來體;取另一份膠質瘤單個細胞懸浮液,通過反復離心和凍融的方法制備出膠質瘤冷凍抗原;采取同一患者外周血,利用淋巴細胞裂解液并采用離心的方法,從外周血中獲取單核細胞和T淋巴細胞,其中這些單核細胞在細胞因子IL-4、GM-CSF作用下進行培養(yǎng),使其轉變成為不成熟的樹突狀細胞,然后添加細胞因子TNF-α繼續(xù)培養(yǎng),使其變?yōu)槌墒斓臉渫粻罴毎;將膠質瘤來源的外來體、膠質瘤冷凍抗原分別沖擊樹突狀細胞并與T淋巴細胞共同培養(yǎng),通過MTT法檢測兩種免疫方法體外對膠質瘤細胞的殺傷效應,并對所得結果采用SPSS16.0進行統(tǒng)計學分析。 結果:膠質瘤細胞原代培養(yǎng)過程中,在倒置相差顯微鏡下觀察生長良好,貼壁細胞成長梭狀,大小均勻、形態(tài)單一,呈彌漫型分布; ...
【文章頁數】:36 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料與方法
結果
附圖
附表
討論
結論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
個人簡歷
本文編號:3936739
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材料與方法
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