本文選題：干細(xì)胞 + 微RNAs��； 參考：《中國(guó)組織工程研究》2017年33期

【摘要】：背景:mi R-15b在腫瘤起始和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用,于是作者推測(cè)miR-15b可能參與調(diào)解膠質(zhì)瘤干細(xì)胞細(xì)胞的遷移和侵染,而這目前尚無(wú)相關(guān)報(bào)道,并且其機(jī)制也不清楚。目的:探討mi R-15b對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞遷移和侵染的影響及相關(guān)分子機(jī)制。方法:實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)膠質(zhì)瘤組織、正常成人腦組織,膠質(zhì)瘤干細(xì)胞及非膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中mi R-15b的表達(dá)情況。(1)分別以ABCG2特異性si RNA、對(duì)照si RNA轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤干細(xì)胞;(2)分別以mi R-15抑制物、mi R-15模擬物及mi R-對(duì)照分別轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤干細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后48 h,Transwell檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵染能力,ELISA法和明膠酶譜實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中基質(zhì)金屬蛋白酶2/9蛋白量及活性變化。將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞及非膠質(zhì)瘤干細(xì)胞分別注入裸鼠皮下,30 d內(nèi)觀察成瘤情況。結(jié)果與結(jié)論:(1)與正常腦組織相比,膠質(zhì)瘤中mi R-15b的表達(dá)明顯較低且與膠質(zhì)瘤所處階段呈負(fù)相關(guān)性。與非膠質(zhì)瘤干細(xì)胞相比,膠質(zhì)瘤干細(xì)胞中mi R-15b的表達(dá)顯著下調(diào);(2)與mi R-對(duì)照組比較,mi R-15b模擬物組細(xì)胞遷移及侵染能力顯著下降(P0.01),mi R-15b抑制物組細(xì)胞遷移及侵染能力顯著增加(P0.01);Target Scan生物學(xué)軟件預(yù)測(cè)表明ABCG2為mi R-15b潛在的靶基因;(3)與對(duì)照si RNA組比較,ABCG2 si RNA組細(xì)胞遷移及侵染能力顯著下降(P0.01);(4)ELISA檢測(cè)表明,上調(diào)mi R-15b基因表達(dá)顯著抑制基質(zhì)金屬蛋白酶2/9蛋白的表達(dá);(5)ELISA法和明膠酶譜實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果表明,ABCG2 si RNA轉(zhuǎn)染可顯著抑制基質(zhì)金屬蛋白酶2/9蛋白的活性,但不影響其表達(dá)量;(6)裸鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,膠質(zhì)瘤干細(xì)胞具有更強(qiáng)的成瘤能力;(7)結(jié)果表明,mi R-15b通過(guò)靶作用于ABCG2調(diào)控膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的遷移和侵染,上調(diào)mi R-15b表達(dá)可抑制膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的遷移和侵染。
[Abstract]:Background: mi R-15b plays an important role in the initiation and development of tumor, so the authors speculate that miR-15b may be involved in the mediation of glioma stem cell migration and infection, which has not been reported and its mechanism is not clear. Objective: to investigate the effect of mi R-15b on the migration and infection of glioma stem cells and its molecular mechanism. Methods: Real-time fluorescent quantitative PCR was used to detect glioma tissue and normal adult brain tissue. The expression of mi R-15b in glioma stem cells and non-glioma stem cells. (1) glioma stem cells were transfected with ABCG2 specific si RNAs and control siRNA, respectively; (2) glioma stem cells were transfected with mi R-15 inhibitor, mi R-15 mimics, and mi R- control cells, respectively. 48 h after transfection, the ability of cell migration and infection was detected by Transwell and the changes of matrix metalloproteinase 2 / 9 protein and activity in the supernatant of cell culture were detected by Elisa and gelatin zymogram. Glioma stem cells and non glioma stem cells were injected into nude mice subcutaneously for 30 days. Results and conclusion: (1) the expression of miR-15b in gliomas was significantly lower than that in normal brain tissues and was negatively correlated with the stage of glioma. Compared with non-glioma stem cells, The expression of mi R-15b in glioma stem cells was significantly down-regulated. (2) the migration and infection ability of the cells in the Mi R-15b mimic group was significantly decreased (P0.01). (P0.01) the cell migration and invasion ability of the MIR-15b inhibitor group was significantly increased (P0.01) Target Scan biological software. It was predicted that ABCG2 was a potential target gene of mi R-15b. (3) compared with the control group, the migration and infection ability of ABCG2 siRNA group was significantly decreased (P0.01); (4) Elisa. The up-regulation of miR-15b gene expression significantly inhibited the expression of matrix metalloproteinase 2 / 9 protein. (5) the results of Elisa and gelatinase assay showed that ABCG2si RNA transfection could significantly inhibit the activity of matrix metalloproteinase 2 / 9 protein. (6) the glioma stem cells had stronger tumorigenesis ability in nude mice, (7) the results showed that the glioma stem cells could regulate the migration and infection of glioma stem cells by targeting ABCG2. Upregulating the expression of mi-15 b can inhibit the migration and infection of glioma stem cells.
【作者單位】： 鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽(yáng)醫(yī)院)南陽(yáng)中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽(yáng)醫(yī)院)南陽(yáng)中心醫(yī)院神經(jīng)外科;鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽(yáng)醫(yī)院)南陽(yáng)中心醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;鄭州大學(xué)附屬醫(yī)院(南陽(yáng)醫(yī)院)南陽(yáng)中心醫(yī)院病理科;解放軍沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81401097)~~
【分類號(hào)】：R739.41

