發(fā)布時(shí)間：2017-09-01 01:34

  本文關(guān)鍵詞：shRNA沉默CDK2基因?qū)16-F1細(xì)胞小鼠皮下移植瘤的影響

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【摘要】：目的早期惡性黑色素瘤可以通過手術(shù)切除的方式得到緩解,發(fā)生轉(zhuǎn)移的黑色素瘤由于其耐藥性,預(yù)后較差。為探索治療黑色素瘤的新方法,本研究探討由慢病毒載體pUL介導(dǎo)的shRNA沉默CDK2基因?qū)谏亓黾?xì)胞B16-F1皮下移植瘤生長的影響。方法于C57BL/6小鼠右側(cè)腹股溝皮下注射B16-F1細(xì)胞建立移植瘤模型,采用癌灶多點(diǎn)注射的方法分為空白對照組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組(n=5)。陰性對照組,采用癌灶多點(diǎn)注射的方法將攜帶NC-shRNA的重組慢病毒(滴度為2×108 TU/mL)導(dǎo)入腫瘤灶,每只小鼠200μL,隔日1次,共6次,觀察18d;空白對照組,用與陰性對照組相同的方式方法向瘤體注射PBS,觀察18d;實(shí)驗(yàn)組,采用癌灶多點(diǎn)注射的方法將攜帶CDK2-shRNA的重組慢病毒(滴度為2×108 TU/mL)導(dǎo)入腫瘤灶,每只小鼠200μL,隔日1次,共6次,觀察18d。觀察腫瘤生長情況并繪制腫瘤生長曲線,18d后殺鼠取瘤稱瘤質(zhì)量,計(jì)算腫瘤生長抑制率,TUNEL檢測腫瘤組織細(xì)胞凋亡情況,蛋白質(zhì)印跡法檢測腫瘤組織細(xì)胞中CDK2蛋白表達(dá)情況。結(jié)果 C57BL/6小鼠接種瘤細(xì)胞3d后均有腫瘤形成。治療的第6天空白對照組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組的腫瘤體積分別為(48.7±8.4)、(50.0±8.9)和(31.4±8.7)mm3,實(shí)驗(yàn)組與空白對照組和陰性對照組相比,腫瘤生長速度明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,F=8.879,P=0.004�？瞻讓φ战M、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組的腫瘤重量分別為(0.56±0.10)、(0.55±0.11)和(0.28±0.07)g,實(shí)驗(yàn)組與空白對照組和陰性對照組相比,腫瘤體質(zhì)量明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=13.659,P=0.001),實(shí)驗(yàn)組與空白對照組相比腫瘤生長抑制率為50.2%;空白對照組、陰性對照組和實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡指數(shù)分別為(7.73±1.08)%、(7.87±1.42)%和(32.27±3.62)%,實(shí)驗(yàn)組與空白對照組和陰性對照組相比,瘤細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,F=189.748,P0.001。實(shí)驗(yàn)組與空白對照組和陰性對照組相比,組織細(xì)胞中CDK2蛋白的表達(dá)顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=293.346,P0.001),實(shí)驗(yàn)組相對于空白對照組CDK2蛋白表達(dá)的抑制率為50.4%。結(jié)論重組慢病毒CDK2-shRNA沉默CDK2基因的表達(dá)能有效抑制B16-F1細(xì)胞移植瘤的生長,CDK2基因可能成為黑色素瘤基因治療的有效靶點(diǎn)。
【作者單位】： 鶴壁職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院;湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 黑色素瘤 CDK 基因沉默 CBL/小鼠 移植瘤
【基金】：河南省科技計(jì)劃(122300410193) 河南省高等學(xué)校青年骨干教師資助計(jì)劃(2011GGJS-262)
【分類號】：R739.5
【正文快照】： 2.湖北省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院,湖北武漢4300643.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,河南鄭州450052中華腫瘤防治雜志,2016,23(9):592-596Chin J Cancer Prev Treat,2016,23(9):592-596早期惡性黑色素瘤可以通過手術(shù)切除的方式得到緩解,一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移,臨床應(yīng)用各種化學(xué)藥物和生物藥

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