本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子EB在氧化應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞自噬中的作用　出處：《蘇州大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： ALS 轉(zhuǎn)錄因子EB 氧化修飾 自噬

【摘要】：背景:肌萎縮性側(cè)索硬化癥(ALS)是一類成年發(fā)病并且伴隨進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)退行性疾病,目前尚無(wú)有效的治療方法。自噬對(duì)于此類疾病中出現(xiàn)的毒性蛋白聚集的質(zhì)量控制具有重要意義,而轉(zhuǎn)錄因子EB(TFEB)是調(diào)控自噬的主要角色。目的:研究氧化條件下TFEB對(duì)細(xì)胞自噬調(diào)控的影響,以及該影響是否依賴于TFEB自身的氧化修飾,并在此基礎(chǔ)上找出TFEB上可能的氧化修飾位點(diǎn)以及氧化應(yīng)激條件下TFEB入核的機(jī)制。方法:在HEK293細(xì)胞中分別過(guò)表達(dá)帶有綠色熒光蛋白的野生型和突變了可能存在氧化修飾的位點(diǎn)的TFEB的質(zhì)粒,分別對(duì)野生型和突變型以過(guò)氧化氫(雙氧水)、加藥(mTOR抑制劑Torin-1)和饑餓處理,使用熒光顯微鏡、核質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)和Western Blotting(蛋白質(zhì)免疫印跡法)等實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)TFEB在胞質(zhì)胞核中的分布以及細(xì)胞自噬的水平。雙熒光法監(jiān)測(cè)自噬流。用免疫共沉淀來(lái)驗(yàn)證雙氧水影響TFEB與Rag GTPases的結(jié)合。結(jié)果:雙氧水處理?xiàng)l件下,短時(shí)間內(nèi),野生型TFEB迅速進(jìn)核,而突變型TFEB大部分停留在胞質(zhì)中,并且突變型自噬水平的升高明顯低于野生型;Torin-1和饑餓分別處理?xiàng)l件下,野生型和突變型TFEB的入核需要較長(zhǎng)時(shí)間。雙氧水誘導(dǎo)自噬增加。加入雙氧水后TFEB與Rag GTPases的結(jié)合消失。結(jié)論:(1)氧化條件下,短時(shí)間內(nèi)TFEB主要通過(guò)自身氧化導(dǎo)致其入核從而上調(diào)細(xì)胞自噬,此時(shí)TFEB的入核途徑不同于mTOR抑制條件下及饑餓條件下的入核途徑。(2)實(shí)驗(yàn)所設(shè)計(jì)的突變體順利找到并證實(shí)了TFEB上的氧化修飾位點(diǎn),該位點(diǎn)的存在使得TFEB可直接通過(guò)自身氧化修飾位點(diǎn)的氧化而迅速產(chǎn)生入核的應(yīng)答。(3)雙氧水破壞TFEB與Rag GTPases的結(jié)合進(jìn)而TFEB入核
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R744.8

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 邢國(guó)勝;賀桂泉;趙文君;;藥物對(duì)細(xì)胞自噬性死亡的干預(yù)作用[J];天津藥學(xué);2011年03期

2 ;《現(xiàn)代細(xì)胞自噬分子生物學(xué)》出版[J];診斷學(xué)理論與實(shí)踐;2011年05期

3 ;《現(xiàn)代細(xì)胞自噬分子生物學(xué)》出版[J];診斷學(xué)理論與實(shí)踐;2011年06期

4 陳蘭芳;肖亮;楊軍平;;細(xì)胞自噬的分子機(jī)制及其功能[J];實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2014年02期

5 李桂蘭;閆華超;;細(xì)胞自噬對(duì)衰老的調(diào)節(jié)[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2010年09期

6 王琦;蘇舒;王立新;;胞內(nèi)感染病原體與細(xì)胞自噬相互作用的研究進(jìn)展[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2010年03期

7 ;《自然-細(xì)胞生物學(xué)》:蛋白抗癌與其誘導(dǎo)細(xì)胞自噬有關(guān)[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2010年20期

8 汪昌麗;滿娜;溫龍平;;納米材料誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的效應(yīng)及生物學(xué)功能[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年01期

9 錢(qián)帥偉;漆正堂;支彩霞;丁樹(shù)哲;;抑癌基因p53與細(xì)胞自噬[J];生命的化學(xué);2011年05期

10 馬泰;孫國(guó)平;李家斌;;細(xì)胞自噬的研究方法[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2012年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 許赤;陳文捷;楊楊;李華;易述紅;陳規(guī)劃;;老年大鼠肝臟細(xì)胞自噬及其移植后改變[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

2 劉杰民;紀(jì)云西;蔣歷;黃貴華;鄭超偉;郭超峰;;細(xì)胞自噬是探索中醫(yī)藥微觀機(jī)制的新思路[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)第二十四次全國(guó)脾胃病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2012年

3 李康生;代劍平;;病毒感染與細(xì)胞自噬[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2011年

4 楊鍵;鄧玉杰;張曉燕;呂鵬飛;徐俊;楊穎;寧光;;脂肪細(xì)胞自噬檢測(cè)方法的建立及意義探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

5 陳英;樸英杰;;人肝細(xì)胞自噬性凋亡的形態(tài)學(xué)觀察[A];第十二屆全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文集[C];2002年

6 楊鍵;鄧玉杰;張曉燕;呂鵬飛;徐俊;楊穎;寧光;;脂肪細(xì)胞自噬檢測(cè)方法的建立及意義探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)第十六次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

7 趙穎;楊靜;廖文娟;劉向宇;張輝;王杉;王冬來(lái);馮京南;俞立;朱衛(wèi)國(guó);;胞漿中Fox01引起細(xì)胞自噬進(jìn)而發(fā)揮抑制腫瘤的功能[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)第七屆全國(guó)中青年腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議——中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)“中華腫瘤 明日之星”大型評(píng)選活動(dòng)暨中青年委員全國(guó)遴選論文匯編[C];2011年

8 陳永;鄒s舠，

本文編號(hào)：1348363