本文關(guān)鍵詞：微囊化嗅鞘細胞移植對P2X4受體介導神經(jīng)病理痛的作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討微囊化嗅鞘細胞移植治療神經(jīng)病理性疼痛對P2X4受體在背根神經(jīng)節(jié)表達的影響及作用。方法:⒈將一只SD大鼠處死,取其嗅球,用NASH差速貼壁法培養(yǎng)嗅鞘細胞,并做嗅鞘細胞形態(tài)及純度鑒定;⒉制作微囊化嗅鞘細胞(microencapsulated olfactory ensheathing cells.MC-OECs);⒊將96只雌雄不拘健康的SD大鼠,隨機分為4組(每組24只):即假手術(shù)組(sham組)、坐骨神經(jīng)損傷模型組(CCI組)、嗅鞘細胞移植組(OECs組)及微囊化嗅鞘細胞移植組(MC-OECs組):將OECs及微囊化OECs移植到損傷坐骨神經(jīng)周圍;4.術(shù)后7、14d用行為學方法測定大鼠機械縮足反射閾值,運用RT-PCR、免疫組織化學染色及蛋白印跡技術(shù)檢測L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體的表達水平情況。結(jié)果:術(shù)后7、14d,(1)采用行為學方法檢測大鼠機械縮足反射閾值:與sham組對比,CCI組大鼠機械縮足反射閾值明顯減低;與CCI組對比,OECs組與MC-OECs組大鼠機械縮足反射閾值明顯增加;與OECs組對比,MC-OECs組大鼠機械縮足反射閾值稍增加。(2)L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體RT-PCR m RNA表達水平:CCI組與sham組相比,m RNA表達量明顯增加;而與CCI組對比,嗅鞘細胞組及微囊化嗅鞘細胞組表達水平明顯減低。(3)免疫組織化學染色:與sham組對比,CCI組L4-5背根神經(jīng)節(jié)陽性細胞P2X4受體陽性細胞平均吸光度明顯增加,而與CCI組對比,OECs組及MC-OECs組則明顯減低。(4)蛋白印跡:與sham組對比,CCI組P2X4受體蛋白表達明顯增加;而與CCI組對比,OECs組及MC-OECs組則明顯減低。與OECs組對比,MC-OECs組在L4-5背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體m RNA、陽性細胞平均吸光度及蛋白表達水平稍低于OECs組。結(jié)論:嗅鞘細胞及微囊化嗅鞘細胞移植能減輕坐骨神經(jīng)損傷后引起的神經(jīng)病理性疼痛,可能是通過降低L4-5處背根神經(jīng)節(jié)P2X4受體的表達水平,而且微囊化嗅鞘細胞組治療效果優(yōu)于嗅鞘細胞移植組。
【關(guān)鍵詞】：微囊化 嗅鞘細胞 背根神經(jīng)節(jié) 神經(jīng)病理性疼痛 P2X4受體
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R741
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 引言10-14
• 第2章 材料與方法14-28
• 2.1 實驗材料14-19
• 2.1.1 實驗動物14
• 2.1.2 實驗主要試劑14-15
• 2.1.3 主要儀器15-16
• 2.1.4 主要試劑及培養(yǎng)液16-19
• 2.2 實驗方法19-28
• 2.2.1 動物模型建立19-20
• 2.2.2 嗅鞘細胞的取材及培養(yǎng)20
• 2.2.3 嗅鞘細胞的鑒定20-21
• 2.2.4 微囊化嗅鞘細胞的制作21
• 2.2.5 大鼠機械縮足反射閾值檢測21
• 2.2.6 免疫組化染色檢測21-22
• 2.2.7 RT-PCR檢測22-25
• 2.2.8 蛋白印跡(Western Blot)25-27
• 2.2.9 統(tǒng)計學分析27-28
• 第3章 結(jié)果28-34
• 3.1 嗅鞘細胞培養(yǎng)情況及免疫熒光染色結(jié)果28-29
• 3.2 大鼠機械縮足反射閾值測量結(jié)果29-30
• 3.3 RT-PCR結(jié)果30-31
• 3.4 蛋白印跡結(jié)果31-32
• 3.5 免疫組化染色結(jié)果32-34
• 第4章 討論34-37
• 4.1 嗅鞘細胞的來源及培養(yǎng)34-35
• 4.2 OECs移植對疼痛相關(guān)P2X4受體的影響35
• 4.3 微囊化OECs移植對神經(jīng)病理性疼痛相關(guān)P2X4受體影響作用35-37
• 第5章 結(jié)論與展望37-38
• 5.1 結(jié)論37
• 5.2 展望37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻39-43
• 攻讀學位期間的研究成果43-44
• 綜述 移植嗅鞘細胞修復(fù)神經(jīng)損傷作用的研究進展44-50
• 參考文獻49-50

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