發(fā)布時(shí)間：2023-06-05 00:37

　　研究背景:缺血性卒中是指因供血?jiǎng)用}狹窄或堵塞導(dǎo)致局部腦組織供血不足的一種急性腦血管病,最終發(fā)展為部分腦功能喪失,具有發(fā)病率、致死率、致殘率高的特點(diǎn)。目前,臨床上藥物治療手段仍以組織纖溶酶原激活劑溶栓為主,但治療時(shí)間窗狹窄和再灌注損傷風(fēng)險(xiǎn)大的缺點(diǎn)限制了其臨床應(yīng)用。內(nèi)皮細(xì)胞,作為血腦屏障的基本組成,在腦缺血損傷過程中對(duì)維持血腦屏障的功能、減少神經(jīng)炎癥的發(fā)生至關(guān)重要。然而,目前仍然沒有找到理想的“內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)劑”應(yīng)對(duì)缺血引起的血管內(nèi)皮損傷問題。因此,從新的視角尋找血管內(nèi)皮干預(yù)策略,是當(dāng)前缺血性腦卒中防治共同關(guān)注的研究命題之一。近年來,外泌體(Exosomes)作為細(xì)胞分泌的一種可攜帶大量生物信息穿過血腦屏障的囊泡,在缺血性腦卒中的診斷和治療方面具有巨大潛力。因此,以外泌體作為研究切入點(diǎn),探索卒中病程中潛在的分子靶點(diǎn)并進(jìn)行干預(yù),對(duì)建立有效的卒中干預(yù)策略具有重大意義。研究目的:以外泌體中含量豐富的mi RNA為研究對(duì)象,尋找缺血性卒中患者循環(huán)外泌體中差異表達(dá)的mi RNA。論證差異表達(dá)mi RNA是否可以作為缺血性腦卒中治療的有效靶點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果:1.過夜超速離心法從患者血清樣本中純化外泌體...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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中英文縮略詞
1 引言
2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 材料
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    3.2 OGD模型構(gòu)建
    3.3 蛋白提取與定量
    3.4 免疫印跡(Western Blot)
    3.5 細(xì)胞免疫熒光(Immunocytochemistry)
    3.6 RNA提取及RT-qPCR熒光定量分析
    3.7 去外泌體培養(yǎng)基的制備和外泌體提取
    3.8 透射電鏡觀察外泌體的形態(tài)
    3.9 外泌體粒徑檢測
    3.10 miRNA轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
    3.11 mimics/inhibitor轉(zhuǎn)染
    3.12 TUNEL染色
    3.13 流式細(xì)胞凋亡檢測
    3.14 原代細(xì)胞培養(yǎng)
    3.15 MCAO模型建立
    3.16 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 超速離心提取血清外泌體方法學(xué)構(gòu)建
    4.2 缺血性腦卒中患者組血清外泌體含量相較于正常對(duì)照組上調(diào)
    4.3 缺血性腦卒中患者血清外泌體miRNAs表達(dá)譜生物信息學(xué)分析
    4.4 MCAO模型小鼠的梗死灶miR-339-5p上調(diào)
    4.5 OGD上調(diào)PC12 細(xì)胞和其外泌體中的miR-339-5p
    4.6 OGD模型中內(nèi)皮細(xì)胞接收更多外泌體miR-339-5p
    4.7 miR-339-5p減少OGD損傷模型導(dǎo)致的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡
    4.8 miR-339-5p可能通過下調(diào)BAX和 BCL2L11 減少內(nèi)皮細(xì)胞凋亡
    4.9 miR-339-5p減少OGD損傷導(dǎo)致的內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子上調(diào)
5 討論
6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 外泌體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷和治療中的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果



本文編號(hào)：3831335