目的:探討Notch1/JNK信號通路在缺氧引起的神經元損傷中的作用。方法:原代培養(yǎng)新生SD大鼠皮層神經元,利用低氧條件培養(yǎng)建立缺氧模型。利用CCK-8實驗檢測在低氧誘導的不同時間,神經元的活性及siRNA干擾后神經元的活性;利用RT-q PCR與Western Blot檢測對照組與低氧組神經元中NICD,p-JNK,Caspase-3mRNA與蛋白的表達情況;利用siRNA轉染技術轉染Notch1 siRNA或JNK siRNA至神經元中后,利用Western Blot檢測低氧組與轉染組神經元中NICD,p-JNK,Caspase-3蛋白的表達情況。結果:缺氧情況下神經元活性較低,具有時間依賴性;缺氧情況下,神經元的NICD,p-JNK,Caspase-3 mRNA及蛋白的表達均顯著升高。抑制神經元中Notch1的活性,可進一步抑制JNK,Caspase-3的表達,改善神經元活性。結論:缺氧導致神經元Notch1信號被激活,Notch信號調節(jié)JNK的磷酸化,磷酸化的JNK進一步促進Caspase-3的激活,從而降低神經細胞的活性或促進神經細胞的死亡。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
        1.1 實驗動物
        1.2 主要試劑
    2 方法
        2.1 大鼠皮層神經元的原代培養(yǎng)
        2.2 細胞分組
        2.3 神經元活性檢測
        2.4 RT-q PCR檢測
        2.5 Western Blot檢測
        2.6 Notch1 siRNA的轉染
結果
    1低氧處理對神經元活性的影響
    2低氧誘導神經元中NICD、JNK和Caspase-3 mR-NA的表達
    3 低氧誘導神經元中NICD、p-JNK和活化的Caspase-3蛋白的表達
    4 siRNA干擾對神經元活性的影響
    5 siRNA干擾神經元中NICD、p-JNK和Caspase-3蛋白的表達
討論



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