缺氧缺血性腦損傷新生大鼠松果體miRNA-182及Clock mRNA的表達(dá)變化
本文選題:miRNA + miRNA- ; 參考:《中國當(dāng)代兒科雜志》2016年03期
【摘要】:目的觀察新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)后松果體內(nèi)小RNA(miRNA)的差異表達(dá),研究其在HIBD導(dǎo)致的晝夜節(jié)律紊亂中的作用。方法將7日齡的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為HIBD模型組和假手術(shù)組,根據(jù)Rice-Vannucci法制作HIBD模型,24h后分別取兩組松果體組織,通過miRNA芯片檢測及實時熒光定量PCR法(RT-PCR)篩選出HIBD后高表達(dá)的miRNA,測定其在各組織(肺、腸、胃、腎、大腦皮層、松果體組織)中的表達(dá)差異。利用RT-PCR技術(shù)分別測定兩組在缺氧缺血后0、24、48、72h松果體中高表達(dá)miRNA及靶基因Clockm RNA的表達(dá)變化。結(jié)果 miRNA芯片結(jié)果結(jié)合RT-PCR技術(shù)篩選出多個和HIBD相關(guān)的miRNA,其中miRNA-182表達(dá)差異明顯。miRNA-182在松果體組織中高豐度表達(dá)。HIBD后24h、48hmiRNA-182的表達(dá)水平高于對應(yīng)時間點的假手術(shù)組(P0.05);與對應(yīng)時間點的假手術(shù)組相比,HIBD后0hClockm RNA表達(dá)水平升高,48h時降低,72h后明顯升高(P0.05)。結(jié)論 miRNA-182可能參與了HIBD后晝夜節(jié)律紊亂的病理生理過程。
[Abstract]:Objective to observe the differential expression of small RNA (miRNA) in pineal gland after hypoxic-ischemic brain injury (HIBD) in neonatal rats and to study its role in circadian rhythm disorder induced by HIBD. Methods 7-day-old Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into two groups: HIBD model group and sham operation group. The high expression miRNAs after HIBD were screened by miRNA microarray detection and real-time fluorescent quantitative PCR (RT-PCR), and the difference of miRNAs expression in different tissues (lung, intestine, stomach, kidney, cerebral cortex, pineal tissue) was determined. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the expression of miRNA and Clockm RNA in pineal gland at 72 h after hypoxia ischemia. Results multiple miRNAs associated with HIBD were screened by miRNA microarray and RT-PCR. The expression level of miRNA-182 in pineal tissue was significantly higher than that in sham-operation group at 24 h after HIBD (P0.05), and the expression level of miRNA-182 in pineal tissue was significantly higher than that in sham operation group (P0.05). The expression level of Clockm mRNA in sham operation group was significantly lower than that in HIBD group at 0 h after HIBD for 48 h and 72 h after HIBD (P0.05). Conclusion miRNA-182 may be involved in the pathophysiological process of circadian rhythm disorder after HIBD.
【作者單位】: 蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院新生兒科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81271378,81471488)
【分類號】:R742
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,本文編號:2101996
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