背景和目的：腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,因其浸潤性生長且容易復(fù)發(fā),手術(shù)、放療、化療等治療措施療效均不十分理想。理論上講腫瘤的發(fā)生涉及多種癌基因和抑癌基因的突變,因此,闡明其分子生物學發(fā)病機理、尋求最新的生物學標記物及治療靶標以提高療效已成為當前的重大課題。近來發(fā)現(xiàn)rf2介導(dǎo)的細胞能量代謝在腫瘤細胞的增殖中起著重要作用,本課題旨在以惡性程度較高的U87細胞為模型,初步探討Nrf2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞增殖及對化療藥物敏感性中的作用。方法：（1）用實時熒光定量PCR檢測Nrf2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞U87中的表達量；（2）設(shè)計并合成能特異性針對Nrf2基因的反義寡核苷酸片段及對照,用脂質(zhì)體將反義寡核苷酸片段轉(zhuǎn)染U87細胞,westernblot實驗檢測干擾效果,MTS試驗觀察Nrf2干擾后細胞的增殖能力及對化療藥物替尼泊甙（VM-26）敏感性的影響；（3）實時熒光定量PCR和western blot檢測Nrf2干擾后G6PD、PGD及TKT的表達情況；（4）設(shè)計并合成特異性針對G6PD和TKT的反義寡核苷酸片段,用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染U87細胞后,Western blot檢測G6PD和TKT的蛋白表... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
1 前言
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 細胞系及細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        2.1.2 實時定量PCR相關(guān)試劑
        2.1.3 Western blotting試劑
        2.1.4 主要實驗儀器
        2.1.5 試劑的配制
    2.2 方法
        2.2.1 細胞的復(fù)蘇、傳代、凍存
        2.2.2 細胞增殖實驗
        2.2.3 細胞藥物敏感性實驗(MTS試驗)
        2.2.4 實時定量PCR(Real-time PCR,qRT-PCR)
        2.2.5 設(shè)計購買siRNA
        2.2.6 siRNA干擾實驗
        2.2.7 Western blot
    2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
    3.1 Nrf2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細胞的表達量較高
    3.2 下調(diào)Nrf2的表達能抑制神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細胞的增殖并增加藥物敏感性
    3.3 下調(diào)Nrf2的表達能抑制G6PD、PGD和TKT的表達
    3.4 下調(diào)G6PD和TKT的表達能抑制U87細胞的增殖,并增加化療敏感性
4 討論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3227664