本文關鍵詞： 膠質瘤 IDH1突變 Ki-67 微血管密度（MVD）　出處：《石河子大學》2014年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的：檢測人膠質瘤標本的IDH1變異情況，同時建立穩(wěn)定的人膠質瘤動物模型，不同時間點通過對腫瘤大小的觀察、微血管測定、抗原Ki-67檢測來初步探討膠質瘤IDH1基因變異對膠質瘤大小及腫瘤細胞增殖的影響，為進一步的臨床應用打下堅實的基礎。 方法：收集新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院神經(jīng)外科經(jīng)外科手術切除并病理報告確診膠質瘤的腫瘤標本，PCR方法檢測IDH1基因變異及免疫組化法檢測微血管測定（MVD）、抗原Ki-67表達情況，變異及未變異的膠質瘤標本細胞培養(yǎng)傳代，采用立體定向儀，將自行培養(yǎng)的膠質瘤細胞接種于成年雄性Wistar大鼠腦內(nèi)的方法，制作鼠人腦膠質瘤模型。采用隨機數(shù)表將120只雄性wistar大鼠隨機分為手術組60只、假手術組30只、空白組30只，手術組又分為兩組各30只，分別移植變異型人腦膠質瘤細胞和野生型人腦膠質瘤細胞，假手術組移植等量生理鹽水，空白對照組給予常規(guī)飼養(yǎng)。小鼠均正常飼養(yǎng)，造模后的1W、2W、3W行影像學檢查并記錄腫瘤大小，3周后將各組大鼠處死取腦，行常規(guī)H E染色、膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色、微血管測定（MVD）及抗原Ki-67檢測。 結果：1.動物實驗表明變異型膠質瘤組腫瘤大小與未變異組比較無統(tǒng)計學差異，分別為197.55±18.84和205.51±20.84，且生長速度也無差異；IDH1基因變異型膠質瘤組Ki-67蛋白表達較未變異組膠質瘤降低，差異有統(tǒng)計學意義（P0.05），IDH1基因變異型膠質瘤血管密度計數(shù)（MVD）較未變異組減低（P0.05），表明IDH1基因變異可降低腫瘤的增殖活性。2.人體標本實驗表明IDH1基因變異型膠質瘤Ki-67蛋白表達較野生型膠質瘤降低，差異有統(tǒng)計學意義（t=2.134，，P=0.039），IDH1變異型與野生型膠質瘤Ki-67標記指數(shù)分別為（14.44%±8.23%）和（21.19%±11.49%）；IDH1基因變異型膠質瘤血管密度計數(shù)（MVD）較野生型減低（t=2.328，P=0.025），其血管密度計數(shù)分別為31.11±13.47和40.54±12.11；低級別膠質瘤Ki-67及微血管密度（MVD）表達較高級別膠質瘤低（t=9.138，P0.001；t=-8.369，P0.001），低級別膠質瘤（WHOI級、II級）和高級別膠質瘤（WHO III級、IV級）Ki-67表達分別是8.36%±2.84%和25.55%±7.53%，其血管密度計數(shù)分別為23.94±8.03和45.54±8.19，兩者表達隨膠質瘤級別增高而增高，動物實驗與人體腫瘤標本實驗檢測結果基本一致。 結論：膠質瘤IDH1基因變異對腫瘤生長及大小無明顯影響，但其對腫瘤細胞的增殖有影響。因為IDH1基因變異影響腫瘤的能量代謝，而能量代謝受阻降低細胞的增殖活性，使大量細胞處于休眠期，導致新生血管內(nèi)皮細胞分裂緩慢，新生腫瘤血管數(shù)量減低，惡變和轉移受到抑制，為IDH1基因變異延長患者的生存期的機制提供新的理論依據(jù)。
[Abstract]:Objective: to detect the variation of IDH1 in human glioma specimens and to establish a stable animal model of human glioma. The effect of IDH1 gene variation on glioma size and tumor cell proliferation was preliminarily studied by Ki-67 assay, which laid a solid foundation for further clinical application. Methods: the specimens of glioma were collected from neurosurgery department of Xinjiang Uygur Autonomous region people's Hospital after surgical resection and pathological report. PCR method was used to detect the variation of IDH1 gene and immunohistochemical method was used to detect the expression of Ki-67 and the expression of Ki-67. The self-cultured glioma cells were inoculated into the brain of adult male Wistar rats by stereotactic orientation instrument. Using random number table, 120 male wistar rats were randomly divided into operation group (n = 60), sham operation group (n = 30) and blank group (n = 30). The operation group was divided into two groups: 30 rats in each group were transplanted with variant human glioma cells and wild-type glioma cells respectively, and the sham-operation group were transplanted with the same amount of normal saline. The rats in the blank control group were given routine feeding. The mice were fed normally. The rats in each group were killed and brain samples were taken by routine H _ E staining after imaging examination and recording of tumor size 3 weeks after the model was made. Glial fibrillary acidic protein (GFAP) immunofluorescence staining, microvessel determination and antigen Ki-67 detection. Results 1. There was no significant difference in tumor size between variant glioma group and non-variant group (197.55 鹵18.84 and 205.51 鹵20.84, respectively). There was no difference in growth rate. The expression of Ki-67 protein in IDH1 gene variant gliomas was significantly lower than that in non-variant gliomas (P 0.05). The vascular density count of IDH1 gene variant glioma was significantly lower than that of no mutation group (P 0.05). The results showed that IDH1 gene mutation could reduce the proliferative activity of tumor. 2. The human specimens showed that the Ki-67 protein expression of IDH1 gene variant glioma was lower than that of wild-type glioma. The difference was statistically significant (2.134P 0.039). The Ki-67 labeling index of IDH1 variant gliomas and wild-type gliomas were 14.44% 鹵8.23% and 21.19% 鹵11.49%, respectively. The vascular density count of IDH1 gene variant glioma was lower than that of wild-type glioma. The blood vessel density counts were 31.11 鹵13.47 and 40.54 鹵12.11, respectively. The expression of Ki-67 and MVD in low grade gliomas was higher than that in high grade gliomas. TV-8.369 (P0.001), low grade glioma (WHOI class II) and high grade glioma (III grade). The expression of Ki-67 in grade IV was 8.36% 鹵2.84% and 25.55% 鹵7.53%, respectively. The blood vessel density counts were 23.94 鹵8.03 and 45.54 鹵8.19, respectively. The results of animal experiments and human tumor specimens were basically consistent. Conclusion: IDH1 gene mutation has no significant effect on tumor growth and size, but it has an effect on tumor cell proliferation, because IDH1 gene mutation affects tumor energy metabolism. But the energy metabolism block reduces the cell proliferation activity, causes the large number of cells to be in the dormant phase, causes the neovascularization endothelial cell division slowly, the neovascularization blood vessel quantity reduces, the malignant transformation and the metastasis are inhibited. To provide a new theoretical basis for prolonging the survival of patients with IDH1 gene mutation.
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R739.4

