目的:動脈粥樣硬化（AS）是缺血性卒中的重要病因。炎癥,尤其是NLRP3炎性小體參與了動脈粥樣硬化斑塊形成的核心過程,增強自噬可以抑制動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展,二者之間的相互作用近年來受到廣泛關注。近期有研究顯示NLRP3炎性小體可以被自噬降解,這一過程伴有炎性小體組成蛋白的泛素化修飾。但是動脈粥樣硬化中兩者的關系及泛素化在兩者銜接中的作用及相關機制尚不明確。本研究主要有以下目標:1、驗證ox-LDLs對泡沫細胞中炎癥和自噬的影響;2、驗證泡沫細胞中自噬和炎癥的關系;3、探索自噬是通過影響哪些炎癥相關蛋白調節(jié)NLRP3炎性小體功能;4、確定在自噬精確識這些炎癥相關蛋白過程中起作用的泛素鏈。方法:1、用ox-LDLs干預THP-1來源的巨噬細胞建立泡沫細胞模型。在泡沫細胞模型中,給與時間梯度和濃度梯度的ox-LDLs刺激,應用Western blot和ELISA方法,檢測NLRP3炎性小體及自噬相關蛋白表達水平,觀察ox-LDLs對NLRP3炎癥和自噬的影響;2、應用雷帕霉素和3-MA上調或下調泡沫細胞中自噬水平,觀察炎癥水平及NLRP3炎性小體相關蛋白表達變化;3、對泡沫細胞轉染p62-... 

【文章來源】：青島大學山東省

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

ox-LDLs和炎癥的關系

ox-LDLs和自噬的關系

青島大學碩士學位論文16比，p62-siRNA組細胞裂解液中NLRP3、ASC（圖4b）和p20（圖4b，4c）及上清中的IL-1β（圖4d）的表達水平升高。這提示，抑制p62的表達起到了和3-MA、巴弗洛霉素相似的效果，增強了炎癥。圖3自噬對炎癥的影響。（a，b，c）抑制或增強自噬后，p62、LC3及NLRP3炎性小體相關蛋白表達變化；（d）抑制或增強自噬后，細胞培養(yǎng)液上清中IL-1β濃度變化；（e）巴弗洛霉素干預下，NLRP3和ASC表達變化；*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3579279