目的:研究整合素連接激酶（ILK）在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)，并探討其與膠質(zhì)瘤血管生成之間的關(guān)系方法：1)收集不同級別人腦膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本，免疫組化檢測腫瘤標(biāo)本ILK、VEGF、HIF1-α的蛋白表達(dá)并分析其相關(guān)性；2)shRNA轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤細(xì)胞，并建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系；3)采用RT-PCR、Western blot檢測U251穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系中ILK的轉(zhuǎn)錄及表達(dá)情況；4)Western blot、ELISA檢測shRNA敲低ILK后膠質(zhì)瘤細(xì)胞的VEGF、HIF-1α的表達(dá)；結(jié)果：ILK在各級別膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)有顯著性差異（P<0.05）,其表達(dá)量與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)（p＜0.05），且VEGF、HIF1-α隨著ILK的表達(dá)增高而增高，呈顯著正相關(guān)（r=0.975,p<0.01；r=1.000,p＜0.01）；穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的U251細(xì)胞ILK mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯下降，而且VEGF、 HIF-1α的表達(dá)量同樣下降明顯。結(jié)論：ILK與膠質(zhì)瘤的血管生成過程密切相關(guān)，抑制ILK的表達(dá)可以有效的抑制膠質(zhì)瘤的血管生成。 

【文章來源】：河北大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第1章 ILK 在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)及臨床意義
    1 材料與方法
        1.1 標(biāo)本材料
        1.2 主要試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)
        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2 結(jié)果
        2.1 ILK 在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)
        2.2 VEGF 在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)
        2.3 HIF-1α在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)
        2.4 ILK、VEGF、 HIF-1α相關(guān)性分析
    3 討論
第2章 ILK-shRNA 質(zhì)粒擴(kuò)增
    1 材料與方法
        1.1 試驗(yàn)材料
        1.2 主要儀器
        1.3 試驗(yàn)方法
    2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3 結(jié)論
第3章 shRNA 特異性沉默 ILK 對膠質(zhì)瘤 U251 細(xì)胞血管生成的影響
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.2 主要儀器
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.3 RT-PCR 檢測 ILK 的轉(zhuǎn)錄水平
        2.4 Western-blot 檢測 ILK、VEGF、HIF-1α蛋白的表達(dá)情況
        2.5 ELISA 檢測 VEGF 的分泌水平
        2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 轉(zhuǎn)染效率檢測
        3.2 Western blot 檢測 ILK 沉默對 VEGF 和 HIF-1α的表達(dá)影響
        3.3 ELISA 檢測 VEGF 的分泌水平
    4 討論
第4章 結(jié)論
第5章 綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
研究生期間所發(fā)表文章



本文編號：3140822