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 周志華;易良;卞修武;;膠質(zhì)瘤干細(xì)胞研究進(jìn)展[J];中華病理學(xué)雜志;2007年03期

2 徐俊杰;于洪泉;國(guó)巍;趙偉;金宏;溫娜;齊玲;;西蘭花多肽對(duì)大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2012年11期

3 徐俊杰;于洪泉;趙偉;金宏;溫娜;齊玲;劉興吉;;西蘭花多肽對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年01期

4 李嗍,王楓,繆珊,駱文靜;過(guò)量鋅對(duì)鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)的影響[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2001年04期

5 黃強(qiáng),董軍;膠質(zhì)瘤的分子外科治療[J];中國(guó)微侵襲神經(jīng)外科雜志;2001年04期

6 葉明,周岱,周幽心,王瑋,傅建新,黃煜倫;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)[J];腫瘤;2002年06期

7 王成偉 ,劉福生 ,曲元明 ,李桂林;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體抑制膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2003年01期

8 李方成,郭希高,陶宗玉,林吉惠,鐘志光,譚平國(guó);微管功能變化對(duì)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞葡萄糖攝取的影響[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2003年03期

9 顧宇翔,陳銜城,徐宏志,王宇倩;親細(xì)胞非均質(zhì)分子脂質(zhì)對(duì)鼠腦膠質(zhì)瘤局部治療的研究[J];中國(guó)臨床神經(jīng)科學(xué);2003年04期

10 陳yN招,徐如祥,楊志林,徐宗俊,杜謀選,姜曉丹,蔡穎謙;膠質(zhì)瘤對(duì)血腦屏障內(nèi)皮細(xì)胞間連接的影響[J];解剖學(xué)雜志;2003年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 李飛;李梅;盧佳友;朱剛;林江凱;孟輝;吳南;陳志;馮華;;脂質(zhì)微區(qū)干擾劑甲基-β-環(huán)糊精影響C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲和遷移的體外實(shí)驗(yàn)研究[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第四屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2009年

2 吳安華;王運(yùn)杰;Ohlfest JR;Wei Chen;Low WC;;膠質(zhì)瘤的生物治療-從實(shí)驗(yàn)室到臨床[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

3 徐宏;韓楊云;孫中書;李新軍;;與膠質(zhì)瘤代謝通路相關(guān)的候選基因篩選[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

