目的 探討細胞內(nèi)酸性環(huán)境下自噬／溶酶體途徑(autophagy-lysosome pathway)與神經(jīng)退行性疾病的關(guān)系。 方法 利用pAd-miR-NHE1病毒懸液感染SH-SY5Y細胞,制備NHE-1基因敲低細胞模型。選擇合適的培養(yǎng)基,以制備細胞內(nèi)酸化模型。經(jīng)過篩選,選擇pH為5.8的酸性培養(yǎng)基培養(yǎng)pAd-miR-NHE1病毒感染后的細胞。將細胞分為三組：正常細胞組、細胞內(nèi)酸化組和陰性對照組(NC組)。在透射電鏡下觀察正常細胞組、NC組及在酸性環(huán)境負荷下0.5h、2h、4h、8h的細胞內(nèi)酸化組自噬體的形成,線粒體形態(tài)及溶酶體數(shù)目的變化,Western Blot檢測自噬標(biāo)記物L(fēng)C3Ⅱ和LC3Ⅰ的表達。 結(jié)果 1、透射電鏡下,正常組和NC組線粒體形態(tài)及溶酶體數(shù)目正常,NHE-1基因敲低細胞培養(yǎng)48小時后換成pH為5.8的酸性培養(yǎng)基培養(yǎng),測得細胞內(nèi)pH為6.65。較正常細胞組(pHi為7.27)和陰性對照組(pHi為7.24)顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。在此酸性環(huán)境負荷下0.5至4h可見線粒體腫脹,變形,溶酶體數(shù)目增多,自噬囊泡增多,自噬小體形成。8h可見一到兩個溶...

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文論著摘要
英文論著摘要
英文縮略語表
前言
實驗材料與方法
實驗結(jié)果
討論
結(jié)論
本研究創(chuàng)新性及局限性的自我評價
參考文獻
附錄
    綜述
        參考文獻
    在學(xué)期間科研成績
    致謝
    個人簡介



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