發(fā)布時間：2023-11-11 12:13

　　目的:探索凝血酶合并缺氧對PC12細胞損傷的最佳反應時間點,建立體外缺氧合并凝血酶誘導的PC12細胞損傷模型,模擬急性缺血性中風時凝血酶合并缺氧毒性損傷的細胞內(nèi)環(huán)境。探討急性缺血性中風(Acute Ischemic Stroke,AIS)引起的腦細胞損傷的分子機制及解毒化瘀方對凝血酶合并缺氧損傷的干預作用與Ras/Raf/撕裂原激活蛋白激酶(mitogenactivatedp rotein kinase kinase,MEK)/細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(Extracellular singnal-regulated Kinase,ERK)信號轉(zhuǎn)導通路的作用機制。方法:采用三氣培養(yǎng)箱和無血清(Dulbeccos Modified Eagle Medium DMEM)高糖型培養(yǎng)液合并不同濃度的凝血酶(0、50、100、150和200U/ml)造成細胞損傷后,再將每組缺氧狀態(tài)下培養(yǎng)1h、6h、12h、24h,采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)分析細胞的存活率、TUNEL法檢測細胞的凋亡程度,篩選出凝血酶合并缺氧對PC12細胞損傷的最佳模型條件,建立凝血酶合并缺氧的體外細胞模型。將PC12細胞隨機分為空白...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英語縮略詞表
前言
材料與方法
    1.實驗材料
        1.1 實驗細胞
        1.2 實驗動物
        1.3 藥物
        1.4 試劑
        1.5 主要儀器
    2. 實驗方法
        2.1 解毒化瘀方含藥血漿的制備
        2.2 凝血酶合并缺氧誘導PC12細胞損傷模型的建立
        2.3 指標檢測
        2.4 統(tǒng)計學方法
    3.結(jié)果
        3.1 細胞模型的篩選和確定
        3.2 解毒化瘀方對凝血酶合并缺氧細胞毒性損傷的干預作用
    4 討論
        4.1 西醫(yī)對AIS的認識
        4.2 凝血酶在AIS中的作用
        4.3 凝血酶受體
        4.4 凝血酶毒性損傷相關(guān)信號通路
        4.5 傳統(tǒng)醫(yī)學對AIS的認識
        4.6 解毒化瘀方的立方依據(jù)及用藥分析
        4.7 解毒化瘀方對凝血酶及其受體與ERK信號通路的影響
結(jié)論
致謝
參考文獻
附圖 A：經(jīng)NGF誘導具有神經(jīng)元形態(tài)的 PC12 細胞
附圖 B 150U/ml 凝血酶在缺氧 1h、6h、12h、24h 后細胞凋亡情況（綠色熒光為凋亡細胞）
附圖 C：各組細胞 PAR-1、MEK-1、ERK-1、ERK-2 的 m RNA 表
附錄 D：免疫熒光相關(guān)信號通路 ERK1/2、p-ERK1/2 蛋白表達
附錄 E：綜述
    參考文獻



本文編號：3862573