目的:探討Toll樣受體4（TLR4）/P38/JNK信號通路在海馬神經元凋亡中的作用及其機制,為神經退行性疾�。∟D）的發(fā)病機制與防治研究提供新的實驗依據(jù)。方法:采用體外培養(yǎng)7 d的新生大鼠海馬神經元,免疫熒光雙標法鑒定海馬神經元純度。用TLR4配體脂多糖（LPS）或TLR4抗體預處理海馬神經元,以激活或阻斷TLR4的作用。實驗1設正常對照組、LPS組及TLR4抗體+LPS組;免疫熒光法檢測P-P38,P-JNK的表達。實驗2分為6組:正常對照組,LPS組,TLR4抗體+LPS組,SB202190（抑制P38）+LPS組,SP600125（抑制JNK）+LPS組,PD98059（抑制ERK）+LPS組;分別用TLR4抗體、P38、JNK及ERK的抑制劑預處理海馬神經元后再給以LPS刺激24 h,Western blot法檢測Bcl-2,Bax,Active-caspase-3的表達變化;流式細胞術檢測海馬神經元凋亡率。結果:LPS組海馬神經元P-P38、P-JNK的表達明顯高于正常對照組（P<0.01）,TLR4抗體+LPS組P-P38,P-JNK表達顯著低于LPS組（P<... 

【文章來源】：中國應用生理學雜志. 2016,32(06)CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 海馬神經元的原代培養(yǎng)及純度鑒定
    1.3 實驗設計
        1.3.1 免疫熒光化學染色觀察P-P38,P-JNK的表達
        1.3.2 Western blot
    1.4 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 海馬神經元的原代培養(yǎng)及純度鑒定
    2.2 免疫熒光法檢測P-P38、P-JNK的表達
    2.3 Western blot檢測P-P38、P-JNK的蛋白表達
    2.4 流式細胞術測定抑制TLR4/P38/JNK通路后海馬神經元凋亡率
3 討論
    3.1 激活海馬神經元TLR4引起凋亡率的增加
    3.2 激活海馬神經元TLR4對P-P38、p-JNK表達的影響
    3.3 TLR4/p38/JNK信號通路的激活能降低Bcl-2/Bax、增加Active-caspase-3表達
    3.4 TLR4/P38/JNK信號通路參與了海馬神經元的凋亡


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Toll-like receptor 4-mediated signaling participates in apoptosis of hippocampal neurons[J]. Yue He,Ailing Zhou,Wei Jiang.  Neural Regeneration Research. 2013(29)
[2]Role of Toll-like receptor 4 in inflammatory reactions of hippocampal neurons[J]. Yae Hu,Jiahui Mao,Yu Zhang,Ailing Zhou.  Neural Regeneration Research. 2013(16)
[3]Oxymatrine reduces neuroinflammation in rat brain A signaling pathway[J]. Jiahui Mao 1 , Yae Hu 1 , Ailing Zhou 1 , Bing Zheng 2 , Yi Liu 3 , Yueming Du 3 , Jia Li 3 , Jinyang Lu 3 , Pengcheng Zhou 3 1 Department of Pathophysiology, Medical School of Nantong University, Nantong 226001, Jiangsu Province, China 2 Department of Urology, the First People’s Hospital of Nantong, Nantong 226001, Jiangsu Province, China 3 Undergraduate of Medical School of Nantong University, Nantong 226001, Jiangsu Province, China.  Neural Regeneration Research. 2012(30)
[4]脂多糖聯(lián)合海人藻酸誘導的熱性驚厥導致幼鼠海馬神經元凋亡[J]. 施曉容,邵巧燕,劉俊紅,陳余鵬,陳林鶯.  福建醫(yī)科大學學報. 2012(02)



本文編號：3529252