發(fā)布時間：2021-01-01 02:43

　　鳥苷酸結(jié)合蛋白家族（GBPs）是一類由干擾素-γ（IFN-γ）誘導(dǎo)的蛋白,目前國內(nèi)外尚無GBP3在腫瘤方面的相關(guān)研究報道。本論文首先對GBP3在膠質(zhì)瘤中的表達進行了分析和檢測,接著研究了GBP3對膠質(zhì)瘤生物學(xué)功能的影響以及p62-ERK1/2通路在GBP3促進膠質(zhì)瘤細胞增殖中的作用,最后通過體內(nèi)實驗進一步驗證了過表達GBP3促進膠質(zhì)瘤增殖的作用,并對GBP3表達水平與患者生存期的關(guān)系進行了分析。目的:（1）研究GBP3在膠質(zhì)瘤中的表達情況及其生物學(xué)功能;（2）對GBP3通過p62-ERK1/2通路調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤細胞增殖的分子機制進行研究;（3）研究GBP3與膠質(zhì)瘤細胞成瘤能力及患者預(yù)后的關(guān)系。方法:（1）對數(shù)據(jù)庫信息進行篩選,對比膠質(zhì)瘤和正常腦組織中GBP3表達情況;（2）收集正常腦組織、膠質(zhì)瘤標本、星形膠質(zhì)細胞和膠質(zhì)瘤細胞系樣品,q PCR法和Western blot法分別檢測GBP3 m RNA和蛋白水平表達;（3）構(gòu)建GBP3過表達和敲低表達的膠質(zhì)瘤細胞株,并用Western blot法驗證GBP3表達情況;（4）通過CCK-8實驗和克隆形成實驗檢測敲低和過表達GBP3對細胞增殖能力... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

GBP3與EGFmRNA表達呈正相關(guān)，GBP3可由EGF誘導(dǎo)表達上調(diào)

（C-D）GBP1 和 EGF 在膠質(zhì)瘤和 GBM 中 mRNA 表達相關(guān)性，數(shù)據(jù)來embrandt 和 TCGA 數(shù)據(jù)庫。（ E ）用含濃度為 100 ng/L EGF 的培養(yǎng)基培178-wtEGFR 和 U373-wtEGFR 膠質(zhì)瘤細胞，通過 qPCR 法檢測 GBP3 mRNA 表達照組加相同體積 PBS。（Pearson r<0.2 時無相關(guān)性，0.2-0.4 低度相關(guān)，0.4-0.6 中關(guān)，0.6-0.8 強相關(guān)，>0.8 代表極強相關(guān)。）2. 數(shù)據(jù)庫結(jié)果提示 GBP3 在膠質(zhì)瘤中 mRNA 高表達首先，我們分析了 Rembrandt 和 TCGA 兩個數(shù)據(jù)庫。Rembrandt 數(shù)據(jù)庫將膠質(zhì)為星形細胞瘤、少突膠質(zhì)細胞瘤和膠質(zhì)母細胞瘤三種類型。其中，（圖 2A）顯示細胞瘤和膠質(zhì)母細胞瘤（GBM）中的 GBP3 表達在 mRNA 水平上和正常腦組normal）相比升高且具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01, P<0.001）。而 TCGA 數(shù)據(jù)庫則根據(jù)表達不同將 GBM 分為 classical, mesenchymal, neural 和 proneural 四種類型，它們BP3 表達都高于正常腦組織，（圖 2B）提示 mesenchymal, neural 的 GBP3 表達較腦組織表達升高具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01, P< 0.01）。

GBP3 在膠質(zhì)瘤中的生物學(xué)功能及其機制研究 第一部分 GBP3 在膠質(zhì)瘤中的表達及生物學(xué)功檢測到GBP3。同樣，我們對收集的三例正常腦組織和28例膠質(zhì)瘤樣本中GBP3 mRN表達水平進行了檢測。如（圖 3B），雖然檢測結(jié)果未有統(tǒng)計學(xué)意義（可能因樣本量較少且個別樣本表達差異較大引起），但是可以發(fā)現(xiàn) GBP3 在膠質(zhì)瘤中表達約為正常腦組織的兩倍。（圖 3C）結(jié)果提示在收集的膠質(zhì)瘤細胞系中，有 55.6%（5/9 個）高表達 GBP3 蛋白，人腦正常星形膠質(zhì)細胞 GBP3 表達較低。


本文編號：2950801