一直以來通過增加腫瘤細(xì)胞的應(yīng)激水平是治療腫瘤的一個(gè)基本方法,之前的研究表明,氧化應(yīng)激能夠破壞線粒體的功能,從而促進(jìn)引起線粒體膜通透性增加,引發(fā)細(xì)胞色素C的釋放,利用藥物誘導(dǎo)氧化應(yīng)激是治療腫瘤的一個(gè)有效的措施。維生素K3能夠誘導(dǎo)ROS的生成,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡,被認(rèn)為是一種潛在的抗腫瘤藥物。最近的研究表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是另一種凋亡的來源,錯(cuò)誤折疊蛋白的堆積引發(fā)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激能夠最終誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。ROS通過影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣平衡和對酶的氧化修飾能夠引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。 目的：用維生素K3作用于神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,同時(shí)聯(lián)用自噬抑制劑氯喹來抑制錯(cuò)誤折疊蛋白的降解來加劇內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,達(dá)到更大程度殺傷神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的目的。 方法：采用神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251為研究對象,用維生素K3誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,同時(shí)利用氯喹抑制錯(cuò)誤折疊蛋白的降解來加劇內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。1.采用MTT觀察VK3作用下以及VK3和氯喹聯(lián)用下U251細(xì)胞的存活率；2.采用Western blot方法檢測單獨(dú)使用VK3以及VK3聯(lián)用氯喹時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78的變化,以及泛素化蛋白,下游凋亡蛋白CHOP和caspase4/5的變化。 結(jié)果：1.維生素K3能夠通過...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第一章 引言
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)用試劑的配制
        2.1.5 Western b I ott i ng實(shí)驗(yàn)所需要的試劑的配制
    2.2 方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 MTT法檢測VK3以及連用氯喹對U251細(xì)胞生存率的影響
        2.2.3 Western Blotting檢測Grp78,泛素,caspase4/5,chop蛋白表達(dá)
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    3.1 氯喹對維生素K3抑制U251作用的影響
    3.2 Vk3 40μm內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白GRP78隨時(shí)間的變化
    3.3 氯喹對VK3引起U251內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激作用的影響
    3.4 氯喹對VK3引起的泛素化蛋白作用的影響
    3.5 氯喹對VK3引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)的凋亡的影響
第四章 討論
第五章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3753563