目的：檢測膠質(zhì)瘤擴增序列41(Glioma-amplified sequence41, GAS41)基因在不同病理級別的神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織及神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系中的表達,探討GAS41基因在神經(jīng)膠質(zhì)瘤發(fā)展中的作用。 方法：(1)采用免疫組織化學染色法、Western blot從蛋白水平檢測30例不同病理級別的神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中GAS41的表達情況。 (2)通過Western blot檢測神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系中GAS41的表達情況,并通過分子克隆技術構建GAS41基因的RNA干擾慢病毒載體GV118-GAS41-RNAi,連同包裝質(zhì)粒pHelper1.0和包膜質(zhì)粒pHelper2.0共同轉染293T包裝細胞,收集儲存可表達GAS41特異性干擾慢病毒載體的病毒顆粒并進行滴度測定。 結果：(1)GAS41蛋白在高級別神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中的表達強于低級別神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織,且差異有統(tǒng)計學意義(P=0.011<0.05)。 (2)GAS41在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系A172中表達較高,構建的GAS41干擾慢病毒載體GV118-GAS41-RNAi經(jīng)PCR鑒定和測序,結果與設計序列完全相符,慢病毒重組載體構建成功,將GV...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 GAS41在神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中的表達及意義初探
    1 實驗材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結果
        2.1 免疫組織化學檢測各級別神級膠質(zhì)瘤中GAS41蛋白的表達
        2.2 免疫組織化學檢測結果的評分統(tǒng)計
        2.3 Western Blot檢測各級別神級膠質(zhì)瘤中GAS41蛋白的表達
    3 討論
    4 結論
第二部分 高表達GAS41細胞系的篩選GAS41 RNA干擾慢病毒的載體構建
    1 實驗材料與方法
        1.1 實驗材料
        1.2 實驗方法
    2 實驗結果
        2.1 Western Blot檢測神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系中GAS41蛋白的表達
        2.2 陽性克隆PCR電泳結果
        2.3 陽性克隆DNA測序結果
        2.4 慢病毒載體的包裝及滴度測定
    3 討論
    4 結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間主要研究成果
中英文縮略詞對照表
致謝



本文編號：3736314