發(fā)布時間：2020-05-30 13:45

【摘要】：目的:觀察經(jīng)由局部神經(jīng)營養(yǎng)因子持續(xù)高表達(dá)作用所致腹外側(cè)中腦水管周圍灰質(zhì)(the ventrolateral Periaqueductal Gray,vPAG)的神經(jīng)保護(hù)對癲癇發(fā)作的影響。方法:8~10周齡健康雄性SD大鼠80只隨機(jī)分成3組:攜帶BDNF基因病毒組(32只)、未攜帶BDNF基因病毒組(24只)、生理鹽水組(24只)。利用腦立體定位注射技術(shù),分別向3組SD大鼠腦內(nèi)vPAG區(qū)域注射攜帶BDNF及GFP基因的腺相關(guān)病毒載體、未攜帶BDNF基因的同源腺相關(guān)病毒載體及生理鹽水。注射后48 h,取8只攜帶BDNF基因病毒組的大鼠的vPAG腦組織做冰凍切片,并在熒光鏡下拍照,應(yīng)用GFP標(biāo)記腺相關(guān)病毒載體檢測注射部位的準(zhǔn)確性。在注射后的第3天、6天、10天、15天每組每個時間點取6只大鼠vPAG活體組織,應(yīng)用western blot從蛋白水平檢測基因?qū)牒蟾鲿r間節(jié)點vPAG局部BDNF的表達(dá)量變化。另選擇8~10周健康雄性SD大鼠120只分成3組:攜帶BDNF基因病毒組(40只)、未攜帶BDNF基因組(40只)、生理鹽水組(40只)。利用腦立體定位注射技術(shù),分別向3組大鼠腦內(nèi)vPAG區(qū)域注射攜帶BDNF基因的腺相關(guān)病毒載體,未攜帶BDNF基因的同源腺相關(guān)病毒載體,生理鹽水�；�?qū)?天后每組取SD大鼠20只予以匹羅卡品腹腔注射致急性癲癇發(fā)作,通過行為學(xué)記錄方法觀察BDNF基因?qū)雟PAG對大鼠急性癲癇發(fā)作的影響�；�?qū)?天后每組取SD大鼠20只予以氯化鋰-匹羅卡品腹腔注射致癲癇持續(xù)狀態(tài)(Status Epilepticus,SE),通過錄像行為記錄方法觀察BDNF基因?qū)雟PAG對大鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)后不同時間點癲癇自發(fā)性發(fā)作的影響(癲癇持續(xù)狀態(tài)后第10~50天)。結(jié)果:顯微熒光鏡下GFP在vPAG區(qū)域發(fā)出綠色熒光。在立體定位注射后的第3天、6天、10天、15天不同時間點上,與未攜帶BDNF基因病毒組、生理鹽水組比較,攜帶BDNF基因病毒組vPAG的BDNF在western blot表達(dá)明顯增高(P均0.05)。且攜帶BDNF基因病毒組的BDNF在3天、6天、10天的表達(dá)量逐漸增高~1,第15天較第10天無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。匹羅卡品所致急性癲癇模型中,攜帶基因病毒組較未攜帶基因病毒組、生理鹽水組、空白對照組的大鼠發(fā)作持續(xù)時間及發(fā)作強度上均有顯著性差異(P均0.01)。氯化鋰-匹羅卡品致癲癇持續(xù)狀態(tài)模型中,攜帶基因病毒組較未攜帶基因病毒組、生理鹽水組、空白對照組在癲癇持續(xù)狀態(tài)后10~50天大鼠自發(fā)性癇性發(fā)作頻率、持續(xù)時間及嚴(yán)重程度上均有顯著性差異(P均0.01)。結(jié)論:vPAG局部腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子持續(xù)高表達(dá)可抑制癲癇的發(fā)展。
【圖文】：

“*”代表實驗組與對照組比較，P＜0.05；“**”代表實驗組與對照組比較，P＜0.01

“*”代表實驗組與對照組比較，，P＜0.05；“**”代表實驗組與對照組比較，P＜0.01
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R742.1

【參考文獻(xiàn)】

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1 Naoki Adachi;Tadahiro Numakawa;Misty Richards;Shingo Nakajima;Hiroshi Kunugi;;New insight in expression, transport, and secretion of brain-derived neurotrophic factor: Implications in brainrelated diseases[J];World Journal of Biological Chemistry;2014年04期

本文編號：2688215