調(diào)控膠質(zhì)瘤增殖遷移和惡性進(jìn)展關(guān)鍵蛋白的研究探索
發(fā)布時(shí)間:2021-06-26 02:42
本論文分為兩大部分:第一部分:Notch1與PKC ζ在膠質(zhì)瘤中表達(dá)相關(guān)并參與膠質(zhì)瘤進(jìn)展第二部分:ITSN1-S的SH3結(jié)構(gòu)域調(diào)控膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和運(yùn)動(dòng)第一部分目的前期研究表明Notch1-MMP和PKCζ-MMP信號(hào)通路調(diào)控腫瘤的惡性進(jìn)展,此外,這兩種通路均參與腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲。但是,在人腦膠質(zhì)瘤中有關(guān)Notch1-MMP和PKCζ-MMP信號(hào)通路的相互作用尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,本文旨在探討膠質(zhì)瘤中Notch1、PKC ζ、MMP2和MMP9表達(dá)的意義以及四種蛋白表達(dá)的相關(guān)性,進(jìn)而揭示Notch1信號(hào)通路和PKC ζ信號(hào)通路在膠質(zhì)瘤惡性進(jìn)展中的潛在作用。方法1.收集我院103例膠質(zhì)瘤標(biāo)本,整理臨床病例資料,并對(duì)入選患者進(jìn)行隨訪(fǎng)。2.選取的膠質(zhì)瘤級(jí)別Ⅰ-ⅣV級(jí),通過(guò)免疫組織化學(xué)的方法染色,染色指標(biāo)為Notch1、PKCζ、MMP2 和 MMP9。3.觀(guān)察Notch1、PKC ζ、MMP2和MMP9在癌旁組織及膠質(zhì)瘤中表達(dá)差異。4.利用SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析四個(gè)蛋白及各病理參數(shù)之間的相關(guān)性。5.結(jié)合臨床病理指標(biāo)探討它們?cè)谀z質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及對(duì)臨床預(yù)后的影響。結(jié)果1.Notch1和PK...
【文章來(lái)源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖4膠質(zhì)瘤患者總生存(overall?survival,OS)的Kaplan-Meier生存曲線(xiàn)
出現(xiàn)約4.4、7.4kb條帶;空載體經(jīng)Nhel和EcoRI雙酶切,只出現(xiàn)約7.4kb??條帶。三種質(zhì)粒鑒定結(jié)果都與預(yù)期相符,測(cè)序結(jié)果與各質(zhì)粒序列一致,表明實(shí)??驗(yàn)組目的基因已插入載體中(圖2)。??EH1-EH2-CC?ITSN1-S?空載體?DNA??片段全長(zhǎng)對(duì)照?marker??7..??4.4kb?一‘?二二??2.3kb??圖2三種重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定結(jié)果??43??
ITSN1-S全長(zhǎng)組細(xì)胞中有外源ITSN1-S的表達(dá),而空載體對(duì)照組和EH1-EH2-CC??片段組沒(méi)有表達(dá);EH1-EH2-CC片段組細(xì)胞中有外源EH1-EH2-CC的表達(dá),而??空載體對(duì)照組和ITSN1-S全長(zhǎng)組沒(méi)有表達(dá)(圖3)。??EH1-EH2-CC?ITSK1-S?空載體????片段組?全長(zhǎng)組?對(duì)照組??外-源?ITSMi-S?^ ̄16〇KDa??內(nèi)源ITSN1-S?、1丨丨丨.』__1?』」丨…1丨丨丨丨rnmmmm?_____?一?1.4〇KDa??外源?EHl?-EH2-CC?mmmmmm?^—?S4KDa??P?-actiri?mmmmmmmrnm?mmmmmm?^——43?KDa??圖3?Western?blotting檢測(cè)三種蛋白在LN229細(xì)胞中的表達(dá)情況??2.?2.?4過(guò)表達(dá)ITSN1-S全長(zhǎng)和EH1-EH2-CC片段后對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響??MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,從第3天開(kāi)始ITSN1-S全長(zhǎng)組細(xì)胞明顯表現(xiàn)出較強(qiáng)的??增殖趨勢(shì);第5天時(shí),ITSN1-S全長(zhǎng)組細(xì)胞與EH1-EH2-CC片段組和空載體對(duì)??照組細(xì)胞增殖率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸<0.05);第6天時(shí),ITSN1-S全長(zhǎng)組、??EH1-EH2-CC片段組和空載體對(duì)照組細(xì)胞增值率分別為(523.60?±?32.12)%、??(409.54?±?31.33)%和(353.89?±?13.98)%。與?EH1-EH2-CC?片段組和空載體對(duì)照組??比較
本文編號(hào):3250465
【文章來(lái)源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:87 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖4膠質(zhì)瘤患者總生存(overall?survival,OS)的Kaplan-Meier生存曲線(xiàn)
出現(xiàn)約4.4、7.4kb條帶;空載體經(jīng)Nhel和EcoRI雙酶切,只出現(xiàn)約7.4kb??條帶。三種質(zhì)粒鑒定結(jié)果都與預(yù)期相符,測(cè)序結(jié)果與各質(zhì)粒序列一致,表明實(shí)??驗(yàn)組目的基因已插入載體中(圖2)。??EH1-EH2-CC?ITSN1-S?空載體?DNA??片段全長(zhǎng)對(duì)照?marker??7..??4.4kb?一‘?二二??2.3kb??圖2三種重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定結(jié)果??43??
ITSN1-S全長(zhǎng)組細(xì)胞中有外源ITSN1-S的表達(dá),而空載體對(duì)照組和EH1-EH2-CC??片段組沒(méi)有表達(dá);EH1-EH2-CC片段組細(xì)胞中有外源EH1-EH2-CC的表達(dá),而??空載體對(duì)照組和ITSN1-S全長(zhǎng)組沒(méi)有表達(dá)(圖3)。??EH1-EH2-CC?ITSK1-S?空載體????片段組?全長(zhǎng)組?對(duì)照組??外-源?ITSMi-S?^ ̄16〇KDa??內(nèi)源ITSN1-S?、1丨丨丨.』__1?』」丨…1丨丨丨丨rnmmmm?_____?一?1.4〇KDa??外源?EHl?-EH2-CC?mmmmmm?^—?S4KDa??P?-actiri?mmmmmmmrnm?mmmmmm?^——43?KDa??圖3?Western?blotting檢測(cè)三種蛋白在LN229細(xì)胞中的表達(dá)情況??2.?2.?4過(guò)表達(dá)ITSN1-S全長(zhǎng)和EH1-EH2-CC片段后對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響??MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,從第3天開(kāi)始ITSN1-S全長(zhǎng)組細(xì)胞明顯表現(xiàn)出較強(qiáng)的??增殖趨勢(shì);第5天時(shí),ITSN1-S全長(zhǎng)組細(xì)胞與EH1-EH2-CC片段組和空載體對(duì)??照組細(xì)胞增殖率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸<0.05);第6天時(shí),ITSN1-S全長(zhǎng)組、??EH1-EH2-CC片段組和空載體對(duì)照組細(xì)胞增值率分別為(523.60?±?32.12)%、??(409.54?±?31.33)%和(353.89?±?13.98)%。與?EH1-EH2-CC?片段組和空載體對(duì)照組??比較
本文編號(hào):3250465
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