4 潘冬生;;多基因修飾膠質(zhì)瘤細(xì)胞疫苗的抗腫瘤免疫反應(yīng)[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第六屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2011年

5 張震;徐克;;低強(qiáng)度超聲誘導(dǎo)C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡的體外實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

6 蔣偉峰;高方友;尹浩;;白細(xì)胞介素-17及其受體在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及臨床意義[A];2013年貴州省神經(jīng)外科年會(huì)論文集[C];2013年

7 徐慶生;張小兵;周永慶;;膠質(zhì)瘤干細(xì)胞及其放療敏感性[A];2011年浙江省神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

8 楊孔賓;趙世光;劉炳學(xué);陳曉豐;戴欽舜;;K~+通道阻斷劑四乙胺對(duì)大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和凋亡影響[A];中國(guó)醫(yī)師協(xié)會(huì)神經(jīng)外科醫(yī)師分會(huì)第四屆全國(guó)代表大會(huì)論文匯編[C];2009年

9 潘冬生;;聯(lián)合基因誘導(dǎo)體內(nèi)抗膠質(zhì)瘤免疫反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[A];2011中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

10 朱永堅(jiān);張建民;劉偉國(guó);沈宏;;甲氧胺聯(lián)合β-欖香烯抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)分會(huì)第九次學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 記者 匡遠(yuǎn)深;讓膠質(zhì)瘤干細(xì)胞不再“繁殖”[N];健康報(bào);2011年

2 張獻(xiàn)懷　張文;瘤區(qū)埋雷 持續(xù)殺傷[N];健康報(bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 董軍;CUL4B在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的作用研究[D];山東大學(xué);2015年

2 張睿;循環(huán)miR-221/222在膠質(zhì)瘤診斷與預(yù)后中的價(jià)值與基于CED的中樞神經(jīng)系統(tǒng)給藥新方法的研究[D];山東大學(xué);2015年

3 許森林;ALDH1A1在膠質(zhì)瘤侵襲和結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移中的作用和機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 王嘯;靶向嵌段共聚物膠束在膠質(zhì)瘤磁共振成像、藥物輸送及治療的應(yīng)用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

5 廖紅展;鋅指轉(zhuǎn)錄因子SNAI2在miR-203的影響下通過(guò)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化參與膠質(zhì)瘤耐藥機(jī)制的調(diào)節(jié)[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

6 潘俊;IRG1促進(jìn)膠質(zhì)瘤增殖的作用機(jī)制及臨床意義[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

7 鄭傳宜;膠質(zhì)瘤中GLUT3基因異常表達(dá)的意義及其相關(guān)調(diào)控機(jī)制[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

8 徐紅超;氬氦冷凍消融聯(lián)合GM-CSF治療膠質(zhì)瘤小鼠的療效及其對(duì)小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞免疫功能影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

9 黃素寧;TNFRSF6B在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及凋亡的作用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

10 熊偉;GBE1在人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤中的表達(dá)及干預(yù)實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張大慶;單核細(xì)胞趨化蛋白-1在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向膠質(zhì)瘤細(xì)胞趨化中的作用研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

2 黃俊龍;ADC值與膠質(zhì)瘤Ki-67、MGMT的相關(guān)性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李明聰;下調(diào)Pygo2對(duì)U251及U251起源的膠質(zhì)瘤干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

4 徐云峰;膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的3D培養(yǎng)及其核酸適體篩選的探索[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

5 張靜文;T細(xì)胞過(guò)繼免疫治療小鼠腦膠質(zhì)瘤原位模型的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 洪宇;膠質(zhì)瘤瘤周水腫、病理級(jí)別、Ki-67表達(dá)三者相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

7 姬云翔;磷酸化Cx43蛋白在人膠質(zhì)瘤細(xì)胞中表達(dá)及其與腫瘤細(xì)胞增殖相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

8 朱峰;OPN的異常表達(dá)與膠質(zhì)瘤的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 劉兵;SENP1表達(dá)水平對(duì)人腦膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制及其相關(guān)性[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 李文華;Slit2/Robo1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及臨床意義[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：2064612