本文關(guān)鍵詞：MIR137對(duì)細(xì)胞自噬的調(diào)控作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探討MIR137對(duì)細(xì)胞自噬的調(diào)控作用及調(diào)控機(jī)制。方法(1)慢病毒、拮抗劑轉(zhuǎn)染調(diào)控U87細(xì)胞中MIR137的表達(dá)水平,RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果。(2)D-hank's液處理細(xì)胞以誘發(fā)自噬,熒光顯微鏡下統(tǒng)計(jì)各組細(xì)胞GFP-LC3 Ⅱ陽(yáng)性率,western blot定量分析各組細(xì)胞自噬標(biāo)記蛋白LC3 Ⅱ和SQSTM1的表達(dá)量,評(píng)估MIR137對(duì)自噬水平的影響。(3)RT-PCR、western blot定量分析ATG7基因的mRNA和蛋白表達(dá)量,評(píng)估MIR137對(duì)ATG7表達(dá)量的影響。(4)重組ATG7質(zhì)粒分別與MIR137高表達(dá)慢病毒和拮抗劑共轉(zhuǎn)染,增加各組細(xì)胞中ATG7的表達(dá)水平,RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果。(5)Dhank's液作為饑餓誘導(dǎo)劑誘發(fā)細(xì)胞自噬,western blot定量分析各組細(xì)胞自噬標(biāo)記蛋白LC3 Ⅱ和SQSTM1的表達(dá)量,評(píng)估ATG7對(duì)自噬水平的影響。(6)MTT分析MIR137高表達(dá)對(duì)阿霉素化療效果的影響。結(jié)果(1)慢病毒和拮抗劑轉(zhuǎn)染組MIR137表達(dá)量分別為2.53±0.14和0.39±0.06,較對(duì)照組分別存在上調(diào)和下調(diào)；(2)饑餓誘導(dǎo)可增加U87細(xì)胞的自噬活動(dòng),但對(duì)MIR137的表達(dá)無(wú)明顯影響。(3)與對(duì)照組相比,慢病毒組和拮抗劑組LC3 Ⅱ蛋白的表達(dá)量分別為0.75±0.12和4.65±0.13,分別存在下調(diào)和上調(diào),SQSTM1蛋白的表達(dá)量分別為0.94±0.15和0.24±0.03,分別存在上調(diào)和下調(diào)。(4)慢病毒組和拮抗劑組ATG7基因表達(dá)量分比為0.26±0.07、1.53⒈0.06,較對(duì)照組(0.99±0.01)分別存在下調(diào)和上調(diào)。(5)慢病毒組、ATG7質(zhì)粒+慢病毒組、ATG7質(zhì)粒+對(duì)照組中ATG7基因的表達(dá)量分別為1.01±0.01、1.72±0.12、3.56q±0.71；慢病毒組、ATG7質(zhì)粒+慢病毒組中LC3Ⅱ蛋白的表達(dá)分別為0.76±0.10、1.64±0.44。(6)兩組細(xì)胞的存活率均隨藥物濃度的增加而降低；相同條件下,慢病毒組的細(xì)胞存活率較對(duì)照組降低。結(jié)論MIR137可通過(guò)調(diào)控ATG7的表達(dá),進(jìn)而抑制饑餓誘導(dǎo)的自噬活動(dòng)；MIR137可增加U87細(xì)胞對(duì)阿霉素的化療敏感性。
【關(guān)鍵詞】：膠質(zhì)瘤 microR-137 自噬 阿霉素
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.41
【目錄】：

• 英漢縮略詞對(duì)照5-7
• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-11
• 前言11-12
• 1 材料與方法12-18
• 2 結(jié)果18-22
• 3 討論22-25
• 全文結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-31
• 文獻(xiàn)綜述：miRNA對(duì)自噬的調(diào)控作用31-40
• 參考文獻(xiàn)35-40
• 致謝40-41
• 攻讀研究生學(xué)位期間發(fā)表的論文41

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