本文選題：癲癇　切入點：右美托咪啶　出處：《河北醫(yī)科大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的：癲癇(epilepsy)是神經(jīng)科最常見慢性疾病之一，既有原發(fā)性的，也有繼發(fā)性的，臨床上以腦部疾病后癲癇常見。癲癇在幼年時期即有較高的的發(fā)病率，世界上近1%的人口遭受著癲癇這一慢性疾病的困擾，在目前的醫(yī)療水平下仍有近30%的癲癇患者經(jīng)過藥物治療后不能得到理想的控制。癲癇的病理基礎為腦部神經(jīng)元的異常放電。目前對于癲癇的腦損傷機制有以下幾方面：細胞內(nèi)鈣超載、氧化應激、興奮性氨基酸中毒、炎癥反應及凋亡等多個方面，并且它們之間相互影響，互為因果，影響腦部神經(jīng)元的功能。因此抗癲癇藥物的選用及研發(fā)也成為近年來研究的熱點，同時針對抗氧化應激成為眾多抗癲癇藥物研究的重要的一方面。 本研究以雄性Wistar大鼠為實驗動物，應用杏仁基底外側核電點燃法建立大鼠慢性癲癇模型。依據(jù)Racine分級，記錄觀察大鼠癲癇發(fā)作的嚴重程度，并用右美托咪啶進行腹腔注射加以干預，通過Morris水迷宮檢測癲癇大鼠及右美托咪啶干預大鼠學習記憶能力的改變，檢測海馬組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量高低情況及運用WesternBlot方法檢測誘導型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達變化。觀察右美托咪啶是否通過抗氧化作用對癲癇大鼠認知有改善作用，并且同時對右美托咪啶的抗癲癇作用機制進行研究。 方法：清潔級健康成年雄性Wistar大鼠有43只，隨機分組：正常對照組（NC組）8只，未給予植入電極，每天抓取一次。假手術組（SH組）8只，給予杏仁基底外側核植入電極，未行電刺激；慢性電點燃癲癇組（EP組）9只，慢性電點燃程序刺激予以點燃后刺激；右美托咪啶低劑量組（LD組）9只，慢性電點燃程序刺激+點燃后刺激+腹腔注射右美托咪啶（50μg/kg）；右美托咪啶高劑量組（HD組）9只，慢性電點燃程序刺激+點燃后刺激+右美托咪啶（100μg/kg）腹腔注射。EP組、HD組、LD組測定后放電閾值后將符合點燃成功后大鼠予以慢性電點燃刺激，點燃成功后予以每日一次點燃后刺激，其中LD組/HD組于點燃后每日電刺激前5分鐘給予右美托咪啶50μg/kg/100μg/kg腹腔內(nèi)注射，一周后將各組大鼠行Morris水迷宮試驗，檢測各組大鼠空間學習記憶能力，記錄其逃避潛伏期，實驗結束后將五組大鼠斷頭處死，取海馬組織，運用Western Blot檢測海馬腦組織中誘導型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達及制備10%海馬腦組織勻漿并采用比色法檢測海馬組織中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量變化。 結果： 1給予慢性電點燃程序刺激后， EP組達到點燃的大鼠8只，HD、LD組達到點燃的大鼠8只，點燃成功后繼續(xù)給予杏仁基底外側核電刺激，HD組給予右美托咪定后癲癇發(fā)作等級較EP組明顯降低，LD組發(fā)作等級較EP組無明顯變化。SH組和NC組均無癲癇發(fā)作。 2Morris水迷宮檢測結果，對各組大鼠航行結果統(tǒng)計均值，記錄平均逃避潛伏期，各組之間進行比較發(fā)現(xiàn)：定位航行第一天：EP、LD、HD組逃避潛伏期均較NC組延長，但統(tǒng)計學無明顯差異， NC組和SH組無統(tǒng)計學差異（P0.05）。第二天與第一天相比，各組逃避潛伏期均值均明顯縮短，但EP、LD、HD組均較NC組延長，有統(tǒng)計學意義（P0.05），，NC組和SH組無統(tǒng)計學差異（P0.05），LD、HD組均較EP組縮短， HD組與EP組有統(tǒng)計學意義（P0.05），LD組與EP組無統(tǒng)計學差異。第三天測試結果與第二天相比各組逃避潛伏期均值均明顯縮短，EP、LD、HD組均較NC組延長，有統(tǒng)計學意義（P0.05），NC組和SH組無統(tǒng)計學差異（P0.05），LD、HD組均較EP組縮短，HD組與EP組有統(tǒng)計學意義（P0.05），LD組與EP組無統(tǒng)計學差異。第四天各組逃避潛伏期均較第三天縮短。各組比較結果同第三天。 3大鼠海馬腦組織勻漿MDA含量變化EP組(5.002±1.515nmol/mgprot)、LD組(4.757±0.939nmol/mgprot)MDA含量明顯升高，與NC組(2.078±0.593nmol/mgprot)比較，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)； HD組(2.3180±0.756nmol/mgprot)與NC組相比較無統(tǒng)計學差異（P0.05）；NC組、SH組(2.101±0.575nmol/mgprot)中MDA含量相比較，差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）; HD組MDA含量與EP組比較減少，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 4大鼠海馬腦組織勻漿SOD活力變EP組(19.2012±4.33U/mgprot)、LD組(20.71±3.88U/mgprot)SOD活力明顯減弱，與NC組(33.16±6.13U/mgprot)比較，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；HD組(27.27±6.99U/mgprot)與NC組相比較無統(tǒng)計學差異（P0.05）；NC組、SH組(33.15±3.58U/mgprot)中SOD活力相比較，差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）; HD組SOD活力增強，與EP組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 