本文選題：帕金森病 + 組蛋白去乙�；敢种苿�　； 參考：《新鄉(xiāng)醫(yī)學院》2014年碩士論文

【摘要】：背景帕金森病(Parkinson's disease, PD)是第二大常見的神經(jīng)退行性疾病,以黑質紋狀體多巴胺含量減少,中腦黑質多巴胺神經(jīng)元缺失為主要特征。目前,帕金森病的治療主要是維持膽堿能和多巴胺能的平衡,緩解運動癥狀,尚沒有治愈的方法。氧化應激和凋亡學說是帕金森發(fā)病機制中最重要的學說,有研究表明PD病人的黑質總是處于一種高度氧化應激狀態(tài)。表觀遺傳機制組蛋白乙�；腿ヒ阴；谂两鹕『推渌窠�(jīng)退行性疾病中起著非常重要的作用,組蛋白去乙�；敢种苿�(histone deacetylase inhibitor, HDACI)對神經(jīng)退行性疾病具有一定的保護作用。金屬硫蛋白(Metallothionein2,MT2)是一種氧化應激抵抗因子,組蛋白去乙�；敢种苿┠苌险{MT2基因表達。多巴胺轉運體(dopamine transporter, DAT)和囊泡轉運體(vesicular monoamine transporter, VMAT2)在維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多巴胺等單胺類物質平衡中發(fā)揮著十分重要的作用。DAT和VMAT2啟動子區(qū)CpG島甲基化程度具有很大變異,從2%到90%,并與基因表達相關,顯示表觀遺傳調控是DAT和VMAT2表達調控的重要機制。因此,組蛋白去乙�；敢种苿┦欠裢ㄟ^上調MT2、DAT和VMAT2的表達進而對帕金森病產(chǎn)生保護作用,其表達變化是否通過表觀遺傳機制實現(xiàn)?這些有待與我們進一步研究。 目的探討組蛋白去乙酰化酶抑制劑對帕金森病細胞模型的保護作用及其可能的機制 方法研究對象：多巴胺能神經(jīng)細胞 實驗分組：對照組(DMSO)、模型組(0.5μM魚藤酮、1mM MPP+,24h)丁酸鈉干預組(1mM、2mM、5mM,48h) 1.采用四甲基偶氮嘩鹽(MTT)比色法檢測細胞活性,INT顯色檢測LDH的釋放,DCFH-DA熒光標記探針流式檢測細胞活性氧代謝物(reactive oxygen species, ROS), PI(propidium iodide)流式檢測亞二倍體峰(sub G1peak)。 2.采用Real Time PCR的方法檢測MT2mRNA的表達。 3.采用重亞硫酸鹽測序PCR的方法檢測MT2、DAT和VMAT2基因啟動子區(qū)域甲基化變化。 4.采用染色質免疫共沉淀的方法檢測MT2、DAT和VMAT2基因啟動子區(qū)域H3ac變化,最后進行real time定量PCR分析。 結果1.HDACI對魚藤酮和MPP+致多巴胺能神經(jīng)細胞株損傷的影響。 (1)魚藤酮和MPP+能顯著降低多巴胺能神經(jīng)細胞株活性。 (2) HDACI顯著降低多巴胺能神經(jīng)細胞株活性氧水平。 (3) HDACI顯著降低魚藤酮和MPP+誘導的多巴胺能神經(jīng)細胞株凋亡 2. HDACI上調MT2mRNA表達。 3. HDACI降低MT2、DAT、VMAT2基因啟動子區(qū)域甲基化率。 4. HDACI增加MT2、DAT、VMAT2基因啟動子區(qū)域H3ac水平。 結論HDACI(丁酸鈉)對帕會森病具有保護作用,是通過表觀遺傳機制上調MT2和單胺轉運體的表達實現(xiàn)。
[Abstract]:Background Parkinsonian disease (PD) is the second most common neurodegenerative disease characterized by a decrease in dopamine content in the substantia nigra and a loss of dopamine neurons in the substantia nigra. At present, the treatment of Parkinson's disease is mainly to maintain the balance of cholinergic and dopaminergic, alleviate motor symptoms, there is no cure. Oxidative stress and apoptosis are the most important theories in the pathogenesis of Parkinson's disease. Some studies have shown that the substantia nigra of PD patients is always in a state of high oxidative stress. Histone acetylation and deacetylation play an important role in Parkinson's disease and other neurodegenerative diseases. Histone deacetylase inhibitor (histone deacetylase inhibitor, HDACI has a protective effect on neurodegenerative diseases. Metallothionein 2 (MT2) is