本文選題：顱內(nèi)動(dòng)脈瘤　切入點(diǎn)：血流動(dòng)力學(xué)　出處：《南昌大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的具體機(jī)制仍在探索。目前認(rèn)為血流動(dòng)力學(xué)因素所致的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷及相關(guān)炎癥反應(yīng)是顱內(nèi)動(dòng)脈瘤形成的始動(dòng)環(huán)節(jié)。我們前期研究顯示沖擊流作用下培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞P120連環(huán)蛋白(P120-catenin,p120ctn)及轉(zhuǎn)錄因子Kaiso的表達(dá)均減少。本研究擬通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)觀察沖擊流作用下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)p120ctn及Kaiso的亞細(xì)胞定位的變化,探究p120ctn及Kaiso參與調(diào)控血流動(dòng)力學(xué)所致內(nèi)皮細(xì)胞受損的相關(guān)機(jī)制。方法:體外實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)及運(yùn)用shRNA CTNND1重組慢病毒轉(zhuǎn)染的HUVEC。分別將上述兩種細(xì)胞種植在涂有纖維連接蛋白(fibronectin,FN)的普通載玻片上,待細(xì)胞90%以上融合后,將載玻片置入沖擊流作用下內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)裝置。對(duì)照組不加載沖擊流,實(shí)驗(yàn)組加載流速為500ml/min的沖擊流作用于HUVEC 3小時(shí)和6小時(shí)。運(yùn)用蛋白免疫印跡和免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)p120ctn和Kaiso在細(xì)胞胞漿及胞核的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)在沖擊流作用下培養(yǎng)6小時(shí)后,可見(jiàn)沖擊點(diǎn)處細(xì)胞的形態(tài)及細(xì)胞間粘附維持正常;其臨近區(qū)域的細(xì)胞密度明顯降低,可見(jiàn)細(xì)胞變圓,且大部分被沖散;而下游區(qū)域的細(xì)胞密度增大,部分細(xì)胞生長(zhǎng)排列與沖擊流方向大致相同。(2)蛋白免疫印跡分析顯示:對(duì)照組HUVEC的胞質(zhì)及胞核內(nèi)均表達(dá)p120ctn和Kaiso。與對(duì)照組相比,隨著沖擊流作用時(shí)間延長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組HUVEC內(nèi)p120ctn在胞質(zhì)表達(dá)下降,在胞核表達(dá)增多,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);Kaiso在胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)無(wú)明顯變化(P0.05),而在胞核內(nèi)表達(dá)增多(P0.05)。運(yùn)用shRNA CTNND1重組慢病毒轉(zhuǎn)染HUVEC后,與正常HUVEC對(duì)比,其p120ctn蛋白表達(dá)顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)免疫細(xì)胞化學(xué)顯示:對(duì)照組HUVEC內(nèi)p120ctn主要在胞質(zhì)內(nèi)表達(dá);Kaiso主要在胞核周?chē)磉_(dá),在胞核內(nèi)少量表達(dá)。與對(duì)照組相比,隨著沖擊流作用時(shí)間延長(zhǎng),p120ctn在胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)減少,在胞核內(nèi)表達(dá)明顯增多;Kaiso在胞核周?chē)磉_(dá)減弱,而在胞核中表達(dá)有增多的趨勢(shì)。運(yùn)用shRNA CTNND1重組慢病毒轉(zhuǎn)染HUVEC后,p120ctn表達(dá)明顯減弱,且Kaiso在細(xì)胞核表達(dá)增多的趨勢(shì)減弱。結(jié)論:沖擊流作用下,隨著加載沖擊流時(shí)間的延長(zhǎng),HUVEC內(nèi)p120ctn可能發(fā)生質(zhì)核穿梭,由胞質(zhì)進(jìn)入胞核內(nèi)。敲除p120ctn基因后,沖擊流作用下Kaiso在細(xì)胞核內(nèi)的表達(dá)減少。
[Abstract]:Objective : To investigate the expression of p120ctn and Kaiso in cultured human umbilical vein endothelial cells ( HUVEC ) in vitro . ( 3 ) Immunocytochemistry showed that p120ctn was mainly expressed in the cytoplasm and the expression of Kaiso was decreased in cytoplasm .

【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R743

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1681138