本文關(guān)鍵詞： 膠質(zhì)瘤 γ-羥丁酸鈉 放療增敏　出處：《蘇州大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：探討γ-羥丁酸鈉（gamma-hydroxybutrate，GHB）對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞SHG-44增殖抑制及放療增敏機(jī)制研究。 方法：以SHG-44細(xì)胞為研究對(duì)象，MTT法檢測(cè)不同濃度GHB（2.5mmol/L、5mmol/L、7.5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L）作用人膠質(zhì)瘤細(xì)胞不同時(shí)間（24h、48h、72h）細(xì)胞增殖抑制率。Hoechst33258實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度GHB（5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L）作用24h后細(xì)胞核變化。下列實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組、藥物組、照射組、聯(lián)合組（照射+藥物）。流式細(xì)胞術(shù)（FCM）分析各組細(xì)胞周期、凋亡情況�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)分析GHB聯(lián)合不同劑量的X線照射對(duì)細(xì)胞存活率的影響，擬合存活曲線。細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)SHG-44細(xì)胞中HDAC1（Histone deacetylase1，HDAC1）mRNA表達(dá)情況。RT-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞HDAC1mRNA、ATM （Ataxiatelangiectasia-mutated gene）mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。 結(jié)果：MTT實(shí)驗(yàn)顯示GHB明顯抑制SHG-44細(xì)胞的生長(zhǎng)，呈濃度和時(shí)間依賴性。Hoechst33258鏡下觀察時(shí)染色體濃縮，見強(qiáng)藍(lán)色熒光。FCM檢測(cè)聯(lián)合組細(xì)胞周期S期細(xì)胞減少，G0/G1期細(xì)胞增多，凋亡顯著�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)顯示聯(lián)合組的D0、Dq及SF2各值低于照射組(1.764Vs2.237，，1.251Vs1.873，0.561Vs0.769)，聯(lián)合組SER為1.27。細(xì)胞免疫熒光測(cè)得HDAC1主要在SHG-44細(xì)胞核中表達(dá)。RT-PCR結(jié)果表明γ-羥丁酸鈉能抑制HDAC1mRNA、ATM mRNA表達(dá)。 結(jié)論：GHB通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，改變細(xì)胞周期，抑制腫瘤細(xì)胞損傷修復(fù)，抑制HDAC1、ATM mRNA表達(dá)，從而增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞放射敏感性。
[Abstract]:Aim: to investigate the mechanism of 緯-hydroxybutyrate sodium gamma-hydroxybutyrate (GHBs) inhibiting the proliferation of glioma cell line SHG-44 and enhancing the sensitivity of radiotherapy. Methods: the proliferation inhibition rate of human glioma cells treated with SHG-44 cells at different concentrations of 2.5 mmol 路L ~ (2.5) mmol 路L ~ (5) mmol 路L ~ (5) mmol 路L ~ (5) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (10) mmol 路L ~ (15) mmol 路L ~ (-1) 路Hoechst33258 (24 h / 24 h) was measured by MTT assay. The following experiments were divided into two groups: control group, drug group, 10 mmol 路L ~ (10) mol 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L ~ (-1) 路L). In the irradiation group, the cell cycle and apoptosis were analyzed by flow cytometry (FCM). Clone formation assay was used to analyze the effect of GHB combined with different doses of X-ray irradiation on cell survival. Cell immunofluorescence was used to detect the expression of HDAC1(Histone deacetylase1HDAC1mRNA in SHG-44 cells. RT-PCR was used to detect the transcription level of HDAC1mRNA-Ataxiatelangiectasia-mutated gene)mRNA. Results GHB significantly inhibited the growth of SHG-44 cells in a dose-and time-dependent manner. Chromosome concentration was observed in a dose-and time-dependent manner. Strong blue fluorescence. FCM assay showed that the number of G _ 0 / G _ 1 phase cells decreased in the S phase of cell cycle. The results showed that D0 Dq and SF2 in the combined group were lower than those in the irradiated group (1.764 vs 2.237) and 1.871 vs 1.871 vs 0.561Vs0.769in the combined group. The results of cellular immunofluorescence assay showed that HDAC1 mainly expressed in the nucleus of SHG-44. The results of RT-PCR showed that 緯 -hydroxybutyrate could inhibit the expression of HDAC1mRNAs mRNA. Conclusion by inducing apoptosis, changing cell cycle, inhibiting the repair of tumor cell injury and inhibiting the expression of HDAC1 mRNA, the radiosensitivity of glioma cells can be enhanced.
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R739.41

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1506872