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HDAC6-p97/VCP調控“泛素化—自噬通路”逆轉膠質母細胞瘤內質網應激耐受的相關機制研究

發(fā)布時間:2021-05-28 16:00
  目的:1.明確組蛋白脫乙;敢种苿㏕ubastatin A協(xié)同替莫唑胺對膠質瘤細胞耐藥株的殺傷作用;2.探討組蛋白脫乙酰化酶抑制劑Tubastatin A協(xié)同替莫唑胺殺傷膠質瘤細胞耐藥株的機制。材料與方法:構建四種不同膠質瘤細胞系耐藥株,預先用Tubastatin A處理后,采用CCK-8法、Caspase-3凋亡檢測法、Hoechst 33342/PI雙染法及Tunel法檢測細胞活力及凋亡狀態(tài)。采用蛋白質印記實驗及免疫共沉淀實驗檢測各個細胞系中組蛋白脫乙;6相關細胞信號通路的基因表達情況及相應分子之間作用。實驗數(shù)據(jù)均采用SPSS19統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析處理,所有定量實驗至少獨立重復3次,圖中的數(shù)據(jù)為平均值±標準差(mean±S.D.)。多組樣本方差假設相同市采用獨立樣本t檢驗,多組樣本方差明顯不同時,在用Bonferroni實驗矯正后采用Anova檢驗。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。結果:1.Western blotting結果顯示:GRP78,磷酸化IRE1α,HDAC6在腫瘤組織樣本的表達水平高于正常腦組織中的表達水平;p97/VCP在腫瘤組織樣本的表達水平低于正... 

【文章來源】:廣州醫(yī)科大學廣東省

【文章頁數(shù)】:54 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 細胞培養(yǎng)
    2.3 藥物作用
    2.4 CCK-8 法測定不用加藥方式對四系細胞的生長抑制率
    2.5 Caspase-3 活性檢測實驗測定各個細胞系凋亡狀況
    2.6 Hoechst 33342/PI雙染法檢測細胞凋亡情況
    2.7 Tunel法檢測細胞凋亡情況
    2.8 細胞蛋白提取及蛋白濃度測定
    2.9 Western blotting法檢測細胞內各基因表達情況
    2.10 免疫共沉淀檢測方法
    2.11 免疫熒光細胞化學染色
    2.12 實時定量PCR分析
    2.13 細胞轉染
第三章 結果
第四章 討論
第五章 結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝
發(fā)表論文情況


【參考文獻】:
期刊論文
[1]基質金屬蛋白酶抑制劑對膠質瘤細胞和膠質瘤干細胞體外侵襲抑制作用的比較[J]. 謝蕊繁,張所軍,高寶成,萬鋒,郭東生,雷霆.  中華實驗外科雜志. 2010 (10)



本文編號:3208336

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