發(fā)布時(shí)間：2017-12-14 15:25

  本文關(guān)鍵詞：慢性腦缺血致認(rèn)知障礙大鼠線粒體損傷機(jī)制及腦脈泰保護(hù)作用研究

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【摘要】：血管性癡呆是一系列腦血管病因素引起的腦組織損害，同時(shí)伴有嚴(yán)重記憶減退和認(rèn)知障礙的綜合征。其中缺血性腦血管病在發(fā)病原因中居首位。各種因素引起的慢性腦缺血作為神經(jīng)系統(tǒng)一種常見的病理生理過程，被認(rèn)為是VD、AD、Binswanger病等許多疾病的共同的病理生理過程，成為研究血管性癡呆發(fā)病機(jī)制的主要研究方向。 雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎模擬慢性腦缺血導(dǎo)致血管性癡呆模型，能夠檢測(cè)到海馬、皮質(zhì)等區(qū)域腦血量下降，神經(jīng)元細(xì)胞脫失凋亡，乙酰膽堿水平下降，能量代謝異常及氧化應(yīng)激等變化。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，在慢性腦缺血早期與線粒體代謝有關(guān)的多種神經(jīng)突觸蛋白已發(fā)生改變。線粒體作為能量產(chǎn)生的工廠，同時(shí)也是細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生氧自由基最多的部位。早期應(yīng)用腦脈泰可提高血管性癡呆大鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力，改善大鼠認(rèn)知功能。腦脈泰是由紅參、三七、當(dāng)歸、丹參等組成的中藥制劑，具有益氣活血、化瘀通絡(luò)之功效，但其改善大鼠認(rèn)知功能的機(jī)制尚不清楚。 目的： 1.制備慢性腦缺血致血管性癡呆大鼠模型，觀察其線粒體發(fā)病機(jī)制。 2.觀察腦脈泰對(duì)血管性癡呆大鼠認(rèn)知功能、海馬及額葉皮質(zhì)神經(jīng)元凋亡的影響，，探究腦脈泰改善血管性癡呆認(rèn)知功能的病理基礎(chǔ)及線粒體抗氧化應(yīng)激作用機(jī)制。 方法： 1.采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈永久性結(jié)扎法(2-VO)制備血管性癡呆模型。術(shù)后分別給予腦脈泰不同劑量灌胃治療6周。應(yīng)用Morris水迷宮檢測(cè)大鼠認(rèn)知功能的改變。 2.HE染色觀察海馬CA1區(qū)及額葉皮質(zhì)神經(jīng)元形態(tài)變化。 3.檢測(cè)血管性癡呆大鼠的腦組織線粒體功能，包括線粒體活性氧（ROS）、錳超氧化物歧化酶（SOD）、線粒體腫脹度、膜電位等；免疫印跡法檢測(cè)腦組織線粒體Sirt3和PGC-1α的蛋白表達(dá)變化。 結(jié)果： 1.定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與假手術(shù)組大鼠相比，模型組大鼠潛伏期明顯延長(zhǎng)，兩者的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。在空間探索實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，與假手術(shù)組相比，模型組大鼠在跨越原平臺(tái)時(shí)間和次數(shù)上均減少，具有顯著差異（P＜0.05），說明模型組大鼠記憶能力下降。高劑量給藥組跨越原平臺(tái)時(shí)間和次數(shù)提高明顯，與模型組相比差異顯著（P＜0.05）。在空間探索實(shí)驗(yàn)的運(yùn)動(dòng)軌跡圖可看出，模型組的運(yùn)動(dòng)軌跡為邊緣式，而假手術(shù)組大鼠運(yùn)動(dòng)的目標(biāo)性較強(qiáng)，多集中在原平臺(tái)所在的第三象限，給藥組大鼠運(yùn)動(dòng)軌跡較模型組改善明顯，尤其是高劑量給藥效果更好。 2.觀察慢性腦缺血致血管性癡呆大鼠HE染色病理切片可以發(fā)現(xiàn)，與假手術(shù)組相比，模型組大鼠的海馬CA1區(qū)和額葉皮質(zhì)的正常神經(jīng)元數(shù)目明顯減少，細(xì)胞凋亡缺失嚴(yán)重。腦脈泰給藥組HE染色神經(jīng)元細(xì)胞核染色、細(xì)胞形態(tài)、排列等得到明顯改善。 3.與假手術(shù)組相比，慢性腦缺血模型組大鼠線粒體ROS生成增加，腫脹明顯，膜電位下降，SOD活性下降。腦脈泰給藥組能夠降低線粒體ROS生成，減弱線粒體腫脹程度，線粒體膜電位得到提高，增加線粒體SOD活性。腦脈泰對(duì)線粒體功能具有改善作用。慢性腦缺血模型組大鼠線粒體Sirt3和PGC-1α蛋白水平明顯低于假手術(shù)組（P＜0.05）。與模型組大鼠相比，腦脈泰給藥組大鼠兩類蛋白的表達(dá)水平明顯升高，差異具有顯著性（P＜0.05）。 結(jié)論： 1.慢性腦缺血可致大鼠出現(xiàn)進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙。 2.腦脈泰可以改善血管性癡呆大鼠的認(rèn)知功能，提高空間學(xué)習(xí)、記憶能力。 3.大鼠慢性腦缺血后線粒體功能受損，ROS生成增加，SOD活性水平下降，Sirt3和PGC-1α蛋白表達(dá)受抑制，進(jìn)而導(dǎo)致認(rèn)知障礙。 4.腦脈泰給藥可改善線粒體功能，提高Sirt3和PGC-1α蛋白的表達(dá)，推測(cè)其通過參與慢性腦缺血后氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)而改善認(rèn)知。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R743.3

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 樊敬峰;王偉斌;呂佩源;梁翠萍;尹昱;;血管性癡呆小鼠海馬膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶mRNA表達(dá)特征研究[J];中華神經(jīng)醫(yī)學(xué)雜志;2006年10期

2 張海寧;孫莉;湯躍宇;王明宇;吳江;;腦脈泰對(duì)慢性腦缺血致血管性癡呆大鼠腦血流量及海馬神經(jīng)元凋亡的影響[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2009年04期

3 席蕾;汪槿;鄭卉;王群;;甲狀腺激素對(duì)慢性腦缺血大鼠海馬細(xì)胞的保護(hù)作用和機(jī)制[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2013年05期

4 孫莉,吳江,王守春,張昱;血管性癡呆大鼠腦血流量及細(xì)胞凋亡的研究[J];中華老年心腦血管病雜志;2001年06期

5 田瑜;趙瑛;宋春燕;;慢性腦缺血致血管性癡呆的研究現(xiàn)狀[J];中國(guó)腦血管病雜志;2010年09期

6 于愷,田沈,孟秀君,高藹峰;胰島素對(duì)大鼠腦缺血再灌注時(shí)神經(jīng)元凋亡及其相應(yīng)基因的調(diào)控[J];中國(guó)臨床康復(fù);2003年16期

7 孫 莉 ,吳 江 ,王守春 ,張 昱;慢性前腦缺血大鼠學(xué)習(xí)、記憶功能的研究[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2002年01期

8 吳章福;高曉平;李光武;;改良雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法與傳統(tǒng)法制備的大鼠慢性腦缺血模型比較[J];中國(guó)康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2012年03期

9 趙憲林,方秀斌,李東培;大鼠血管性癡呆模型制作[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年03期

10 舒怡;張洪;章軍建;;慢性腦低灌注的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J];中華腦血管病雜志(電子版);2010年03期

本文編號(hào)：1288407