目的:通過建立大鼠腦缺血再灌注模型,研究自噬在大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷中的作用;探討自噬在不同時間點的動態(tài)變化;探討丁苯酞注射液（butyphthalide injection,NBP）對腦缺血再灌注損傷大鼠細胞自噬的影響。方法:選取清潔級別雄性SD（Sprague Dawley）大鼠64只,體重250-300g,隨機分為4組,分別為假手術(shù)組（sham組）、模型組（I/R組）、丁苯酞組（NBP組）、自噬抑制劑組（3-MA組）,每組16只大鼠,將每組分成2個時間段,即缺血再灌注后24h組及72h組（每組8只）,除sham組外,I/R組、NBP組及3-MA組采用改良線栓法制作大腦中動脈阻塞2h模型,NBP組于缺血同時予以腹腔注射丁苯酞注射液（6mg/kg/天,每天2次）,其中72h組連續(xù)注射三天;3-MA組于術(shù)前半小時腹腔注射3-MA（10mg/kg）;取3個時間點即再灌注后2h、再灌注后24h和再灌注后72h,進行神經(jīng)功能評分;取2個時間點,即缺血再灌注后24h和72h后取材,采用TTC（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride）染色法檢測各組大鼠各時間點... 

【文章來源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

腦梗死模型制作

造模成功后出現(xiàn)honer征

碩士學(xué)位論文10圖2-3：提尾懸掛時不能完全伸展圖2-4:心臟灌注后取出的腦組織左側(cè)前肢2.2.5TTC染色測腦梗死體積每組于再灌注后24h和再灌注后72h分別取3只大鼠處死，斷頭，小心剝出完整的腦組織置于-20℃冰箱中冰凍20分鐘，隨即取出，在冰塊上切除額極，自視交叉水平處行冠狀位切片，每片厚度約2mm，共切成5片。立即放入2%TTC染液中，37℃恒溫箱避光孵育30分鐘，期間使用鑷子輕柔翻動，使腦組織染色均勻。將已染色好的腦組織置入固定液中（4%多聚甲醛），24小時后數(shù)碼相機拍照。染色呈紅色為正常腦組織，染色呈白色為梗死腦組織。將圖像導(dǎo)入ImageProPlus6.0計算腦梗死體積比。2.2.6HE染色觀察腦組織神經(jīng)細胞形態(tài)（1）新鮮標本取材每組大鼠分別于缺血再灌注后24h和72h大鼠處死取新鮮腦組織，用已消毒刀片切病灶側(cè)腦組織標本，置入固定液中（4%多聚甲醛）固定。（2）水洗、脫水、透明固定后水洗15min。進行酒精梯度脫水，濃度及時間分別為75%50min、85%50min、95%20min、95%20min、100%20min、100%20min。用二甲苯透明，2道，各30min。（3）浸蠟、包埋

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Autophagy: novel insights into therapeutic target of electroacupuncture against cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Ya-Guang Huang,Wei Tao,Song-Bai Yang,Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Zhi-Tao Feng.  Neural Regeneration Research. 2019(06)
[2]黃芪甲苷對腦缺血/再灌注損傷大鼠細胞自噬的影響[J]. 李媛,靳曉飛,周曉紅,高維娟.  中國病理生理雜志. 2018(11)
[3]我國腦卒中流行現(xiàn)狀及危險因素研究進展[J]. 張冬月,韓薇.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2018(80)
[4]Puerarin protects rat brain against ischemia/reperfusion injury by suppressing autophagy via the AMPK-mT OR-ULK1 signaling pathway[J]. Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Yang Fu,Song-Bai Yang,Shi-Zhong Zhang,Wei-Feng Huang,Li Xiong,Hua-Jun Zhou,Wei Tao,Zhi-Tao Feng.  Neural Regeneration Research. 2018(06)
[5]腦缺血和缺血再灌注大鼠皮層神經(jīng)元自噬的動態(tài)變化[J]. 陶紅苗,單小云,李旭升,陳浩浩,毛宇飛,何忠平.  中國應(yīng)用生理學(xué)雜志. 2018(03)
[6]中國60萬人群腦血管病流行病學(xué)抽樣調(diào)查報告[J]. 孫海欣,王文志.  中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志. 2018(02)
[7]丁苯酞注射液對局灶性腦缺血再灌注大鼠的腦保護作用及機制[J]. 趙秀芹,毛文靜,李世英,張晉霞,賀永貴,余紅,劉斌.  中國康復(fù)理論與實踐. 2016(01)
[8]大鼠腦缺血再灌注后自噬的變化及燈盞生脈膠囊干預(yù)的影響[J]. 陳興泳,汪銀洲,雷惠新,張旭.  中國康復(fù)理論與實踐. 2015(07)
[9]制作線栓法大鼠腦缺血再灌注模型的要點及體會[J]. 何芳雁,韓春妮,李艷,林青.  實驗動物科學(xué). 2013(04)
[10]腦卒中動物模型的建立與比較[J]. 陳茉弦,敖麗娟,李琦,潘芳.  中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志. 2011(08)



本文編號：2984492