特異性靶向腫瘤代謝是一種非常有效的腫瘤治療策略。然而,腫瘤局部及不同類型腫瘤的代謝異質(zhì)性可能導(dǎo)致腫瘤自身對(duì)代謝治療處于抵抗?fàn)顟B(tài)。很多的研究已經(jīng)證實(shí)病毒感染會(huì)改變宿主細(xì)胞的代謝。我們推測(cè)首先同步或驅(qū)動(dòng)腫瘤細(xì)胞高糖酵解率,有利于提高靶向腫瘤代謝治療的抗腫瘤作用。本項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)溶瘤麻疹病毒減毒株MV-Edm能夠誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞糖酵解。感染麻疹病毒后,細(xì)胞葡萄糖消耗量及乳酸產(chǎn)量增加,并且感染早期細(xì)胞內(nèi)ATP濃度上升。抑制糖酵解的小分子藥物DCA與麻疹病毒在體外及小鼠皮下神經(jīng)膠質(zhì)瘤模型均表現(xiàn)出極好的協(xié)同抗腫瘤效果。進(jìn)一步的研究證實(shí)DCA與麻疹病毒的協(xié)同機(jī)制不是凋亡,而是細(xì)胞內(nèi)ATP耗竭導(dǎo)致的壞死。DCA能夠降低神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的線粒體膜電位,抑制依賴于線粒體膜電位發(fā)揮功能的線粒體抗病毒反應(yīng)蛋白MAVS的功能,促進(jìn)病毒復(fù)制,進(jìn)一步消耗細(xì)胞內(nèi)的ATP,另一方面,DCA能夠抑制細(xì)胞內(nèi)糖酵解過(guò)程抑制細(xì)胞內(nèi)ATP的產(chǎn)生,最終導(dǎo)致細(xì)胞能量耗竭。綜上,我們的研究創(chuàng)新在于：溶瘤麻疹病毒MV-Edm能夠上調(diào)糖酵解,DCA促進(jìn)病毒復(fù)制,有利于麻疹病毒發(fā)揮溶瘤作用,同時(shí)也促進(jìn)了復(fù)制過(guò)程中的ATP消耗。另一方面,DCA抑... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

麻疹病毒感染上調(diào)細(xì)胞內(nèi)的?i

方向進(jìn)行Ｂ＂。由于麻疹病毒感染細(xì)胞上清乳酸堆積，用０．２Ｍ餅ＭＶ－Ｅｄｍ分別??處理Ｕ８７，Ｕ２５１，化后提�。遥危敛⑦M(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，用定量ＰＣ民的方法檢測(cè)不同??處理組ＬＤＨＡ在ｍＲＮＡ水平的表達(dá)情況。結(jié)果（圖３）顯示ＭＶ－Ｅｄｍ能夠顯??著上調(diào)ＬＤＨＡ的表達(dá)，與文獻(xiàn)報(bào)道的軒的白斑綜合癥病毒（ｓｈｒｉｍｐ?ｗｈｉｔｅ??ｓｐｏｔｓｙｎｄｒｏｍｅ?ｖｉｒｕｓ）感染初期的糖代謝改變是一致的ｗ。??窒??Ｉ?４００－１?■…５１??￡?＊★★口?Ｕ８７??Ｑ?勝?１－＾??＾?＊夫＊??Ｉ脈?＊??１．１００－?Ｉ?１??Ｉ?￣麵國(guó)??Ｉ?＿＿Ｌ－１１?１－??ＭＶ－Ｅｄｍ?－?＋?－牛??圖３麻疹病毒感染上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ＬＤＨＡ?ｍＲＮＡ水平的表達(dá)??５小結(jié)??上述實(shí)驗(yàn)證明ＭＶ－Ｅｄｍ可Ｗ上調(diào)葡萄糖攝取量及乳酸產(chǎn)量，說(shuō)明上調(diào)的葡??萄糖消耗最終轉(zhuǎn)化為乳酸，麻疹可上調(diào)糖醇解過(guò)程，同時(shí)，麻疹感染上調(diào)糖??酵解過(guò)程中乳酸脫氨酶Ａ（ＬＤＨＡ）的表達(dá)，進(jìn)一步驗(yàn)證了麻疹病毒能夠上調(diào)類似??于瓦堡效應(yīng)的糖酵解代謝過(guò)程。??３９??

每組設(shè)３個(gè)復(fù)孔，用５ｍＭ濃度ＤＣＡ及０．２Ｍ餅麻疹病毒處理細(xì)胞后化，檢測(cè)細(xì)??胞內(nèi)的葡萄糖消耗量，計(jì)算不同處理組相對(duì)與空白對(duì)照組的百分比，結(jié)果顯示??（圖５）：?ＤＣＡ抑制麻疹病毒上調(diào)葡萄糖消耗的作用，證明ＤＣＡ抑制麻疹病毒??所誘導(dǎo)的糖酵解。??＊?＊??１Ｗ］Ｕ２５１?１甜］Ｕ８７??！〇〇．?ｊ?ＨＩ?Ｔ?■??＾：ｌ?ｉｌｌ??圖５?ＤＣＡ抑制麻疹病毒所誘導(dǎo)的糖酵解??４．?３?ＤＣＡ與ＭＶ－Ｅｄｍ協(xié)同降低細(xì)胞內(nèi)ＡＴＰ水平??ＡＴＰ是細(xì)胞內(nèi)主要的能量轉(zhuǎn)換分子，參與到細(xì)胞的各個(gè)生長(zhǎng)代謝過(guò)程。病毒??在細(xì)胞內(nèi)的大量復(fù)制也伴隨著ＡＴＰ依賴的各種蛋白合成及酶促反應(yīng)過(guò)程ＷＵ。一項(xiàng)??基于數(shù)學(xué)模型的計(jì)算，在沒(méi)有細(xì)胞內(nèi)生物大分子限制的情況下，每個(gè)細(xì)胞內(nèi)復(fù)制??產(chǎn)生８０００個(gè)病毒粒子對(duì)細(xì)胞內(nèi)的生物分子及能量代謝沒(méi)有太大影響Ｋ２３。文獻(xiàn)報(bào)道??４５??


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