本文關(guān)鍵詞：梅毒螺旋體大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因突變位點檢測

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【摘要】：梅毒（syphilis）是一種慢性經(jīng)典的性傳播疾病，梅毒螺旋體（TreponemaPallidum，TP）是引起梅毒的病原體，其可侵犯全身各器官（全身皮膚黏膜、心血管、神經(jīng)、骨骼等），，造成多系統(tǒng)損害，產(chǎn)生多種多樣的癥狀和體征，梅毒也因此被稱為“最大模仿者”。對于梅毒的治療，青霉素是首選的治療藥物，但是在治療上存在一些問題，如：青霉素過敏反應(yīng)及肌肉注射引起疼痛和不便等，嚴(yán)重影響了青霉素應(yīng)用的安全性和患者的依從性。鑒于青霉素治療的局限性，人們一直在尋找既具有較好療效，又方便服用的治療藥物。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素如阿奇霉素是近年來備受關(guān)注的藥物，對梅毒螺旋體有殺傷活性，治療早期及潛伏期梅毒有效，在組織中的半衰期較長，只需單劑量口服，并且可同時治療其他性傳播疾�。⊿TD），因此大環(huán)內(nèi)酯類抗生素被用于梅毒的預(yù)防及治療。但近年來研究發(fā)現(xiàn)，梅毒螺旋體對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素出現(xiàn)了耐藥，耐藥基因定位于TP23SrRNA基因的2058或2059位由A突變?yōu)镚（A2058G，A2059G）。之后多個國家和地區(qū)進(jìn)行了大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因突變位點的檢測，耐藥率各不相同。迄今為止，山東地區(qū)未有梅毒螺旋體大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥突變位點檢測的報道，因此本研究收集66例梅毒螺旋體DNA標(biāo)本進(jìn)行TP23SrRNA基因突變位點檢測。 實驗?zāi)康模?.檢測山東地區(qū)TP菌株是否存在大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因（23SrRNA）突變位點；2.統(tǒng)計山東地區(qū)TP大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥率；3.評估山東地區(qū)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素能否作為治療梅毒的替代藥物 實驗方法：收集疑似梅毒患者肛門及生殖器潰瘍標(biāo)本，提取TP DNA，經(jīng)實時熒光定量PCR證實為梅毒螺旋體，然后進(jìn)行23SrRNA基因目的片段的擴(kuò)增，對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行純化并直接目的片段測序進(jìn)行序列分析，檢測突變位點。 實驗結(jié)果：本研究發(fā)現(xiàn)梅毒螺旋體大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因23SrRNA基因上的兩個突變位點，且66份標(biāo)本均含有突變位點（100%），61份標(biāo)本測序含有A2058G突變，5份標(biāo)本測序含有A2059G突變，其中A2059G為國內(nèi)首次報道。 結(jié)論：首先，梅毒螺旋體大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥率在山東地區(qū)較高，因此大環(huán)內(nèi)酯類抗生素不推薦作為梅毒治療的替代藥物。其次，兩耐藥突變位點的報道（A2059G在國內(nèi)首次報道），表明了耐藥菌株地理分布及菌株的多樣性。
【關(guān)鍵詞】：梅毒螺旋體 大環(huán)內(nèi)酯類抗生素 23S rRNA基因 A2058G突變 A2059G突變
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R759.1
【目錄】：

• 導(dǎo)師簡介5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 英文縮略詞表11-12
• 第一章 前言12-16
• 第二章 實驗材料與方法16-35
• 2.1 研究對象16
• 2.2 實驗試劑16-18
• 2.3 實驗相關(guān)器材18-20
• 2.4 分析軟件20
• 2.5 實驗方法20-35
• 第三章 結(jié)果35-37
• 3.1 病例資料（66 例梅毒患者）35-36
• 3.2 PCR 產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果36
• 3.3 測序結(jié)果36-37
• 第四章 討論37-40
• 第五章 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-43
• 附錄43-47
• 綜述47-53
• 參考文獻(xiàn)51-53
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文53-54
• 在校期間所獲獎勵54-56
• 致謝56

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