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 李方成,余進,陶宗玉,李軍亮,林吉惠;膠質瘤細胞的生長速度與葡萄糖攝取的關系[J];中華實驗外科雜志;2003年10期

2 黃強;膠質瘤起源細胞探討[J];中國微侵襲神經(jīng)外科雜志;2003年08期

3 王飛,李世亭;膠質瘤的起源細胞與神經(jīng)干細胞的關系[J];中國腫瘤;2004年04期

4 高進喜,王守森,王如密;膠質瘤化療進展[J];中國微侵襲神經(jīng)外科雜志;2004年05期

5 李蘊潛,李毅平,李才;基質金屬蛋白酶2及其抑制物在人膠質瘤中的表達[J];吉林大學學報(醫(yī)學版);2004年06期

6 岳武;宋大勇;孔令秀;趙釗;孟祥喜;張旭;王殿洪;王策;;體外超聲激活血卟啉單甲醚抗C6膠質瘤細胞的研究[J];中國激光醫(yī)學雜志;2006年05期

7 高樹梓;高宜錄;林社裕;劉道坤;;C6膠質瘤細胞培養(yǎng)上清誘導神經(jīng)干細胞遷移的初步研究[J];中國神經(jīng)腫瘤雜志;2006年04期

8 江濤;王忠誠;;構建膠質瘤綜合治療體系[J];河北醫(yī)藥;2007年01期

9 刁宏宇;張明杰;高連波;喻博;李少一;王成林;;基質金屬蛋白酶9在膠質瘤中的表達[J];中國醫(yī)科大學學報;2007年01期

10 李振飛;張梅奎;張笑明;尹嶺;;平瘤康方劑對C6膠質瘤細胞增殖的抑制作用[J];中國康復理論與實踐;2007年05期

相關會議論文 前10條

1 楊孔賓;趙世光;劉炳學;陳曉豐;戴欽舜;;K~+通道阻斷劑四乙胺對大鼠膠質瘤細胞的增殖和凋亡影響[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

2 黃強;;膠質瘤生成細胞研究[A];第三屆中國腫瘤學術大會教育論文集[C];2004年

3 潘冬生;;聯(lián)合基因誘導體內(nèi)抗膠質瘤免疫反應的實驗研究[A];2011中華醫(yī)學會神經(jīng)外科學學術會議論文匯編[C];2011年

4 朱永堅;張建民;劉偉國;沈宏;;甲氧胺聯(lián)合β-欖香烯抑制膠質瘤細胞增殖的實驗研究[A];中華醫(yī)學會神經(jīng)外科學分會第九次學術會議論文匯編[C];2010年

