發(fā)布時間：2018-10-23 13:36

【摘要】：面神經(jīng)由于解剖位置的特殊性,易被外傷、炎癥、手術(shù)等導(dǎo)致?lián)p害。面神經(jīng)損傷常伴有比較嚴重的功能失用,包括眼瞼下垂、溢淚、角膜暴露以及鼻外觀改變、口腔閉合不全、笑容口角歪斜等,這對病人的生活及心理等造成了嚴重打擊。因此,對于病人以及醫(yī)生而言,面神經(jīng)損傷后的功能改善尤為重要。盡管,許多保守治療方案已在面神經(jīng)損傷后得到應(yīng)用以改善面神經(jīng)的功能,例如神經(jīng)營養(yǎng)因子、電刺激、干細胞療法等,但是由于面神經(jīng)損傷后缺少自發(fā)的神經(jīng)再生功能,導(dǎo)致上述治療策略很難有效的恢復(fù)面神經(jīng)損傷。因此,神經(jīng)斷端的端端吻合或者神經(jīng)移植成為面神經(jīng)斷傷后的主要治療方法。神經(jīng)移植的原理為將機體其他部位的神經(jīng)移植至神經(jīng)損傷處,在面神經(jīng)修復(fù)中已得到較廣泛的應(yīng)用。近二十年來,副神經(jīng)、舌神經(jīng)、腓腸神經(jīng)、耳大神經(jīng)等都被用于面神經(jīng)斷傷后的修復(fù)。但是,由于顳骨解剖的復(fù)雜性,當面神經(jīng)損傷情況較為復(fù)雜嚴重時,導(dǎo)致暴露面神經(jīng)近心端困難,且大部分患者的身體狀態(tài)均難以承受長時間的復(fù)雜手術(shù),導(dǎo)致神經(jīng)端端吻合術(shù)或者神經(jīng)移植術(shù)難以成行。而面神經(jīng)離斷傷后如不及時處理,常導(dǎo)致其支配區(qū)域肌肉的萎縮及纖維化。此時,面神經(jīng)寄養(yǎng)術(shù)成為維持一定面部肌肉張力、延緩面部肌肉萎縮的-種新選擇。同其他神經(jīng)相比,由于耳大神經(jīng)解剖位置毗鄰面神經(jīng),面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)術(shù)可以在較小的手術(shù)區(qū)域進行,手術(shù)對患者的影響較小,也降低了手術(shù)難度。同時,由于面神經(jīng)橫切面的面積與耳大神經(jīng)橫切面的面積相似,也保證了面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)縫合術(shù)的手術(shù)縫合效果要優(yōu)于其他移植神經(jīng)�；谝陨蟽�(yōu)點,面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)術(shù)在臨床工作中愈受重視。然而,目前仍未有關(guān)于在面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)術(shù)中神經(jīng)再生、功能恢復(fù)相關(guān)機制的研究,亦未有研究報道其作用機制是否與乙酰膽堿酯酶受體(AChR)以及神經(jīng)肌肉連接(neuromuscular junction, NMJ)相關(guān)。盡管在新近的報導(dǎo)中已經(jīng)證實,在NMJ的突觸后膜維持高濃度AChR是突觸有效傳遞的基本條件。在本文研究中,我們首次建立了面神經(jīng)損傷的大鼠模型、面神經(jīng)端端吻合大鼠模型和面神經(jīng)-耳大神經(jīng)移植寄養(yǎng)大鼠模型。并觀察了不同模型大鼠的面神經(jīng)功能恢復(fù)情況,進而分別通過電生理實驗和免疫熒光技術(shù)檢測肌肉動作電位及AChR表達變化,深入探討了耳大神經(jīng)在面神經(jīng)損傷修復(fù)過程的作用及機制。目的1.成功建立面神經(jīng)損傷動物模型、面神經(jīng)端端吻合動物模型及面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)動物模型；2.評估面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)模型的面神經(jīng)功能恢復(fù)情況；3.進一步探討面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)術(shù)在面神經(jīng)損傷后修復(fù)中的作用機制。實驗方法1.動物模型建立：耳顯微鏡下解剖Wistar大鼠左側(cè)面神經(jīng),僅僅暴露面神經(jīng)不做處理,建立對照組(Ctrl組)；直接切斷面神經(jīng)后對位縫合建立面神經(jīng)損傷模型(FC組)；面神經(jīng)斷端的端端吻合建立面神經(jīng)損傷后端端吻合模型(FF組)；解剖耳大神經(jīng),行面神經(jīng)斷端-耳大神經(jīng)吻合術(shù),建立面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)動物模型(FG組)。2.面神經(jīng)功能檢測：術(shù)后第8周及術(shù)后第12周分別檢測各模型組大鼠瞬目實驗、觸須實驗、鼻尖偏向結(jié)果,評定面神經(jīng)功能。3.