發(fā)布時(shí)間：2021-06-22 02:05

　　立題依據(jù)多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（Glioblastoma,GBM）為多發(fā)于成人顱內(nèi)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤,是一項(xiàng)重大的社會(huì)公共衛(wèi)生問(wèn)題,目前主要治療手段為手術(shù)切除結(jié)合藥物化療。替莫唑胺（Temozolomide,TMZ）是GBM的一線化療用藥,能使GBM細(xì)胞DNA分子發(fā)生烷基化（O6-MeG）損傷,致DNA分子雙鏈斷裂,細(xì)胞死亡。TMZ能高效通過(guò)血腦屏障,滲透到腦組織細(xì)胞中,在GBM的早期治療中效果突出。然而,06-甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（06-methylguanine-methyltrasferase,MGMT）能迅速將TMZ介導(dǎo)生成的06-MeG中的甲基轉(zhuǎn)移至自身的活性半胱氨酸殘基上,修復(fù)TMZ所致腫瘤細(xì)胞的DNA損傷,細(xì)胞繼續(xù)存活,導(dǎo)致耐藥。目前,TMZ化療耐藥主要分為兩大類:MGMT依賴性與非MGMT依賴性。而MGMT表達(dá)異常在膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)TMZ耐藥過(guò)程中起著重要作用。GBM細(xì)胞中MGMT的表達(dá)被證實(shí)接受miR-222的負(fù)向調(diào)控。研究發(fā)現(xiàn),作為長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）的生長(zhǎng)停滯特異性轉(zhuǎn)錄本5（GAS5）與mir-222存在堿基互補(bǔ)基礎(chǔ)上的結(jié)合位點(diǎn),同樣接受后者的調(diào)控。那么... 

【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３－１轉(zhuǎn)染４８ｈ后正常光鏡下細(xì)胞外觀（１００倍鏡下）??Ａ、ｍｉＲ－２２２?ｍｉｍｉｃ?轉(zhuǎn)染?Ｔ９８Ｇ?細(xì)胞；Ｂ、Ｉｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ?２０００?轉(zhuǎn)染?Ｔ９８Ｇ?細(xì)胞；Ｃ、ｍｉＲ－??

ｍｍ??Ｃ?Ｄ??圖３－１轉(zhuǎn)染４８ｈ后正常光鏡下細(xì)胞外觀（１００倍鏡下）??Ａ、ｍｉＲ－２２２?ｍｉｍｉｃ?轉(zhuǎn)染?Ｔ９８Ｇ?細(xì)胞；Ｂ、Ｉｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ?２０００?轉(zhuǎn)染?Ｔ９８Ｇ?細(xì)胞；Ｃ、ｍｉＲ－??２２２?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?轉(zhuǎn)染?Ｔ９８Ｇ?細(xì)胞；Ｄ、Ｔ９８Ｇ?細(xì)胞??Ｆｉｇ．３－１?Ｃｅｌｌ?ａｐｐｅａｒａｎｃｅ?ｕｎｄｅｒ?ｎｏｒｍａｌ?ｌｉｇｈｔ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?４８ｈ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ（ｌＯＯｘ）??Ａ．?Ｔ９８Ｇ?ｃｅｌｌｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｍｉＲ－２２２?ｍｉｍｉｃ，?Ｂ．Ｔ９８Ｇ?ｃｅｌｌｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｔｈｅ??ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ?２０００，?Ｃ．Ｔ９８Ｇ?ｃｅｌｌｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｍｉＲ－２２２?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，?Ｄ?ｃｅｌｌｓ??３．２?ｍｉＲ－２２２對(duì)Ｔ９８Ｇ細(xì)胞的增殖能力的影響??轉(zhuǎn)染處理后，利用ＣＣＫ－８對(duì)不同處理組別的Ｔ９８Ｇ細(xì)胞的細(xì)胞增殖情況??（Ｔ９８Ｇ?組、Ｔ９８Ｇ－ｍｉＲ－?２２２?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?組、Ｔ９８Ｇ－ｍｉＲ－２２２?ｍｉｍｉｃ?組和?Ｔ９８Ｇ－??ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ?２０００組）進(jìn)行了檢測(cè)，借此研宄ｍｉＲ－２２２對(duì)Ｔ９８Ｇ細(xì)胞增殖能力的??影響（如圖３－２所示）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，四組不同處理因素的Ｔ９８Ｇ細(xì)胞均呈現(xiàn)??典型的惡性細(xì)胞增殖曲線，并沒(méi)有非癌細(xì)胞生長(zhǎng)曲線中特征性的細(xì)胞生長(zhǎng)平臺(tái)??期出現(xiàn)，符合一般腫瘤細(xì)胞的增殖規(guī)律。??但是從四組細(xì)胞的６天增殖幅度來(lái)看

?３．３生物信息學(xué)分析ｍｉＲ－２２２序列及其祀基因的預(yù)測(cè)??如圖３－３所示，通過(guò)在線軟件ＭｉｒＢａｓｅ查詢，發(fā)現(xiàn)成熟人源ｍｉＲ－２２２以ｈｓａ－??ｍｉＲ－２２２－３ｐ?（?Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ?）?為主，具體堿基序列為?５’－??ＡＧＣＵＡＣＡＵＣＵＧＧＣＵＡＣＵＧＧＧＵ－３?’。選取?ｈｓａ－ｍｉＲ－２２２－３ｐ?進(jìn)行靶基因的搜索，??可發(fā)現(xiàn)ＧＡＳ５與ｒｍＲ－２２２存在靶向結(jié)合的情況，具體結(jié)合的染色體位置為??ｃｈｒｌ：１７３８３３２６９－１７３８３３２８９，?ａｌｉｇｎＳｃｏｒｅ?為?１４７，提示?ＧＡＳ５?可能接受?ｍｉＲ－２２２?的??表達(dá)調(diào)控，實(shí)際情況以雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)對(duì)ＧＡＳ５及ｍｉＲ－２２２進(jìn)行分析確證，??而通過(guò)文獻(xiàn)查找，我們發(fā)現(xiàn)ＸｕｅＹ的研宄已開(kāi)展相關(guān)的實(shí)驗(yàn)步驟，并且確證了??ＧＡＳ５與ｍｉＲ－２２２存在靶向結(jié)合位點(diǎn)ｆ５５ｌ。??Ｍ１ＭＡＴＱＱＱ４Ｓ６９??ｖＬｙ?ｉ．ＶＬｉｒＪＬ３＆ＳＧ?ｈｓａ－ｍｉＲ－２２２＊??Ｉ?３１＾?－５２


本文編號(hào)：3241894