5大鼠海馬Western blot結果EP組（0.658±0.215）、 LD組（0.644±0.220）海馬腦組織中一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達較NC組（0.381±0.163）、SH組（0.385±0.156）明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)； NC組、SH組海馬腦組織中一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達無統(tǒng)計學差異（P0.05）；HD組（0.419±0.134）海馬腦組織中一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達較EP組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論： 1成功建立杏仁基底外側核電點燃慢性癲癇模型，癲癇大鼠的學習記憶能力下降，右美托咪啶可能會改善電點燃癲癇大鼠的學習記憶功能。 2右美托咪啶通過降低癲癇大鼠海馬腦組織中一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達，增強SOD活力，降低MDA含量，驗證了其抗氧化應激作用，進而證實其潛在抗癲癇作用及對腦組織神經(jīng)元的保護作用，具體在臨床的應用有待進一步研究。
[Abstract]:Objective: epilepsy (epilepsy) is one of the most common chronic disease in neurology, both primary, or secondary, common in clinical brain disease after epilepsy. Epilepsy in infancy is a high incidence, nearly 1% of the world's population suffers from a chronic illness of epilepsy in the current medical level, there are still nearly 30% of epilepsy patients after drug treatment can not get ideal control. The pathological basis of epilepsy of brain neurons abnormal discharge. There are the following aspects for the mechanism of brain injury epilepsy: intracellular calcium overload, oxidative stress, excitatory amino acid toxicity, many aspects of inflammation the reaction and apoptosis, and the mutual influence between them, affect the brain function of reciprocal causation, so the selection and development of anti epilepsy drugs has become a research hotspot in recent years, at the same time for the anti oxidative stress become One of the most important aspects of the study of antiepileptic drugs.
In this study, male Wistar rats as the experimental animal, application of basolateral amygdala kindling method to establish a rat model of chronic epilepsy. According to Racine classification, observed the severity of epileptic rats, and intraperitoneal injection of dexmedetomidine intervention, through the Morris water maze test in epileptic rats and dexmedetomidine in rats the changes of learning and memory, hippocampus tissue superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA) content and iNOS was detected by using the method of WesternBlot (iNOS) protein expression changes. To observe the effects of dexmedetomidine by antioxidation on cognitive epileptic rats had improved, and at the same time of dexmedetomidine antiepileptic mechanism were studied.
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本文編號：1663447