發(fā)布時間：2018-06-20 22:38

  本文選題：內(nèi)皮細(xì)胞 + 細(xì)胞培養(yǎng)�。� 參考：《中國組織工程研究》2016年51期

【摘要】：背景:腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是神經(jīng)科學(xué)研究領(lǐng)域的重要工具細(xì)胞,如何獲得高純度的腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞一直是體外研究的關(guān)鍵和難點(diǎn)。目的:探索一種簡便易操作,高純度的原代腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)方法。方法:使用6-8周齡C57BL/6小鼠,經(jīng)酶消化及梯度離心法獲得微血管段,使用藥物進(jìn)一步純化內(nèi)皮細(xì)胞,利用CD31和GFAP免疫熒光染色鑒定內(nèi)皮細(xì)胞純度。使用Claudin-5免疫熒光染色鑒定緊密連接蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果與結(jié)論:1細(xì)胞呈旋渦狀或鋪路石樣排列、生長;2免疫熒光顯示內(nèi)皮細(xì)胞純度達(dá)99%以上,并廣泛表達(dá)緊密連接蛋白;3結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)建立了一種簡便、易操作的,可以獲得大量高純度的原代小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)方法。
[Abstract]:Background: brain microvascular endothelial cells (CBECs) are important tool cells in neuroscience research. How to obtain high purity brain microvascular endothelial cells (CBECs) is always the key and difficulty in vitro. Objective: to explore a simple and convenient method for isolation and culture of primary brain microvascular endothelial cells. Methods: the microvascular segments of C57BL / 6 mice aged 6-8 weeks were obtained by enzyme digestion and gradient centrifugation. The endothelial cells were further purified by drugs. The purity of endothelial cells was identified by CD31 and GFAP immunofluorescence staining. Claudin-5 immunofluorescence staining was used to identify the expression of tight junction protein. Results and conclusion: the cells were arranged in swirl or paving stone shape, and the purity of endothelial cells was over 99% by immunofluorescence. The results showed that the experiment was simple and easy to operate. A large number of primary mouse microvascular endothelial cells with high purity could be obtained.
【作者單位】： 徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科徐州醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)病學(xué)教研室;徐州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)外科徐州醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)外科學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金(81501095) 江蘇省六大人才高峰資助項目(2014-WSN-034)~~
【分類號】：R741

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4 劉s，

本文編號：2045929