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線粒體分裂抑制劑對大鼠海馬細胞氧糖剝奪/復氧模型中能量代謝的影響

發(fā)布時間:2022-01-15 22:43
  目的:探討線粒體分裂抑制齊(mitochondrial division inhibitor,mdivi一1)在腦缺血再灌注損傷(ischemia/reperfusion injury,IRI)中對能量代謝的影響。方法:將體外培養(yǎng)8d的Wistar大鼠海馬神經(jīng)元隨機地分為4組:正常對照組(C組)、賦形劑組(V組)、mdivi-1+缺血再灌注組(M組)、缺血再灌注組(Ⅰ組)。利用海馬神經(jīng)元氧糖剝奪法建立缺血再灌注模型,M組建立缺血再灌注模型之前給予mdivi-1預處理40min。缺血6h,再灌注20h后應用Western blot法檢測各組線粒體分裂蛋白1(dynamin-related protein1,Drp1).B細胞淋巴癌/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相關X蛋白(Bcl-2Associated X Protein,Bax)的表達水平,酶標儀法測三磷酸腺苷(ATP)含量及Na+-K+-ATP酶、ca2+-Mg2+-ATP酶、線粒體呼吸鏈酶復合體ⅠⅡ、Ⅲ和Ⅳ的活性。結果:與C組比較,M組和Ⅰ組ATP含量及Na+-K+-ATP酶、ca2+-Mg2+-ATP酶、線粒體呼吸鏈酶復合... 

【文章來源】:青島大學山東省

【文章頁數(shù)】:34 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
引言
第一章 實驗試劑及儀器
    1.1 實驗動物
    1.2 材料與試劑
    1.3 主要儀器與設備
第二章 實驗方法
    2.1 海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)及形態(tài)學觀察
    2.2 海馬神經(jīng)元氧糖剝奪/復氧模型的建立
    2.3 實驗分組
    2.4 蛋白質提取
    2.5 WESTERN BLOT法檢測DRP1、BCL-2/BAX蛋白表達水平
    2.6 流式細胞術檢測細胞膜電位(△ψM)
    2.7 線粒體分離和線粒體呼吸鏈酶復合體Ⅰ Ⅱ Ⅲ和Ⅳ的活性檢測
    2.8 ATP含量、NA~+-K~+-ATP酶和CA~(2+)-MG~(2+)-ATP酶活性測定
    統(tǒng)計學處理
第三章 實驗結果
    3.1 海馬神經(jīng)元形態(tài)學觀察
    3.2 WESTERN BLOT檢測DRP1和BCL-2/BAX蛋白表達
    3.3 流式細胞術及熒光顯微鏡檢測線粒體膜電位
    3.4 線粒體呼吸鏈酶復合體Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的活性
    3.5 ATP含量、NA~+-K~+-ATP酶和CA~(2+)-MG~(2+)-ATP酶活性
第四章 討論
結論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]線粒體動力學改變在神經(jīng)變性疾病中的地位[J]. 李文偉,朱敏,呂傳真.  生理科學進展. 2011(05)
[2]腦缺血再灌注后神經(jīng)細胞凋亡機制及藥物保護作用的研究進展[J]. 汪瑩,許棟明,王文,高東明,張麗,艾厚喜,李林.  中國康復理論與實踐. 2010(12)
[3]細胞凋亡的線粒體通路[J]. 方敏,王曉東.  北京大學學報(醫(yī)學版). 2002(01)



本文編號:3591450

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