an oxidative stress resistance factor and histone deacetylase inhibitor can up-regulate the expression of MT2 gene. Dopamine transporter (dopamine transporter, DAT) and vesicular transporter (vesicular monoamine transporter, VMAT2) play a very important role in maintaining the balance of dopamine and other monoamines in the central nervous system. From 2% to 90% and related to gene expression, epigenetic regulation is an important mechanism of DAT and VMAT2 expression regulation. Therefore, does histone deacetylase inhibitor protect Parkinson's disease by upregulating the expression of MT2nDAT and VMAT2, and does its expression change through epigenetic mechanism? These need further study with us. Objective to investigate the protective effect of histone deacetylase inhibitor on Parkinson's disease cell model and its possible mechanism. Methods: dopaminergic nerve cell experimental group: control group (DMSO). The model group (0.5 渭 M rotenone 1 mm MPP 24 h) and sodium butyrate intervention group (1 mm M 2 mm MU 5 mm M + 48 h) 1. (reactive oxygen species, Ros and sub G1peak were detected by MTT colorimetry and sub G1peak, respectively. The expression of MT2 mRNA was detected by Real time PCR. The methylation changes of MT2DATand VMAT2 promoter region were detected by bisulfite sequencing PCR. 4. Chromatin immunoprecipitation was used to detect the H3ac changes in the promoter region of MT2DATand VMAT2 gene. Finally, real time quantitative PCR was used to detect the changes of H3ac in the promoter region of MT2DATand VMAT2 gene. Results 1. The effect of HDACI on the damage of dopaminergic nerve cell lines induced by rotenone and MPP. (1) rotenone and MPP significantly decreased the activity of dopaminergic nerve cell lines. (2) HDACI significantly decreased the activity of dopaminergic nerve cells. (3) HDACI significantly decreased the apoptosis of dopaminergic nerve cell lines induced by rotenone and MPP. HDACI upregulated MT2 mRNA expression. HDACI reduced the methylation rate of MT2 DATVMAT2 promoter region. 4. HDACI increased the level of H3ac in the promoter region of MT2 DATVMAT2 gene. Conclusion HDACI (sodium butyrate) has protective effect on Parsons disease, which is realized by upregulating the expression of MT2 and monoamine transporter by epigenetic mechanism.
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R742.5

