背景近年來,損傷腦組織的修復(fù)一直是國(guó)內(nèi)外研究的重點(diǎn)與難點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)谷氨酸可以促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞（NSC:Neural Stem Cells）的增殖與分化,為損傷腦組織的修復(fù)提供了新的理論基礎(chǔ)和思路。腦梗死及腦組織缺血損傷后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,從而使大量谷氨酸（glutamic acid）外流,引起局部谷氨酸升高。雖然濃度升高的谷氨酸對(duì)組織有毒害作用,但是一定濃度的谷氨酸卻可以促進(jìn)NSC的增殖與分化。隨著研究的不斷深入,我們發(fā)現(xiàn)谷氨酸是通過其受體及Shh（sonic hedgehog）信號(hào)通路來促進(jìn)NSC的增殖和分化。和以往的細(xì)胞學(xué)角度的研究相比,近年來不斷進(jìn)步與完善的分子生物學(xué)技術(shù)為我們提供新的研究方法和思路。在本文中,我們從分子層面深入地對(duì)谷氨酸及其受體及Shh （sonic hedgehog）信號(hào)通路介導(dǎo)的NSC的增殖和分化進(jìn)行了研究。目的體外培養(yǎng)3日齡SD大鼠海馬區(qū)原代神經(jīng)干細(xì)胞,并使用傳代三代以上神經(jīng)干細(xì)胞來篩選目的基因最適濃度,向三代神經(jīng)干細(xì)胞中加入目的基因,上調(diào)和沉默Shh基因后觀察神經(jīng)干細(xì)胞中谷氨酸刺激下Nesting的表達(dá),Shh信號(hào)通路對(duì)神經(jīng)干細(xì)胞增殖能力的影響,同時(shí)阻斷上游... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)情況ｌＯＯＸ??

我們將不同分組的病毒質(zhì)粒依次進(jìn)行ＲＮＡ提取，為了驗(yàn)證病毒質(zhì)粒??的準(zhǔn)確性，將各組進(jìn)行瓊脂糖電泳鑒定，鑒定結(jié)果表明各組病毒質(zhì)粒均??能正常表達(dá)。（圖２）??２３??

＞０．０５）；?Ｓｈｈ－ｓｈＲＮＡ組Ｓｈｈ蛋白表達(dá)明顯受爵Ｊ抑制（尸＜０．０５），而Ｎｅｓｔｉｎ蛋白表達(dá)未??受到明顯影響（戶＞０．０５）?；?ＮＣ－ｓｈＲＮＡ組中Ｓｈｈ、Ｎｅｓｔｉｎ蛋白檢測(cè)結(jié)果顯示，Ｓｈｈ??及Ｎｅｓｔｉｎ蛋白表達(dá)均明顯增加（戶＜０．０５）。（圖７）??ＧＡＰＤＨ?ｉＭＭ?ａｍｉ?ｎｉｌ?ｉｎｉ?４＾＾’?誦??ｒｎｍｍ?線公拳潮ｐｉｔｏ?１７邸??－?＇??Ｎｅｓｔｉｎ?善凌順誦??務(wù)?游?滬??＊難?＃?滬??－?＃?如ｗ－－——??滲?垃??文５?ｆ??Ｕｎ?’?１＇??銀?效＊?巧加ｃ傑店?欽卸據(jù)獻(xiàn)?竊材艦ｊｔｉ萊睞??爲(wèi)＾？州。??圖７谷氨酸刺激下Ｓ化及Ｎｅｓｔｉｎ表達(dá)量均升高，當(dāng)ＮＭＤＡ民１抑制存在化Ｓ化及Ｎｅ巧ｉｎ表達(dá)??量均無(wú)明顯變化，當(dāng)Ｓｈｈ被ＲＮＡｉ沉默后Ｓｈｈ?ｍＲＮＡ表達(dá)量明顯下降；??２９??


本文編號(hào)：3539324