研究背景神經干細胞（NSCs）的發(fā)現(xiàn)為許多伴有神經元丟失的神經系統(tǒng)疾病提供新的治療途徑。然而,NSCs來源是目前研究面臨的一大難題�，F(xiàn)對外源性神經干細胞來源的研究主要關注體細胞誘導的NSCs,因其誘導周期短,且不經過多能干細胞階段致瘤性低,是目前安全高效的神經干細胞來源。其中用小分子化合物（SM）對特定細胞通路的抑制或激活,使體細胞誘導為神經干細胞,安全性高,是目前最具研究前景的神經干細胞來源。本研究通過文獻閱讀和前期預實驗,篩選出7種小分子化合物,但發(fā)現(xiàn)其共同作用會引起細胞大量死亡。故結合體細胞重編程為NSCs的規(guī)律和SM作用通路的特點,以及預實驗結果,我們在不同階段采用不同的SM,以減少每階段SM的使用和提高誘導效率獲得階段小分子化合物誘導的神經干細胞（SMSINS）。此外,在誘導方案探索階段,我們發(fā)現(xiàn)丙戊酸（VPA）,作為誘導方案中其中一種小分子化合物,其在增強NSCs誘導效率和神經元分化方面顯示出最顯著的作用,可能與VPA對mTOR信號通路的激活有關。因此,我們提出研究假設:VPA明顯提高誘導神經干細胞（iNSCs）誘導效率,使iNSCs能更好向神經元分化,可能與mTOR信號的... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

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天細胞出現(xiàn)中心聚集現(xiàn)象，且細胞數逐漸增多，形成細胞巢團狀聚集中心（圖??ｌｂ）。誘導１０天結束后將ＳＭＳＩＮＳ細胞接種在ＰＤＬ／Ｌ孵育過的培養(yǎng)板上，用ＮＳＣｓ??標志蛋白Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２行免疫熒光檢測（圖２ｂ－ｃ）。為了更好比較ＳＭＳＩＮＳ的??神經干細胞特點，遂從胚胎小鼠腦中分離天然ＮＳＣｓ細胞，作為本實驗的陽性對??照，將誘導的ＳＭＳＩＮＳ細胞的特點與其對比。為了進一步定量分析誘導ＳＭＳＩＮＳ??細胞的神經干性特征，用流氏細胞學（ＦＡＣＳ）的方法檢測ＳＭＳＩＮＳ細胞和ＮＳＣｓ??的Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２的表達，結果顯示天然ＮＳＣｓ的Ｎｅｓｔｉｎ表達略高于ＳＭＳＩＮＳ，??但其Ｓｏｘ２表達略低于ＳＭＳＩＮＳ?（圖２ｄ）。??２３??

圖３?ＳＭＳＩＮＳ具有類似ＮＳＣｓ的特征

【參考文獻】：
期刊論文
[1]內源性神經干細胞的調控[J]. 樓瓊,王曉梅.  醫(yī)學綜述. 2017(18)
[2]TGF-β信號傳導通路及其生物學功能[J]. 劉镕,趙琴平,董惠芬,蔣明森.  中國病原生物學雜志. 2014(01)



本文編號：3362028