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IL-10基因修飾的BMSCs對大鼠腦缺血再灌注損傷炎性因子及神經細胞凋亡的影響

發(fā)布時間:2018-04-09 07:45

  本文選題:BMSCs 切入點:IL- 出處:《中國修復重建外科雜志》2017年02期


【摘要】:目的探討IL-10基因修飾的BMSCs對大鼠腦缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury,IRI)炎性因子及神經細胞凋亡的影響。方法取SD大鼠骨髓,采用貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)BMSCs,經免疫組織化學染色鑒定后,取第3代BMSCs以重組腺病毒(recombinant adenovirus,Ad)介導IL-10基因轉染(Ad IL-10-BMSCs)。取40只清潔級成年SD雄性大鼠,采用線栓法制備大腦中動脈阻塞模型后隨機分為4組,每組10只。模型制備后3 h于各組大鼠尾靜脈注射1 m L含10%FBS的L-DMEM培養(yǎng)液(A組)、61.78 ng IL-10(B組)、1 m L BMSCs懸液(細胞濃度為2×10~6個/m L,C組)、1 m L Ad IL-10-BMSCs懸液(細胞濃度2×10~6個/m L,D組)。C、D組細胞移植前采用Brd U標記。7 d后大鼠經頸總動脈灌注處死取腦組織,免疫染色法檢測小膠質細胞(OX42)表達,ELISA法測定TNF-α、IL-1β含量,TUNEL法檢測神經細胞凋亡;取C、D組組織行Brd U免疫熒光染色觀察。結果C、D組腦組織中均見呈綠色熒光的Brdu陽性細胞,主要分布于梗死區(qū)周圍的紋狀體、大腦皮質、皮質下等。免疫組織化學染色示,B、C、D組OX42陽性細胞數明顯少于A組,D組少于B、C組,比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。ELISA檢測示D組大鼠腦組織中TNF-α、IL-1β含量較其余3組明顯降低(P0.05)。TUNEL法檢測各組凋亡細胞(TUNEL陽性細胞)主要見于梗死灶周圍的紋狀體及額頂皮質下腦組織(相當于缺血半暗帶),D組與A、B、C組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論Ad IL-10-BMSCs能通過抑制小膠質細胞分泌促炎性因子TNF-α、IL-1β,抑制梗死灶周圍腦組織神經細胞凋亡,對大鼠腦IRI起保護作用。
[Abstract]:鐩殑鎺㈣IL-10鍩哄洜淇グ鐨凚MSCs瀵瑰ぇ榧犺剳緙鴻鍐嶇亴娉ㄦ崯浼,

本文編號:1725493

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