目的:研究星形膠質(zhì)細(xì)胞活化后神經(jīng)生長因子（nerve growth factor,NGF）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6,IL-6）表達(dá)的時(shí)間規(guī)律性,探討星形膠質(zhì)細(xì)胞活化后啟動(dòng)保護(hù)性機(jī)制與損傷性機(jī)制的時(shí)間特性。方法:體外分離培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞,分為對照組、活化組、抑制組。通過光學(xué)顯微鏡及免疫熒光化學(xué)觀察各組細(xì)胞的形態(tài)變化;應(yīng)用半定量RT-PCR方法分析各組細(xì)胞間膠原纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）mRNA及NGF mRNA、IL-6 mRNA表達(dá)變化;用ELISA法檢測各組細(xì)胞上清液中不同時(shí)間點(diǎn)（6h,24h,48h,72h）NGF、IL-6的含量。結(jié)果:活化組與對照組比較,細(xì)胞胞體變大,GFAP熒光增強(qiáng);RT-PCR示GFAP mRNA、NGF mRNA、IL-6 mRNA表達(dá)均明顯增高,與對照組比較差異有顯著性（P<0.01）;ELISA法檢測示星形膠質(zhì)細(xì)胞活化后NGF分泌量在活化后24小時(shí)達(dá)到高峰,與對照組比較差異有顯著性（P<0.01）;活化后48小時(shí)IL-6的含量達(dá)到高峰,與對照組比較差異有顯著性... 

【文章來源】：現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013,13(07)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

對照組GFAP免疫熒光染色（400×）

髯橄赴?锨逡篍LISA法檢測NGF、IL-6分泌量的時(shí)間變化規(guī)律三組均可見NGF、IL-6分泌；活化組NGF分泌量在活化后24小時(shí)達(dá)到高峰，到48小時(shí)分泌量下降，24小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間延長逐漸增加，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)48小時(shí)與24小時(shí)比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)6小時(shí)與24小時(shí)比較差異有顯著性（P＜0.01）；活化組IL-6分泌量在活化后48小時(shí)達(dá)到高峰，到72小時(shí)分泌量下降，48小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間延長逐漸增加，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)72小時(shí)與48小時(shí)比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)6圖2活化組GFAP免疫熒光染色（400×）Fig.2AstrocytesoftheactivitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)圖3抑制組GFAP免疫熒光染色（400×）Fig.3AstrocytesoftheinhibitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)圖4各組GFAPRT/PCR時(shí)間點(diǎn)電泳圖Fig.4ElectrophoresisoftheGFAPmRNAexpressionindifferentgroup注：M：Marker；1：活化組72h；2：活化組48h；3：活化組24h；4：活化組6h；5：抑制組72h；6：抑制組48h；7：抑制組24h；8：抑制組6h；9：對照組72h；10：對照組48h；11：對照組24h；12：對照組6h。Note:M:Marker;1:activitaongroupat72h;2:activitaongroupat48h;3:activitaongroupat24h;4:activitaongroupat6h;5:inhibitgroupat72h;6:inhibitgroupat48h;7:inhibitgroupat24h;8:inhibitgroupat6h;9:controlgroupat72h;10:controlgroupat48h;11:controlgroupat24h;12:controlgroupat6h.圖5各組不同時(shí)間點(diǎn)GFAPmRNA表達(dá)Fig.5RT-PCRdetectionoftheGFAPmRNA注：*與對照組比較P＜0.01；#與活化組比較P＜0.01；§活化組6h與48h比較P＜0.01；※活化組72h與48h比較P＜0.01。Note:*P<0.01，

高峰，到48小時(shí)分泌量下降，24小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間延長逐漸增加，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)48小時(shí)與24小時(shí)比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)6小時(shí)與24小時(shí)比較差異有顯著性（P＜0.01）；活化組IL-6分泌量在活化后48小時(shí)達(dá)到高峰，到72小時(shí)分泌量下降，48小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間延長逐漸增加，與對照組比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)72小時(shí)與48小時(shí)比較差異有顯著性（P＜0.01），時(shí)間點(diǎn)6圖2活化組GFAP免疫熒光染色（400×）Fig.2AstrocytesoftheactivitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)圖3抑制組GFAP免疫熒光染色（400×）Fig.3AstrocytesoftheinhibitedgroupstainedbyGFAPimmunofluorescenceassay(400×)圖4各組GFAPRT/PCR時(shí)間點(diǎn)電泳圖Fig.4ElectrophoresisoftheGFAPmRNAexpressionindifferentgroup注：M：Marker；1：活化組72h；2：活化組48h；3：活化組24h；4：活化組6h；5：抑制組72h；6：抑制組48h；7：抑制組24h；8：抑制組6h；9：對照組72h；10：對照組48h；11：對照組24h；12：對照組6h。Note:M:Marker;1:activitaongroupat72h;2:activitaongroupat48h;3:activitaongroupat24h;4:activitaongroupat6h;5:inhibitgroupat72h;6:inhibitgroupat48h;7:inhibitgroupat24h;8:inhibitgroupat6h;9:controlgroupat72h;10:controlgroupat48h;11:controlgroupat24h;12:controlgroupat6h.圖5各組不同時(shí)間點(diǎn)GFAPmRNA表達(dá)Fig.5RT-PCRdetectionoftheGFAPmRNA注：*與對照組比較P＜0.01；#與活化組比較P＜0.01；§活化組6h與48h比較P＜0.01；※活化組72h與48h比較P＜0.01。Note:*P<0.01，vsactivationgroupandcontrolgroup;#P<0.01,vscontrolgroupandactivationgroup;§P<0.01,vsactivationgroupat6handactiva

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]星形膠質(zhì)細(xì)胞活化與表皮生長因子受體表達(dá)的相關(guān)性研究[J]. 郭志慧,武衡.  中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2010(08)
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本文編號(hào)：3111120