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小鼠缺血性腦卒中模型構(gòu)建及應(yīng)用研究

發(fā)布時間:2021-08-13 10:36
  目的:缺血性腦卒中動物模型的成功構(gòu)建受很多因素影響,梗塞變異系數(shù)(IVC)是評價缺血性腦卒中動物模型效果的重要指標。實驗動物模型腦梗塞病灶的范圍過大或過小,可影響實驗動物腦梗塞變異系數(shù)及死亡率。建立缺血性腦卒中實驗動物模型關(guān)鍵就是要降低梗塞變異系數(shù)及實驗動物死亡率。我們用阻斷3根血管的方法(3-VO),以期建立能夠降低實驗動物腦梗塞變異系數(shù)及實驗動物死亡率的缺血性腦卒中動物模型,并期望產(chǎn)生可靠的臨床前證據(jù),以便對缺血性腦卒中的各種干預(yù)措施進行評估。苯甲酸阿格列。ˋGL)是一種高選擇性的二肽基肽酶4(DPP-4)抑制劑,用于2型糖尿病的治療,具有心血管保護作用。我們應(yīng)用C57BL/6J小鼠建立3-VO的缺血性腦卒中模型,觀察阿格列汀對小鼠缺血性腦卒中的影響,觀察阿格列汀是否具有神經(jīng)保護作用。 方法:我們使用C57BL/6J雄性小鼠,采取一種新式手術(shù)入路,經(jīng)顳肌筋膜入路顯露顴弓,切開顳肌筋膜,向背側(cè)一起牽拉面神經(jīng)及靜脈。去除顴弓并鉆骨孔開骨窗,雙極電凝永久性阻斷大腦中動脈,同時行雙側(cè)頸總動脈臨時阻斷,3-VO總時間為15分鐘,來構(gòu)建小鼠缺血性腦卒中模型。在隨后的實驗中,我們使用C57BL/6J雄性小鼠,預(yù)防性給予阿格列汀后對小鼠行3-VO手術(shù),術(shù)后觀察急性期及慢性期腦梗死體積及神經(jīng)功能缺損評分。預(yù)防性給予阿格列汀后,觀察小鼠局部腦血流量(rCBF)的變化并進行腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)水平測定。小鼠3-VO術(shù)后給予阿格列汀治療,觀察小鼠急性期、慢性期腦梗死體積及神經(jīng)功能缺損評分。 結(jié)果:我們成功建立了小鼠3-VO的缺血性腦卒中模型,這種動物模型采取的手術(shù)入路可以避免顴弓周圍靜脈的外傷性出血。通過此動物模型我們可以在小鼠大腦皮層形成可靠的、可重復(fù)的缺血半暗帶(IP)。此局灶性腦卒中動物模型可使缺血半暗帶區(qū)的rCBF持續(xù)連貫的減少。本動物模型可降低梗塞變異系數(shù),大大降低實驗動物死亡率,適于評估神經(jīng)保護藥物在缺血性腦卒中當(dāng)中的保護作用。生理鹽水對照組與3個隊列研究中不同劑量阿格列汀溶液組的小鼠的體溫、心率、平均動脈壓、體重、血糖無顯著性差異。阿格列汀對小鼠缺血性腦卒中具有保護作用。 結(jié)論:我們采取3-VO的方式,構(gòu)建的新型的缺血性腦卒中動物模型,具有更短的手術(shù)操作時間,更低的腦梗塞變異系數(shù)值,腦梗塞后死亡率更低。本課題組的3-VO缺血性腦卒中模型可以產(chǎn)生連貫的,大小一致的缺血半暗帶。我們可使用本動物模型來探索缺血性腦卒中的治療與保護。長期預(yù)防性給小鼠服用阿格列汀可升高腦中BDNF的水平,并降低大腦受缺血性腦卒中的風(fēng)險。阿格列汀可能是BDNF的增強因子,對小鼠缺血性腦卒中具有保護作用,未來有可能作為神經(jīng)保護劑用于阻止或減少初發(fā)及復(fù)發(fā)性缺血性腦損傷。
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R743.3;R-332
文章目錄
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻
第一部分 小鼠缺血性腦卒中模型構(gòu)建
    1. 研究背景
    2. 實驗?zāi)康?/div>
    3. 實驗動物選取
    4. 實驗方法
        4.1 材料與試劑
        4.2 器械設(shè)備
        4.3 小鼠局灶性腦缺血的誘導(dǎo)
    5. 統(tǒng)計學(xué)處理
    6. 實驗結(jié)果
        6.1 小鼠腦梗塞體積分析
        6.2 小鼠 rCBF 測量
        6.3 小鼠術(shù)后神經(jīng)功能缺損評分及術(shù)后生存率評估
    7. 結(jié)論
    8. 討論
    9. 參考文獻
第二部分 神經(jīng)保護藥物對小鼠缺血性腦卒中的干預(yù)研究
    1. 研究背景
    2. 實驗?zāi)康?/div>
    3. 實驗動物選取
    4. 實驗方法和步驟
        4.1 小鼠缺血性腦卒中的誘導(dǎo)
        4.2 小鼠生理參數(shù)的監(jiān)測
        4.3 小鼠神經(jīng)功能缺損的評估
        4.4 小鼠腦梗死體積的測量
        4.5 小鼠rCBF的測定
        4.6 小鼠BDNF水平的測量
    5. 統(tǒng)計學(xué)處理
    6. 結(jié)果
    7. 結(jié)論
    8. 討論
    9. 參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
中英文縮略詞匯對照
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章、課題及成果情況
致謝

【共引文獻】

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本文編號:2243703


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