氨甲環(huán)酸對人培養(yǎng)黑素細胞生物學影響和相關分子機制的研究
本文關鍵詞:氨甲環(huán)酸對人培養(yǎng)黑素細胞生物學影響和相關分子機制的研究
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【摘要】:目的:探討氨甲環(huán)酸對體外培養(yǎng)人黑素細胞增殖及黑素合成和酪氨酸酶代謝的影響,并進一步從基因水平研究氨甲環(huán)酸作用于黑素細胞的分子機制,觀察氨甲環(huán)酸對黑素細胞酪氨酸酶,酪氨酸酶相關蛋白-1、小眼畸形轉錄因子MITF的mRNA表達的影響,探討氨甲環(huán)酸藥物治療黃褐斑的作用機理。方法:取正常人包皮組織,于體外培養(yǎng)純的黑素細胞,選擇對數生長期的細胞進行培養(yǎng),設紫外線照射和非照射組,在黑素細胞培養(yǎng)液中加入不同濃度的氨甲環(huán)酸,并以空白做為對照,繼續(xù)培養(yǎng)24-72小時后,用cck-8法觀察氨甲環(huán)酸對黑素細胞增殖的影響;采用多巴氧化方法測定黑素細胞酪氨酸酶活性,用NaOH法測定黑素細胞黑素的含量,并用RT-PCR的方法檢測酪氨酸酶,酪氨酸酶相關蛋白-1、小眼畸形轉錄因子MITF的mRNA表達。結果:氨甲環(huán)酸對紫外線照射和非照射組的黑素細胞的增殖均無明顯抑制作用;500mg/ml和1000mg/ml濃度的氨甲環(huán)酸對紫外線照射和非照射的黑素細胞的酪氨酸酶活性有明顯抑制作用,而1000mg/ml濃度的氨甲環(huán)酸對黑素含量的抑制作用與空白對照組比較,具有統(tǒng)計學意義(P0.05),氨甲環(huán)酸的濃度對體外培養(yǎng)的黑素細胞的增殖無相關性(P0.05)、而與黑素合成和酪氨酸酶的抑制效應有相關性(P0.05):與空白組比較,500mg/ml和1000mg/ml濃度的氨甲環(huán)酸使酪氨酸酶相關蛋白-1、酪氨酸酶的mRNA的表達均減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);而1000mg/ml濃度氨甲環(huán)酸使MITF的mRNA的表達減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)、氨甲環(huán)酸的濃度與作用之間有相關(P0.05)。結論:氨甲環(huán)酸對于體外培養(yǎng)人黑素細胞具有直接作用,可以抑制酪氨酸酶活性及黑素合成,且與藥物濃度呈劑量依賴,但對黑素細胞的增殖無明顯作用;在基因水平可以降低黑素細胞酪氨酸酶、酪氨酸酶相關蛋白-1及轉錄因子MITF的mRNA表達,并與其藥物濃度有劑量相關:氨甲環(huán)酸通過下調MITF的表達,抑制酪氨酸酶的合成,從而減少黑素合成量,減淡色斑。
【關鍵詞】:氨甲環(huán)酸 黑素細胞 酪氨酸酶 mRNA
【學位授予單位】:新疆醫(yī)科大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R751
【目錄】:
- 中英文縮略詞對照表5-9
- 摘要9-10
- Abstract10-12
- 前言12-17
- 第一部分 氨甲環(huán)酸對黑素細胞增殖及黑素合成代謝的影響17-44
- 1 研究內容與方法17-21
- 1.1 研究對象18-19
- 1.1.1 主要材料與試劑18-19
- 1.1.2 主要儀器和器皿19
- 1.2 研究內容與方法19-20
- 1.2.1 研究內容19
- 1.2.2 研究方法19-20
- 1.4 統(tǒng)計學方法20-21
- 2 結果21-26
- 3 討論26-42
- 4 小結42-44
- 第二部分 氨甲環(huán)酸對黑素細胞酪氨酸酶及相關蛋白和轉錄因子的mRNA表達的影響44-64
- 1 研究內容和方法45-48
- 1.1 研究對象45-46
- 1.1.1 主要材料與試劑45
- 1.1.2 主要儀器和器皿45-46
- 1.2 研究內容與方法46-48
- 1.2.1 研究內容46
- 1.2.2 研究方法46-48
- 1.3 統(tǒng)計方法48
- 2 結果48-49
- 3 討論49-62
- 4 小結62-64
- 結論64-65
- 致謝65-66
- 參考文獻66-79
- 綜述79-89
- 參考文獻84-89
- 攻讀博士學位期間獲得的學術成果89-90
- 個人簡歷90-91
- 導師評閱表91
【參考文獻】
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,本文編號:525357
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