第一部分FOXD3基因真核表達載體構(gòu)建及其在神經(jīng)母細胞瘤細胞株中的表達目的：構(gòu)建攜帶有外源性人FOXD3基因的真核表達載體，并瞬時轉(zhuǎn)染神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH及SK-N-MC細胞株，觀測瘤細胞中FOXD3過表達，為后續(xù)實驗做準備。方法：運用基因工程方法構(gòu)建FOXD3真核表達載體，轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的神經(jīng)母細胞瘤SK-N-SH及SK-N-MC細胞株，兩種細胞系均分為三組，即空白對照組（control）、空白質(zhì)粒組（plasmid negative control, PNC）及目的質(zhì)粒組（FOXD3+），采用熒光顯微鏡觀測轉(zhuǎn)染效率，運用western blot和real-time PCR方法檢測瘤細胞中FOXD3蛋白和mRNA過表達水平。結(jié)果：構(gòu)建了FOXD3基因的真核表達載體；兩種細胞系空白對照組均無熒光，PNC及FOXD3+組細胞均有綠色熒光，且兩組熒光亮度及密度相近，經(jīng)細胞計數(shù)分析轉(zhuǎn)染效率達70%-85%。兩種細胞系空白對照組和PNC組FOXD3蛋白及mRNA的表達水平低下，SK-N-SH及SK-N-MC細胞的FOXD3+組FOXD3蛋白表達水平較PNC組分別升高5.78倍（P<0... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻
第一部分 FOXD3 基因真核表達載體構(gòu)建及其在神經(jīng)母細胞瘤細胞株中的表達
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第二部分 FOXD3 基因過表達對神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖、凋亡的影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第三部分 FOXD3 基因過表達對神經(jīng)母細胞瘤細胞侵襲遷移、血管生成的影響
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
研究小結(jié)
綜述 FOXD3 的生物學(xué)功能研究 THE BIOLOGICAL FUNCTION STUDYON FOXD363
    參考文獻
附錄 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文目錄
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Nanog and transcriptional networks in embryonic stem cell pluripotency[J]. James A Thomson.  Cell Research. 2007(01)



本文編號：2996956