目的：評估成體神經(jīng)干細胞移植治療大鼠腦出血療效,觀察移植的成體神經(jīng)干細胞在大鼠腦內(nèi)分化方向。方法：①取成年大鼠海馬齒狀回,通過機械分離及胰酶消化法制備單細胞懸液；密度梯度離心及培養(yǎng)基選擇法獲取成體神經(jīng)干細胞懸液；體外培養(yǎng)、鑒定及標記。②自體血紋狀體注入法制作大鼠腦出血模型20只,選取LONGA評分相同的模型鼠10只,隨機分為實驗組（注入神經(jīng)干細胞）和對照組（注入等量生理鹽水）各5只,術后24小時,將體外培養(yǎng)并標記的大鼠成體神經(jīng)干細胞通過立體定向腦實質(zhì)移植法移植入大鼠腦內(nèi)血腫周圍。③術后每周,連續(xù)7周,采用旋轉實驗及肢體放置實驗對大鼠進行行為學測試,以觀察大鼠神經(jīng)功能恢復狀況；7周后行免疫組化檢測移植的成體神經(jīng)干細胞在實驗組大鼠腦內(nèi)的分化方向。結果：①成體神經(jīng)干細胞在體外懸浮培養(yǎng)時逐漸成球生長,當克隆球直徑達到160±10um時,部分成體神經(jīng)干細胞開始長出突起,克隆球中央細胞因缺乏營養(yǎng)開始死亡,傳至第三代時,細胞仍能保持較高的增殖能力。②自體血注入大鼠腦內(nèi)紋狀體后,大鼠出現(xiàn)明顯腦出血癥狀及體征。③成體神經(jīng)干細胞移植入大鼠腦血模型腦內(nèi)后,實驗組大鼠神經(jīng)功能修復與對照組相比,存在顯著差異（P... 

【文章來源】：中南大學湖南省211工程院校985工程院校教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
英文縮略詞表
1 緒論
2 材料與方法
    2.1 成體神經(jīng)干細胞制備
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 成體神經(jīng)干細胞鑒定
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
    2.3 成體神經(jīng)干細胞標記
        2.3.1 材料
        2.3.2 方法
    2.4 腦出血模型制作
        2.4.1 材料
        2.4.2 方法
    2.5 成體神經(jīng)干細胞移植
        2.5.1 材料
        2.5.2 方法
    2.6 大鼠行為學測試
        2.6.1 材料
        2.6.2 方法
    2.7 免疫組織化學染色檢測
        2.7.1 材料
        2.7.2 方法
    2.8 統(tǒng)計學處理
3 實驗結果
    3.1 成體神經(jīng)干細胞制備結果
    3.2 腦出血模型制作結果
    3.3 成體神經(jīng)干細胞移植術后大鼠行為學測試結果
    3.4 成體神經(jīng)干細胞移植術后免疫組織化學染色結果
4 分析及討論
    4.1 成體神經(jīng)干細胞的制備探討
        4.1.1 成體神經(jīng)干細胞定位與分布
        4.1.2 成體神經(jīng)干細胞分離、純化探討
        4.1.3 成體神經(jīng)干細胞傳代時機探討
        4.1.4 成體神經(jīng)干細胞鑒定及標記方法探討
    4.2 腦出血模型制作方法探討
    4.3 成體神經(jīng)干細胞移植探討
        4.3.1 移植時間點選擇
        4.3.2 移植途徑選擇
        4.3.3 移植位點選擇
    4.4 成體神經(jīng)干細胞的功能
    4.5 成體神經(jīng)干細胞移植術后大鼠行為學測試結果分析
    4.6 成體神經(jīng)干細胞移植術后免疫組化結果分析
5 結論
6 展望
參考文獻
綜述
    References
附錄
    附錄A 海馬分離步驟及圖片
    附錄B 成體神經(jīng)干細胞培養(yǎng)方法
    附錄C 腦出血模型制作圖片
    附錄D 成體神經(jīng)干細胞移植圖片
攻讀學位期間論文發(fā)表與獲獎
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3622572