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Wnt與NF-κB信號(hào)通路在調(diào)控LPS刺激的BV2細(xì)胞炎癥的機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-06-26 14:07
  [目的]研究wnt/β-catenin信號(hào)通路和NF-κB信號(hào)通路對(duì)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的小膠質(zhì)株BV2細(xì)胞炎癥的調(diào)控機(jī)制,探討其在神經(jīng)炎癥中的作用。[方法]用含有5%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM高糖型完全培養(yǎng)液,置于37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)BV2細(xì)胞。選擇生長(zhǎng)狀態(tài)良好、生長(zhǎng)密度適中的細(xì)胞,隨機(jī)分為:①空白對(duì)照組(Control組):采用5%DMEM高糖型完全培養(yǎng)液培養(yǎng),不作任何處理;②LPS處理組(LPS組):采用5%DMEM高糖型完全培養(yǎng)液培養(yǎng),加入1ug/mlLPS處理細(xì)胞不同時(shí)間(0.5h、1h,2h,4h,6h);③抑制劑組(LPS+XAV939組):采用5%DMEM高糖型完全培養(yǎng)液培養(yǎng),加入1mMXAV939預(yù)處理細(xì)胞6h,緊接著用1ug/mlLPS處理細(xì)胞1h。分別用RT-PCR方法檢測(cè)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、環(huán)氧酶-2(COX-2)等炎性相關(guān)因子表達(dá)情況;用蛋白免疫印跡(Western Blotting)方法檢測(cè)β-鏈蛋白(β-catenin)、磷酸化的核因子-κB(p-NF-κ... 

【文章來(lái)源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

Wnt與NF-κB信號(hào)通路在調(diào)控LPS刺激的BV2細(xì)胞炎癥的機(jī)制研究


圖1?LPS刺激BV2細(xì)胞不同時(shí)間后TNF-a和COX-2的表達(dá)

細(xì)胞,強(qiáng)度值,隨機(jī)分組,標(biāo)準(zhǔn)化處理


LPS?at?different?time?LPS?at?different?time??圖2?LPS刺激BV2細(xì)胞不同時(shí)間后p-catenin、p-IkB和p-NF-KB的表達(dá)。圖2a??為相應(yīng)的曝光后western?blotting結(jié)果圖。用image?J掃描條帶灰度后得到相應(yīng)的??強(qiáng)度值,用目的蛋白強(qiáng)度值/P-actin的強(qiáng)度值來(lái)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理。圖2b為??P-catenin/p-actin?的強(qiáng)度值,圖?2c?為?p-NF-KB/p-actin?的強(qiáng)度值,圖?2d?為??p-lKB/p-actin的強(qiáng)度值。每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均采用隨機(jī)分組并重復(fù)三次以上,結(jié)果用均數(shù)??±標(biāo)準(zhǔn)誤(X土S)表示。**表示與空白對(duì)照組相比,尸<0.001,*表示與空白對(duì)照組??相比,P<0.05,兩組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。??28??

表達(dá)水平,預(yù)處理,強(qiáng)度值,細(xì)胞


:??圖3?XAV939預(yù)處理后LPS刺激BV2細(xì)胞產(chǎn)生的TNF-a和COX-2表達(dá)水平。圖??3a為相應(yīng)的mRNA結(jié)果圖。圖3b為C0X-2/GAPDH的強(qiáng)度值,圖3c為??TNF-a/GAPDH的強(qiáng)度值。圖3d為免疫熒光結(jié)果圖,紅色熒光標(biāo)記的蛋白為??30??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Role of the Wnt/β-catenin pathway in gastric cancer: An indepth literature review[J]. Miguel Angel Chiurillo.  World Journal of Experimental Medicine. 2015(02)



本文編號(hào):3251486

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