【共引文獻】

相關期刊論文 前10條

1 喬蓮;張志華;王陶然;王麗紅;郝長來;;丙戊酸鈉對RPMI8226細胞增殖的影響[J];承德醫(yī)學院學報;2013年05期

2 彭黎;李福喜;邵文鳳;熊靜波;;曲古菌素A抑制乳腺腫瘤干細胞的自我更新[J];南方醫(yī)科大學學報;2013年10期

3 賈敏;紀木火;楊建軍;徐建國;;組蛋白去乙�；冈谡J知功能障礙中的作用[J];臨床麻醉學雜志;2014年03期

4 王亞洲;鞠少卿;王小飛;;HDAC1-11 mRNA在出生后大鼠坐骨神經(jīng)發(fā)育過程中的表達變化[J];神經(jīng)解剖學雜志;2013年04期

5 吳遠雙;孟慶雄;;神經(jīng)退行性疾病的表觀遺傳學[J];生命科學研究;2013年04期

6 李會丹;孫悅;火蓉芬;沈柏華;李寧麗;;組蛋白去乙酰化酶1通過NF-κB調控炎癥性滑膜細胞表達Cyr61[J];現(xiàn)代免疫學;2014年01期

7 譚麗麗;楊向方;李燕廣;張國徽;;缺血預處理聯(lián)合黃芩苷預處理對大鼠腦缺血再灌注半暗帶細胞凋亡及Bcl-2/Bax比值的影響[J];中西醫(yī)結合心腦血管病雜志;2014年02期

8 李平;;在治療腫瘤領域中組蛋白去乙�；敢种苿┑难芯窟M展[J];中國實用醫(yī)藥;2014年16期

9 董紅心;Janitza Montalvo-Ortiz;John Csernansky;;表觀遺傳對老年人群抗精神病藥療效的調節(jié):組蛋白脫乙酰基酶抑制劑的臨床前研究(英文)[J];遵義醫(yī)學院學報;2014年03期

10 鄭文霞;吳方建;;組蛋白去乙�；敢种苿⿲θ毖阅X血管病保護機制的研究進展[J];中國醫(yī)院藥學雜志;2014年15期

相關博士學位論文 前10條

1 時建銓;新型抗癲癇藥對APPswe/PS1dE9雙轉基因小鼠病理學與行為學的影響及機制研究[D];南京醫(yī)科大學;2013年

2 張付;甲基苯丙胺對PC12細胞的毒性損傷、蛋白質硝基化、L-257抗損傷等作用的機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2012年

3 譚如彬;肺動脈高壓細胞治療研究中骨髓間充質干細胞性別對療效的影響及其機制[D];華中科技大學;2013年

4 邱紅梅;組蛋白乙酰化及抑郁癥相關基因表達研究和丙戊酸鈉的干預作用[D];重慶醫(yī)科大學;2013年

5 王鑫;淫羊藿苷調控中樞膽堿能神經(jīng)環(huán)路乙�；瘍确�(wěn)態(tài)改善小鼠卒中后認知障礙的研究[D];南京中醫(yī)藥大學;2013年

6 劉文強;小鼠受精卵雌雄原核重編程能力的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2014年

7 劉棟;質譜技術對蛋白質翻譯后修飾的檢測在臨床及基礎研究中的應用[D];第四軍醫(yī)大學;2013年

8 張茂營;拉莫三嗪改善阿爾茨海默病APPswe/PS1dE9雙轉基因模型小鼠認知功能的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學;2014年

9 劉翠;AnkG對小鼠精神行為和認知功能的影響及機制探討[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2014年

10 穆儀冰;結腸癌間質的定量蛋白質組學研究[D];中南大學;2013年

相關碩士學位論文 前10條

1 焦義明;腦缺血預處理對大鼠腦內Nogo-A及受體NgR表達的影響[D];鄭州大學;2013年

2 謝楊;組蛋白去乙酰化酶抑制劑聯(lián)合唑來膦酸對多發(fā)性骨髓瘤荷瘤小鼠抗腫瘤作用及機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2013年

3 任曉律;表觀遺傳調控對人胰腺癌細胞PANC-1增殖和基因表達的影響[D];內蒙古大學;2013年

4 王進京;Ⅲ型組蛋白去乙酰化酶sirt1對間充質干細胞C3H10T1/2的成脂分化影響的研究[D];暨南大學;2013年

5 越茂松;HDACi對腦缺血性卒中保護機制的研究[D];暨南大學;2013年

6 陳娜娜;1、人參皂苷Rb1對神經(jīng)干細胞分化的影響2、VPA對神經(jīng)損傷保護機制的研究[D];東北師范大學;2013年

7 卿秋菊;組蛋白乙�；揎椩诋惙檫z忘機制中的作用[D];中南大學;2013年

8 梁增紅;促紅細胞生成素對新生大鼠缺氧缺血性腦病保護作用的研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2013年

9 司昊天;丙戊酸對大鼠顱腦損傷后神經(jīng)保護作用的實驗研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2013年

10 湯惠;組蛋白去乙酰化酶2激活糖原合酶激酶3β磷酸化tau蛋白[D];華中科技大學;2013年

，

本文編號：2058043