探討機制：術(shù)后第8周及術(shù)后第12周重復(fù)解剖上述各模型組大鼠,觀察各組神經(jīng)吻合處生長情況,利用電生理實驗檢測神經(jīng)肌肉縫合處遠端的面神經(jīng)傳導(dǎo)情況；大鼠行心臟灌注后取口輪匝肌神經(jīng)肌肉連接(NMJ),迅速制備冰凍組織切片,利用免疫熒光技術(shù)進行AChR染色,利用激光共聚焦顯微鏡觀察各模型組AChR表達情況。實驗結(jié)果1. Wistar大鼠術(shù)后生長良好,無意外死亡；面神經(jīng)損傷動物模型、面神經(jīng)端端吻合動物模型及面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)動物模型建立；術(shù)后8周及12周再次解剖發(fā)現(xiàn)面神經(jīng)損傷模型組面神經(jīng)斷端吻合處膨大,面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)移植動物模型組神經(jīng)吻合處亦有膨大,所有神經(jīng)吻合對位均良好。2.行為學(xué)觀察：在瞬目實驗中,同F(xiàn)F組相比,FG組在術(shù)后第8周及術(shù)后第12周評分均明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,而FG組同F(xiàn)C組相比,得分差異表現(xiàn)不明顯。而FF組第12周較第8周比較,得分降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,Ctrl組第8周及第12周評分無明顯差異,且明顯低于其他三組,而FC組明顯高于其他各組。在觸須試驗中,FG組在術(shù)后第8周及術(shù)后第12周評分均明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,而FG組同F(xiàn)C組相比,得分差異表現(xiàn)不明顯。而FF組第12周較第8周比較,得分降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,Ctrl組第8周及第12周評分無明顯差異,且明顯低于其他三組,而FC組明顯高于其他各組。在鼻尖偏向試驗中,FG組及FF組12周得分較第8周降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,Ctrl組得分最低,且第12周與第8周無明顯差異,FC組得分最高,且第8周與第12周無明顯差異。3.電生理檢測結(jié)果顯示：術(shù)后第8周,FF組及FG組電生理潛伏期結(jié)果分別為：2.413±0.479 ms及3.298±0.383 ms,同Ctrl組相比(1.534±0.319 ms),明顯下降(差異具有統(tǒng)計學(xué)意義)。各組電生理振幅結(jié)果分別為：FF組0.903±0.264 mV,FG組0.489±0.044 mV,Ctrl組1.829±0.054 mV。在12周,各組電生理潛伏期分別為：FF組1.827±0.335 ms;FG組3.373±0.308 ms,Ctrl組1.078±0.109ms。各組相對應(yīng)振幅分別為：1.525±0.138 mV,0.758 ±0.146 mV,1.889±0.102 mV。由結(jié)果可見,FF組神經(jīng)傳導(dǎo)情況于術(shù)后第12周較術(shù)后第8周改善明顯.FG組術(shù)后第12周神經(jīng)傳導(dǎo)反應(yīng)較第8周亦有明顯好轉(zhuǎn),但總體弱于同一時間FF組。FC組術(shù)后第8周及第12周均未引出任何神經(jīng)電反應(yīng)。4.AChR免疫熒光顯色結(jié)果：術(shù)后第8周,Ctrl組AChR顯色熒光連續(xù)、完整、亮度較高。而FF組AChR顯色熒光連續(xù)、完整、亮度均弱于Ctrl組,但均強于FG組,而FC組僅可以探測到微弱熒光顯色。術(shù)后第12周,FF組及Ctrl組AChRs顯色表達情況與第8周無明顯差別,FG組表達情況較第8周改善明顯,但仍弱于同一時間FF組及FG組熒光表達情況。FC組術(shù)后第12周熒光顯色較第8周無明顯變化,僅可探及微弱熒光。結(jié)論本課題的研究結(jié)果表明,面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)模式可以適用面神經(jīng)損傷后的手術(shù)修復(fù)。其具體作用機制主要通過產(chǎn)生ACh來營養(yǎng)面神經(jīng)支配的肌肉,阻止面神經(jīng)失用后發(fā)生肌肉萎縮。但是,作為感覺神經(jīng),耳大神經(jīng)不能自主產(chǎn)生誘導(dǎo)肌肉收縮運動的神經(jīng)沖動。因此,面神經(jīng)-耳大神經(jīng)寄養(yǎng)術(shù)更適用于面神經(jīng)損傷較重后無法行面神經(jīng)斷端的端端吻合的重大損傷。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R745.12

【共引文獻】

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本文編號：2289415