一種改進的星形膠質(zhì)細胞原代培養(yǎng)方法
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【摘要】:目的改進大鼠大腦皮質(zhì)星形膠質(zhì)細胞的體外培養(yǎng),旨在通過較簡便的方法獲得高純度形態(tài)典型的星形膠質(zhì)細胞,為研究星形膠質(zhì)細胞的生物學(xué)作用提供實驗?zāi)P。方法以新生大鼠為星形膠質(zhì)細胞來源,利用不同規(guī)格的吸頭相互疊套,逐步機械吹打,使細胞分散,制備單細胞懸液;獲得的單細胞懸液用差速黏附處理去除成纖維細胞,原代培養(yǎng)14d后,恒溫振蕩法去除小膠質(zhì)細胞等雜質(zhì)細胞;膠質(zhì)細胞原纖維酸性蛋白(GFAP)和S100β免疫熒光共染色,鑒定細胞純度。結(jié)果這種改進的星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)方法 ,分離培養(yǎng)出星形膠質(zhì)細胞,陽性率達95%以上。結(jié)論采用機械吹打方法建立原代星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)體系,是一種比較簡便、值得推廣的可用于體外細胞培養(yǎng)研究工作的有效方法。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系;
【基金】:北京市自然科學(xué)基金資助項目(7142016) 首都醫(yī)科大學(xué)科研基金(技術(shù)類)(2015JS13)
【分類號】:R741
【正文快照】: 存在,為了深入了解其形態(tài)結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能,需要對星形膠質(zhì)細胞進行純化。以往有關(guān)星形膠質(zhì)細胞培養(yǎng)的文獻很多,本文在參考了國內(nèi)外有關(guān)文獻的基礎(chǔ)上[1-5],對傳統(tǒng)的、使用胰酶消化來制備星形膠質(zhì)細胞的方法進行了改良,旨在為進一步深入研究星形膠質(zhì)細胞的功能奠定實驗基礎(chǔ)。材
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,本文編號:1184896
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