目的：1.搜集人腦膜瘤術(shù)后標本進行原代培養(yǎng)并鑒定。2. Her2siRNA慢病毒轉(zhuǎn)染人腦膜瘤細胞，觀察轉(zhuǎn)染前后細胞的增殖活性和生物學行為的改變。方法：1.在神經(jīng)外科術(shù)后搜集新鮮的腦膜瘤組織，經(jīng)過原代和傳代培養(yǎng)后獲得的腦膜瘤細胞，在對數(shù)生長期用免疫組化法和FISH法對其進行鑒定。2.將Her2siRNA慢病毒載體轉(zhuǎn)染到人腦膜瘤細胞中，倒置顯微鏡在1-4天4個時間點觀察病毒的表達，確定最佳感染復數(shù)（MOI）。3.實驗分為三組：①Control組：用含10-15%血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)人的腦膜瘤細胞；②M ock組：感染空載體的腦膜瘤細胞；③Her2siRNA組：感染了Her2siRNA慢病毒的腦膜瘤細胞。4.慢病毒感染72小時后，用CCK-8法檢測各組腦膜瘤細胞的增殖抑制率；同時應用RT-PCR法檢測Her2/neu基因的表達情況；Western blot法檢測Her2、VEGF和Ki-67蛋白的表達情況。5.將各組細胞接種至裸鼠腋下檢測成瘤情況。結(jié)果：1.搜集新鮮的人腦膜瘤術(shù)后標本，進行原代培養(yǎng)，在10%DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)下，貼壁后呈多角形生長。2.由上海漢恒股份有限公司建立Her2s... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

人腦膜瘤細胞生長特點（A:×200B:×200）

圖 3-2 人腦膜瘤細胞免疫組化的表達（EMA:×200 Vim:×200）Fig.3-2 human meningioma cells expression in immunohistochemistry（EMA:×200 Vim:×200）2.2 人腦膜瘤組織的 FISH 檢測切片上橘紅色信號代表 Her2 的基因信號，綠色信號代表 17 號染色體著絲粒

代表 Her2 的基因信號，綠色信號代表 挑選，20-30 個腫瘤細胞核的雙色信號號總數(shù)比值≥2.2、部分區(qū)域眾多信號連擴增；若部分區(qū)比值介于 1.8-2.2 之間，（如圖 3-3）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]PI3K/Akt/mTOR信號通路與腫瘤[J]. 張丹丹,李慶林.  安徽醫(yī)藥. 2012(03)
[2]HER2狀態(tài)與腦膜瘤分級及復發(fā)的相關(guān)性[J]. 王淳良,梅金紅,王珊珊,徐姍,徐林林,熊一峰.  中華病理學雜志. 2010 (03)
[3]熒光原位雜交檢測腦膜瘤中HER2基因狀態(tài)[J]. 楊玄勇,王淳良,梅金紅,徐姍,王珊珊.  中華實驗外科雜志. 2009 (11)
[4]HER2、Ki-67、TK1蛋白在腦膜瘤中的表達[J]. 王珊珊,梅金紅,王淳良,徐姍,徐林林,熊一峰,張寶紅.  江西醫(yī)學院學報. 2009(04)
[5]MVD和VEGF蛋白的表達及16層CT動態(tài)增強與腦膜瘤復發(fā)的關(guān)系[J]. 王淳良,萬紅萍,梅金紅,周莉,王珊珊,徐姍,秦興義.  實用臨床醫(yī)學. 2008(11)
[6]HER2與腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移[J]. 王珊珊,梅金紅.  生命的化學. 2008(05)
[7]腦膜瘤復發(fā)與微血管密度、血管內(nèi)皮生長因子表達的關(guān)系[J]. 王淳良,梅金紅,王珊珊,徐林林,秦興義.  中華實驗外科雜志. 2008 (06)
[8]腦膜瘤侵襲性機制的分子生物學研究進展[J]. 曾令成,郭東生,雷霆.  中國臨床神經(jīng)外科雜志. 2007(11)
[9]解讀《世界衛(wèi)生組織中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類（2007年）》[J]. 楊學軍.  中國神經(jīng)精神疾病雜志. 2007(09)
[10]Identification of novel nuclear localization signal within the ErbB-2 protein[J]. Qiao Qiao CHEN, Xiao Ying CHEN, Yun Yun JIANG, Jing LIU*School of Life Science, University of Science and Technology of China, Hefei 230027, China.  Cell Research. 2005(07)



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