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羥基紅花黃色素A對谷氨酸損傷神經(jīng)元PPARγ的表達(dá)和活性的影響

發(fā)布時(shí)間:2021-04-15 21:02
  研究目的:1、探討谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)元損傷的機(jī)制;2、探討羥基紅花黃色素A(HSYA)對谷氨酸誘導(dǎo)損傷神經(jīng)元PPARy的表達(dá)及活性的研究,并進(jìn)一步研究羥基紅花黃色素A對PPARy活性的影響機(jī)制,為羥基紅花黃素素A防治谷氨酸神經(jīng)損傷提供一定的理論基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)方法:以體外原代培養(yǎng)的Sprague Dawley雌性大鼠(孕17-20d)大腦皮層神經(jīng)元作為實(shí)驗(yàn)材料,體外培養(yǎng)7天后,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1、細(xì)胞形態(tài)觀察:于倒置相差顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài),并采集各組細(xì)胞形態(tài)的圖像。2、免疫熒光染色法(MAP2)對體外培養(yǎng)的神經(jīng)元進(jìn)行純度鑒定。3、MTT比色法檢測細(xì)胞活性。4、Western blot法檢測不同組別細(xì)胞內(nèi)PPARγ、 p-PPARy、p-MAPK的表達(dá)水平,并對PPARy的胞漿蛋白和胞核蛋白水平進(jìn)行檢測。5、免疫熒光染色法對不同組別細(xì)胞內(nèi)PPARy, p-PPARy、p-MAPK的表達(dá)水平和亞細(xì)胞定位進(jìn)行檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1、細(xì)胞形態(tài)觀察:正常神經(jīng)元經(jīng)體外培養(yǎng)第7天時(shí)形態(tài)飽滿,突起豐富,相互交織成網(wǎng)絡(luò)。不同濃度谷氨酸可使大部分神經(jīng)元腫脹變圓,細(xì)胞突起變短或消失,胞體立體感差,并可見大量細(xì)胞碎片。HS... 

【文章來源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:85 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
符號說明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、HSYA對谷氨酸損傷神經(jīng)元PPARγ的表達(dá)及活性的研究
    1.1 對象和方法
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 主要儀器設(shè)備
        1.1.3 主要試劑及耗材
        1.1.4 主要溶液及配方
        1.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 胎鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元純度鑒定
        1.2.2 形態(tài)學(xué)觀察
        1.2.3 MTT法測定神經(jīng)元細(xì)胞相對存活率
        1.2.4 Westen blotting法檢測蛋白表達(dá)水平
        1.2.5 免疫熒光染色法檢測表達(dá)水平和亞細(xì)胞定位
    1.3 討論
        1.3.1 HSYA簡介
        1.3.2 谷氨酸損傷模型的建立
        1.3.3 PPARγ的神經(jīng)保護(hù)作用
二、HSYA對谷氨酸損傷神經(jīng)元p-PPARγ調(diào)節(jié)機(jī)制的研究
    2.1 對象和方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.2 主要儀器設(shè)備
        2.1.3 主要試劑及耗材
        2.1.4 主要溶液及配方
        2.1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 胎鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元純度鑒定
        2.2.2 Westen blotting法檢測蛋白表達(dá)水平
        2.2.3 免疫熒光染色法檢測表達(dá)水平和亞細(xì)胞定位
    2.3 討論
        2.3.1 MAPK家族
        2.3.2 多種細(xì)胞中MAPK/ERK介導(dǎo)的PPARγ磷酸化
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
綜述
    PPARγ在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的保護(hù)作用
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]羥基紅花黃色素A對兔動(dòng)脈粥樣硬化影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 靳宏光,姜琛,田宇丹.  上海中醫(yī)藥雜志. 2011(04)
[2]缺氧/復(fù)氧損傷對大鼠海馬神經(jīng)元過氧化物酶體增殖物激活受體γ表達(dá)的影響[J]. 狄政莉,田曄,馬紅兵,杜芳,雷輝,張格娟,梁畫荻.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(12)
[3]羥基紅花黃色素A對腦缺血大鼠皮層炎癥信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)因子的抑制作用[J]. 陳亭亭,杜玉娟,劉曉雷,朱海波.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2008(06)
[4]羥基紅花黃色素A抗谷氨酸氧化性神經(jīng)損傷的保護(hù)作用[J]. 逯素梅,劉魯華,孫濤,張道來,馮玉新,辛華.  山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2008(03)
[5]羥基紅花黃色素A對大鼠急性腦缺血再灌注后白細(xì)胞介素-1β和白細(xì)胞介素-6表達(dá)的影響[J]. 肖健,王坤,祝美珍,肖艷芬,黃燕.  廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(06)
[6]羥基紅花黃色素A抗凝作用的研究[J]. 臧寶霞,金鳴,李金榮.  中草藥. 2007(05)
[7]羥基紅花黃色素A對缺氧心肌細(xì)胞的保護(hù)作用[J]. 薛慧艷,魏欣冰,丁華.  中國老年學(xué)雜志. 2007(02)
[8]羥基紅花黃色素A對局灶性腦缺血后大鼠腦組織誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的影響[J]. 盛雨辰,夏玉葉,閔旸.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2006(09)
[9]PPARγ phosphorylation mediated by JNK MAPK:a potential role in mac-rophage-derived foam cell formation[J]. Ran YIN~2 Yu-gang DONG~(2,4)Hong-liang LI~3 Z Department of Cardiology,First Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;3 Institute of Basic Medical Sciences,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100005,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2006(09)
[10]紅花黃色素對小鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 迪麗努爾·沙比托夫,朱毅忠,買爾旦·米吉提,陳希元.  中國中醫(yī)藥信息雜志. 2006(02)



本文編號:3140078

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