5 謝爽;王學美;謝東澤;;鮮壁虎提取物抑制C6膠質瘤細胞增殖和凋亡的研究[A];第九屆全國中西醫(yī)結合腫瘤學術研討會論文集[C];2002年

6 楊正欽;;姜黃素抑制C6膠質瘤細胞增殖＼誘導其凋亡的分子機制[A];第十二屆全國神經(jīng)精神藥理學學術交流會論文集[C];2006年

7 張豫濱;楊孔賓;劉贊;葉遠柱;趙世光;;組蛋白去乙�；敢种苿┰黾拥鞍酌敢种苿⿲δz質瘤的凋亡[A];第四屆中國腫瘤學術大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學術會議論文集[C];2006年

8 石鍵;傅偉明;張宏;陳鵬;;外源性wt p53基因及對大鼠C6膠質瘤細胞的熱增敏效應[A];2008年浙江省神經(jīng)外科學學術年會論文匯編[C];2008年

9 周朋;劉曉謙;胡煒;;耐藥基因的表達與體外藥敏試驗對膠質瘤化療的指導意義[A];2011中華醫(yī)學會神經(jīng)外科學學術會議論文匯編[C];2011年

10 趙世光;韓大勇;趙洪波;滕雷;李一;;三氧化二砷緩釋片體內(nèi)對C6膠質瘤細胞的抑制作用[A];中國醫(yī)師協(xié)會神經(jīng)外科醫(yī)師分會第四屆全國代表大會論文匯編[C];2009年

相關重要報紙文章 前5條

1 衣曉峰　馮宇曦;中藥三氧化二砷有望成為治療膠質瘤新藥[N];中國醫(yī)藥報;2011年

2 記者 匡遠深;讓膠質瘤干細胞不再“繁殖”[N];健康報;2011年

3 張獻懷　張文;瘤區(qū)埋雷 持續(xù)殺傷[N];健康報;2007年

4 白毅;人腦膠質瘤基礎與應用研究喜結“九大碩果”[N];中國醫(yī)藥報;2006年

5 王德江；劉藏；王貴懷；曹勇；王新生；肖新如;交流最新進展 提高診治水平[N];中國醫(yī)藥報;2005年

相關博士學位論文 前10條

1 陳儇;氯化甲基汞抗鼠膠質瘤細胞作用的體內(nèi)外實驗研究[D];吉林大學;2007年

2 俞磊;膠質瘤中異檸檬酸脫氫酶基因的檢測及其對化療療效的影響[D];南方醫(yī)科大學;2012年

3 范左栩;低氧微環(huán)境對體外培養(yǎng)膠質瘤干細胞增殖的影響及機制研究[D];浙江大學;2013年

4 黃吉煒;膠質瘤特異性4optHBS-Msi1/GFAP啟動子的構建評價及其在基因治療中的初步應用[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2009年

5 黃偉;EZH2基因調控腦膠質瘤細胞惡性生物學行為的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2010年

6 楊柳松;不同1p雜合性缺失特征少枝膠質瘤的差異蛋白質組學研究[D];復旦大學;2010年

7 楊冰;膠質瘤相關新基因的研究[D];復旦大學;2005年

8 王舒楠;內(nèi)皮祖細胞參與膠質瘤微血管形成及功能的活體影像學研究[D];第三軍醫(yī)大學;2012年

9 劉國棟;轉鐵蛋白修飾的載阿霉素氧化石墨烯納米粒抗膠質瘤實驗研究[D];蘇州大學;2013年

10 范文海;蛋白酶體抑制劑對膠質瘤細胞誘導凋亡作用及機制研究[D];吉林大學;2012年

相關碩士學位論文 前10條

1 孫珊珊;~1H-MRS在檢測膠質瘤早期放療反應中的應用研究[D];山東大學;2012年

2 張軍霞;基因工程內(nèi)皮祖細胞介導的靶向血管新生治療膠質瘤的研究[D];南京醫(yī)科大學;2008年

3 李宗豪;膠質瘤干細胞研究進展[D];河北醫(yī)科大學;2009年

4 李科;苯丁酸鈉體外誘導大鼠C6膠質瘤細胞分化及凋亡的研究[D];山東大學;2010年

5 徐鑫;缺氧誘導因子-1α與葡萄糖轉運蛋白-3在膠質瘤中的表達[D];河北醫(yī)科大學;2008年

6 蔣國梁;C6膠質瘤細胞對神經(jīng)干細胞遷移的實驗研究[D];昆明醫(yī)學院;2009年

7 陳寶敏;膠質瘤干細胞生物學特性比較及放射耐受機制的初步研究[D];蘇州大學;2010年

8 唐駿啟;牛黃體細胞與C6膠質瘤細胞共培養(yǎng)及凋亡相關基因在大鼠黃體中的表達[D];西北農(nóng)林科技大學;2009年

9 沈云天;膠質瘤干祖細胞在惡性膠質瘤放射抗拒中作用的初步研究[D];蘇州大學;2008年

10 張景澤;逆轉錄酶抑制劑AZT對大鼠C6膠質瘤細胞作用的體外研究[D];昆明醫(yī)學院;2009年

本文編號：1444367