目的:探討nesfatin-1預(yù)處理大鼠大腦中動脈腦缺血再灌（Middle Cerebral Artery Ischemia-reperfusion MCAO/R）損傷后對caspase-3、Bcl-2及Bax的表達(dá)變化。方法:實(shí)驗(yàn)采用SD雄性大鼠70只,隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham組n=20）、手術(shù)組（I/R組n=25）、預(yù)處理組（nesfatin-1+I/R組n=25）。實(shí)驗(yàn)動物模型采用改良的Zea-Longa法制作。根據(jù)Longa評分法,對造模后大鼠下肢運(yùn)動即行為學(xué)進(jìn)行評分,通過longa評分的多少對MCAO/R組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能損傷程度的判定并確定造模成功的穩(wěn)定性。對sham組僅做血管分離、I/R組、nesfatin-1+I/R組大鼠缺血2小時再灌24小時后采用斷頭法處死,腦組織采用0.2%TTC染液37℃水浴避光、染色,4%多聚甲醛固定24小時,測量不同組別的腦梗死體積百分比。各組造模穩(wěn)定后:分別將各組大鼠斷頭處死取腦組織固定或超低溫保存。采用蘇木素-伊紅染色法觀察腦組織形態(tài)學(xué)變化,采用Tunel法染色觀察皮質(zhì)和海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)并統(tǒng)計(jì)各組神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù),采用免疫組織化學(xué)法... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學(xué)院安徽省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

2%TTC染色后各組腦組織染色結(jié)果

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文3TUNEL 染色法顯示各組大鼠腦組織細(xì)胞凋亡形態(tài)情況TUNEL 染色結(jié)果顯示 I/R 組和 nesfatin-1+I/R 組與 Sham 組比較：神經(jīng)細(xì)胞核固縮、核仁消失；出現(xiàn)棕黃色顆粒，神經(jīng)細(xì)胞界限不清，神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于假手術(shù)組（Ρ<0.05）。nesfatin-1+I/R 組與手術(shù)組（I/R 組）相比：經(jīng)過人重組蛋白 nesfatin-1 處理過的缺血再灌注的大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)下降（Ρ<0.05）；陽性細(xì)胞數(shù)減少；神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)棕黃色顆粒減少。因此，人重組蛋白 nesfatin-1 對大鼠腦缺血再灌注損傷導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用。

皖南醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文3TUNEL 染色法顯示各組大鼠腦組織細(xì)胞凋亡形態(tài)情況TUNEL 染色結(jié)果顯示 I/R 組和 nesfatin-1+I/R 組與 Sham 組比較：神經(jīng)細(xì)胞核固縮、核仁消失；出現(xiàn)棕黃色顆粒，神經(jīng)細(xì)胞界限不清，神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯高于假手術(shù)組（Ρ<0.05）。nesfatin-1+I/R 組與手術(shù)組（I/R 組）相比：經(jīng)過人重組蛋白 nesfatin-1 處理過的缺血再灌注的大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡指數(shù)下降（Ρ<0.05）；陽性細(xì)胞數(shù)減少；神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)棕黃色顆粒減少。因此，人重組蛋白 nesfatin-1 對大鼠腦缺血再灌注損傷導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞凋亡具有保護(hù)作用。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]丁苯酞注射液對動脈瘤性蛛網(wǎng)膜下腔出血早期腦損傷的作用與機(jī)制探討[J]. 劉昌亞,胡學(xué)斌,熊志勇,鄭津,劉楊,姚凡.  中國卒中雜志. 2018(07)
[2]氫醌對人白血病細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax及Caspase-3表達(dá)的影響[J]. 李攀登,王永紅,肖蕓,溫緣緣,萬秀方,鄭丹,趙雪,龔駿杰,張?jiān)綍r,張亞莉,楊國珍.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2018(05)
[3]6-芐氨基嘌呤對大鼠小腸缺血再灌注損傷的影響[J]. 劉玉梅,張自強(qiáng),朱雪敏,位蘭,石珂,潘麗.  動物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2017(09)
[4]梔子苷對大鼠脊髓缺血再灌注后脊髓水腫及神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響[J]. 桂凱紅,張海燕,黃林,周旺.  臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2017(12)
[5]丁苯酞對腎間質(zhì)纖維化的干預(yù)作用及機(jī)制研究[J]. 曹義甫,王秀芬,宋培,解坤,武佳,劉翠紅,李英.  重慶醫(yī)學(xué). 2017(06)
[6]Propofol protects against blood-spinal cord barrier disruption induced by ischemia/reperfusion injury[J]. Li-jie Xie,Jin-xiu Huang,Jian Yang,Fen Yuan,Shuang-shuang Zhang,Qi-jing Yu,Ji Hu.  Neural Regeneration Research. 2017(01)
[7]川芎嗪減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷后心肌細(xì)胞凋亡及其機(jī)制研究[J]. 呂磊,張潔,殷宇剛,徐軍.  東南國防醫(yī)藥. 2016(04)
[8]苦參素對心肌缺血再灌注損傷大鼠氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡的影響[J]. 陳樹杰.  現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2016(05)
[9]白芍總苷對大鼠心肌缺血再灌注損傷后心肌細(xì)胞凋亡的影響[J]. 張華龍,張友良,魏慶民.  中藥藥理與臨床. 2015(04)
[10]氧化苦參堿體外抗乙型肝炎病毒作用[J]. 任衍菊,張玉萍,金敏,陳照立,諶志強(qiáng),邱志剛,王新為,李君文.  中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2012(14)

博士論文
[1]川芎嗪干預(yù)大鼠缺血性中風(fēng)作用及其機(jī)制的研究[D]. 高宗桂.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2014



本文編號：3606579