刺激前庭器官對大鼠部分基底神經(jīng)節(jié)c-Fos蛋白表達(dá)的影響
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【摘要】:黑質(zhì)-紋狀體多巴胺系統(tǒng)和膽堿能系統(tǒng)之間的功能失衡會引起帕金森氏病(Parkinson's disease, PD),此病的運動系統(tǒng)功能障礙為最大特點。人類及動物的運動和平衡能力在很大程度上是由前庭功能調(diào)控的。研究表明,PD患者伴有前庭功能減退者明顯多于正常人,同時PD模型動物前庭神經(jīng)核(vestibular nuclear, VN)內(nèi)谷氨酸的含量和受體發(fā)生改變。這可能是患有帕金森的病人出現(xiàn)無法阻止性的震顫以及運動失衡的原因之一。最近發(fā)現(xiàn),適當(dāng)?shù)拇碳ぷ饔糜谇巴テ鞴倏梢愿纳芇D患者或模型動物的運動功能,而且VN可以通過束旁核間接地與紋狀體發(fā)生突觸聯(lián)系。但是前庭神經(jīng)系統(tǒng)與束旁核、黑質(zhì)、紋狀體間的功能聯(lián)系尚無研究報道。本次實驗通過大鼠實驗,擬用前庭電刺激結(jié)合免疫組化、藥理學(xué)等方法,觀察大鼠腦內(nèi)的神經(jīng)核團(tuán)情況,主要核團(tuán)有前庭內(nèi)側(cè)核、丘腦束旁核、黑質(zhì)、紋狀體,觀察這些區(qū)域核團(tuán)的c-Fos蛋白表達(dá)情況。探討前庭器官與基底神經(jīng)節(jié)之間的功能聯(lián)系及其神經(jīng)化學(xué)和受體機(jī)制。實驗方法:本研究選用體重250g-300g的清潔級SD雄性大鼠。首先用水合氯醛(300mg/kg)進(jìn)行麻醉,進(jìn)行外科手術(shù),皮膚表面消毒后沿耳緣進(jìn)行切口剪開,用微型電鉆磨平耳鼓表面,暴漏水平半規(guī)管,沿著水平半規(guī)管的方向向壺腹嵴處插入尖端裸露的漆包線電極,牙科水泥固定,通過此方法將電極插入外周前庭器官后進(jìn)行刺激外周前庭器官。分成兩大組:空白對照組、實驗組?瞻讓φ战M大鼠取6例,將刺激電極植入大鼠前庭器官后不給與電刺激。實驗組包括前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核(Medial vestibular nucleus, MVN)組、束旁核(Parafascicularis, PF)組、紋狀體(Caudate putamen, CPu)組、黑質(zhì)(Substantia nigra, SNR)等4個組,每組6例,共24例。各組大鼠前庭器官植入電極,隨后給予電刺激。根據(jù)刺激后動物的動眼反應(yīng)尋找最佳的刺激參數(shù)后,在最佳刺激條件下,利用免疫組織化學(xué)的方法觀察大鼠前庭內(nèi)側(cè)核、丘腦束旁核、黑質(zhì)和紋狀體區(qū)c-Fos蛋白表達(dá)的變化;尋找最佳的刺激參數(shù)和變化最明顯的蛋白表達(dá),并記錄下來。實驗結(jié)果:1.最佳刺激參數(shù)是電流強(qiáng)度:1mA;頻率:50Hz;延遲:0.1ms;波寬:1.0ms;時間:3min。2.通過最佳刺激參數(shù)刺激大鼠外周前庭器官后,統(tǒng)計觀察對前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核區(qū)c-FOS蛋白表達(dá)的影響。刺激外周前庭器官后,前庭神經(jīng)內(nèi)側(cè)核區(qū)c-Fos蛋白陽性神經(jīng)元表達(dá)數(shù)目由對照組的5.72增加到34.80,經(jīng)過SPSS軟件分析,組間比較差異顯著,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05,n=6);3.刺激外周前庭器官束旁核區(qū)c-Fos蛋白表達(dá)明顯增多(由對照組7.93增加到85.76),與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05,n=6);4.刺激外周前庭器官也能使紋狀體區(qū)c-Fos蛋白表達(dá)(37.92)明顯多于對照組(4.98)(P0.05,n=6);5.刺激外周前庭器官對黑質(zhì)區(qū)c-Fos蛋白表達(dá)沒有明顯影響,無顯著性差異(P0.05,n=6)結(jié)論:1.刺激外周前庭器官,引起基底神經(jīng)節(jié)功能改變的最佳刺激參數(shù)是電流強(qiáng)度:1mA;頻率:50Hz;延遲:0.1ms;波寬:1.0ms;時間:3min。2.刺激外周前庭器官,不僅影響MVN的c-Fos蛋白陽性神經(jīng)元的表達(dá),同時也可以改變PF和CPu的神經(jīng)元活動。
【學(xué)位授予單位】:延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R742.5
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,本文編號:1294705
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