補陽還五湯聯(lián)合骨髓基質(zhì)干細胞移植對腦缺血大鼠Notch信號通路的影響
發(fā)布時間:2021-11-07 16:39
目的:通過建立大腦中動脈閉塞的腦缺血大鼠模型,觀察補陽還五湯聯(lián)合BMSCs移植對腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損評分、病理學(xué)改變以及對Notch信號通路的影響,研究Notch信號通路在腦缺血之后的變化規(guī)律,探討補陽還五湯和BMSCs移植對腦缺血的神經(jīng)保護作用是否與Notch信號通路有關(guān)系,有望為腦缺血的治療提供一個新的思路。方法:將動物隨機分為5組,采用線栓法制作大腦中動脈閉塞的大鼠模型,分為空白組、模型組、補陽還五湯組、BMSCs移植組、補陽還五湯和BMSCs移植聯(lián)合組。采用全骨髓培養(yǎng)法提取骨髓基質(zhì)干細胞,進行培養(yǎng)傳代,至細胞形態(tài)基本變?yōu)榧氶L梭形之后,采用流式細胞術(shù)進行鑒定,在移植之前用Brdu進行標記,通過尾靜脈移植BMSCs,對移植組及聯(lián)合組進行Brdu-DCX免疫熒光雙標檢測,造模后用Zea-Longa法進行神經(jīng)功能缺損評分;HE染色觀察缺血區(qū)的病理學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法測定大腦組織缺血部位Notch信號通路Notch1、Hes1、Jagged1的陽性表達。結(jié)果:(1)神經(jīng)功能缺損評分結(jié)果:24h時間點,與模型組進行比較,聯(lián)合組的評分降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);7d、1...
【文章來源】:陜西中醫(yī)藥大學(xué)陜西省
【文章頁數(shù)】:47 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一部分 理論探討
1 中醫(yī)對中風(fēng)的認識
1.1 中醫(yī)對中風(fēng)的病因病機認識
1.2 中醫(yī)藥對缺血性中風(fēng)的辨證論治
2 西醫(yī)對腦缺血的認識
2.1 腦缺血的發(fā)病機制
2.2 西醫(yī)對腦缺血的治療
3 骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)治療腦缺血的機制
4 補陽還五湯治療腦缺血的研究進展
5 Notch信號通路與腦缺血的關(guān)系
第二部分 實驗部分
實驗一 骨髓基質(zhì)干細胞的提取、培養(yǎng)及鑒定
1 實驗?zāi)康?br> 2 實驗材料
2.1 實驗動物
2.2 主要實驗儀器及試劑
3 實驗方法
3.1 骨髓基質(zhì)干細胞的提取
3.2 骨髓基質(zhì)干細胞的培養(yǎng)、傳代
3.3 骨髓基質(zhì)干細胞的鑒定
3.4 骨髓基質(zhì)干細胞移植前的標記
4 結(jié)果
4.1 骨髓基質(zhì)干細胞的形態(tài)學(xué)鏡下觀
4.2 骨髓基質(zhì)干細胞的鑒定結(jié)果
5 討論
實驗二 補陽還五湯聯(lián)合骨髓基質(zhì)干細胞移植對腦缺血大鼠Notch信號通路的影響
1 實驗?zāi)康?br> 2 實驗材料
2.1 實驗動物
2.2 主要實驗試劑
3 實驗方法
3.1 動物模型建立
3.2 藥物配制及動物分組
3.3 骨髓基質(zhì)干細胞移植
3.4 神經(jīng)功能缺損評分
3.5 TTC染色步驟
3.6 灌注、包埋切片制作步驟
3.7 病理學(xué)(HE染色)步驟
3.8 免疫組化檢測步驟
4 統(tǒng)計學(xué)分析
5 實驗結(jié)果
5.1 骨髓基質(zhì)干細胞遷移結(jié)果
5.2 神經(jīng)功能缺損評分結(jié)果
5.3 病理學(xué)(HE)染色的結(jié)果
5.4 Notch信號通路分子的陽性細胞表達
6 討論
結(jié)論
結(jié)語
參考文獻
附錄
致謝
在學(xué)期間主要研究成果
本文編號:3482194
【文章來源】:陜西中醫(yī)藥大學(xué)陜西省
【文章頁數(shù)】:47 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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摘要
abstract
引言
第一部分 理論探討
1 中醫(yī)對中風(fēng)的認識
1.1 中醫(yī)對中風(fēng)的病因病機認識
1.2 中醫(yī)藥對缺血性中風(fēng)的辨證論治
2 西醫(yī)對腦缺血的認識
2.1 腦缺血的發(fā)病機制
2.2 西醫(yī)對腦缺血的治療
3 骨髓基質(zhì)干細胞(BMSCs)治療腦缺血的機制
4 補陽還五湯治療腦缺血的研究進展
5 Notch信號通路與腦缺血的關(guān)系
第二部分 實驗部分
實驗一 骨髓基質(zhì)干細胞的提取、培養(yǎng)及鑒定
1 實驗?zāi)康?br> 2 實驗材料
2.1 實驗動物
2.2 主要實驗儀器及試劑
3 實驗方法
3.1 骨髓基質(zhì)干細胞的提取
3.2 骨髓基質(zhì)干細胞的培養(yǎng)、傳代
3.3 骨髓基質(zhì)干細胞的鑒定
3.4 骨髓基質(zhì)干細胞移植前的標記
4 結(jié)果
4.1 骨髓基質(zhì)干細胞的形態(tài)學(xué)鏡下觀
4.2 骨髓基質(zhì)干細胞的鑒定結(jié)果
5 討論
實驗二 補陽還五湯聯(lián)合骨髓基質(zhì)干細胞移植對腦缺血大鼠Notch信號通路的影響
1 實驗?zāi)康?br> 2 實驗材料
2.1 實驗動物
2.2 主要實驗試劑
3 實驗方法
3.1 動物模型建立
3.2 藥物配制及動物分組
3.3 骨髓基質(zhì)干細胞移植
3.4 神經(jīng)功能缺損評分
3.5 TTC染色步驟
3.6 灌注、包埋切片制作步驟
3.7 病理學(xué)(HE染色)步驟
3.8 免疫組化檢測步驟
4 統(tǒng)計學(xué)分析
5 實驗結(jié)果
5.1 骨髓基質(zhì)干細胞遷移結(jié)果
5.2 神經(jīng)功能缺損評分結(jié)果
5.3 病理學(xué)(HE)染色的結(jié)果
5.4 Notch信號通路分子的陽性細胞表達
6 討論
結(jié)論
結(jié)語
參考文獻
附錄
致謝
在學(xué)期間主要研究成果
本文編號:3482194
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